Выбранные посев объемы воды засевают: 1 см3 пробы воды и 1 см3 из разбавлений - в 10 см3 лактозо-пептонной среды нормальной концентрации. Посевы инкубируют 24 +- 2 часа при температуре 37 + - 0,5°С.
Учет результатов. Полное отсутствие изменения среды или помутнение без образования газа позволяет дать отрицательный ответ. Из посевов в среду накопления, где отмечено помутнение и газообразование, производят высев на поверхность подтверждающей плотной среды Эндо с добавлением фуксина, разделенной на 3 - 4 сектора с таким расчетом, чтобы получать изолированные колонии. Посев инкубируют при 37 +- 0,5°С 24 - 18 часов. При наличии в среде накопления помутнения и газообразования, а при высеве на подтвержденную среду характерных для ЛКП колоний (темно-красных с металлическим блеском и без него, слизистых крупных, изменяющих цвет среды) дают положительный ответ.
В тех случаях, когда имеет место сомнительная реакция в средах накопления (небольшое газообразование) или на среде Эндо выросли не характерные для ЛКП колонии, подтверждают принадлежность выросших колоний к лактозоположителным кишечным палочкам. По две колонии каждого типа макроскопируют с окраской по Граму, засевают в полужидкую среду с лактозой уколом до дна пробирки и инкубируют при температуре 37°С. Через 5 часов инкубации посевов производят учет. При образовании кислоты и газа хотя бы в одной пробирке, результат анализа считают положительным. При отсутствии изменений среды дают отрицательный ответ. При наличии только кислоты окончательный ответ учитывают через 24 часа.
Для подтверждения способности бактерий ферментировать лактозу можно использовать и лактозо-пептнонную среду накопления с поплавками. Учет результатов в этом случае следует производить через 24 часа.
Ускоренный подтверждающий метод.
В сомнительных случаях на колонии, выросшие на секторе Эндо, накапывают реактив для определения оксидазной активности. При наличии в среде накопления помутнения и газообразования, а на секторе среда Эндо колоний одного из следующих видов: темно-красных с металлический блеском и без него, слизистых розовых крупных, с темно-красным центром, не обладающих оксидазоной активностью - дают положительный ответ.
Если все колонии на секторе под воздействием реактива окрасились в сине-фиолетовый цвет или остались без изменения (только розовые плоские лактозоотрицательные колонии), дают отрицательный ответ.
Постановка оксидазного теста может производиться с помощью СИБ оксидазы. По 2 - 3 изолированных колонии каждого типа, выросших на секторах чашки со средой Эндо, снимают частично петлей и наносят на полоску СИБ-оксидаэы (полоску помещают в чашку Петри). Оставшуюся часть колоний используют для изучения ферментации лактозы. При положительной реакции на месте нанесения культуры бумажка синеет в течение одной минуты. При отрицательной - цвет бумажной полоски не изменяется. В ряде случаев оксидазный тест со среды Эндо проявляется недостаточно четно, особенно при исследования колоний, окрашенных в темно-красный цвет. В таких случаях нужно пересеять колонии со среды Эндо на сектор чашки с питательным агаром или на скошенный питательный агар и после подращивания при температуре 37° +- 1,0°С в течение 3 - 5 часов пробу повторить.
После определения положительных и отрицательных результатов вычисляют число лактозоположительных кишечных палочек в 1 дм3 воды по таблице.
Таблица расчета бактерий в 1 дм3 при исследовании сточных вод
|
Объем исследуемой воды (см3) |
Число бактерий в 1 дм3 |
|||
|
1,0 см3 |
0,1 см3 |
0,01 см3 |
0,001 см3 |
|
|
- |
- |
- |
- |
менее 900 |
|
- |
- |
+ |
- |
900 |
|
- |
+ |
- |
- |
1000 |
|
+ |
- |
- |
- |
2300 |
|
+ |
- |
+ |
- |
9400 |
|
+ |
+ |
- |
- |
23000 |
|
+ |
+ |
- |
+ |
96000 |
|
+ |
+ |
+ |
- |
238000 |
|
+ |
+ |
+ |
+ |
более 238000 |
Примечание: при исследовании других объемов воды индекс соответственно уменьшают или увеличивают в десятикратном размере.
Приложение 1
Заключениео гигиенической эффективности работы установки по очистке и обеззараживанию судовых сточных вод по результатам стендовых испытаний
|
№ ____________ |
"__" _____________ 19____г. |
|
1. Тип установки ___________________________________________________________________________________________________________ |
|
|
2. Предприятие-изготовитель ________________________________________________________________________________________________ |
|
|
3. Пропускная способность __________________________________________________________________________________________________ |
|
|
4. Установка испытана на стенде предприятия _________________________________________________________________________________ |
|
|
5. Дата проведения испытаний _______________________________________________________________________________________________ |
|
|
6. Испытания проведены в полном соответствии с программой, согласованной с _____________________________________________________ (дата и номер согласования с органом здравоохранения) |
|
|
7. В результате испытаний установлено, что среднегеометрические величины показателей очистки судовых сточных вод после установки составляют: - взвешенные вещества __________________мг/л; |
|
|
- ВПК- 5 _______________________________мг/л; |
|
|
- коли-индекс __________________________ |
|
|
- остаточный хлор_______________________мг/л. |
|
|
8. На основании результатов испытаний удостоверяется, что установка обеспечивает на стенде очистку и обеззараживание сточных вод в соответствии о действующими нормами и может быть допущена к эксплуатационным испытаниям на борту судна.
Главный государственный санитарный врач _____________________________________________________________ |
|
|
МП |
Приложение 2
Заключениео гигиенической эффективности работы установки по очистке и обеззараживанию судовых сточных вод по результатам эксплуатационных испытаний
|
№ ____________ |
"__" _____________ 19____г. |
|
1. Тип установки ___________________________________________________________________________________________________________ |
|
|
2. Предприятие-изготовитель ________________________________________________________________________________________________ |
|
|
3. Пропускная способность __________________________________________________________________________________________________ |
|
|
4. Установка испытана на борту судна _________________________________________________________________________________________ |
|
|
5. Дата проведения испытаний _______________________________________________________________________________________________ |
|
|
6. Испытания проведены в полном соответствии с программой, согласованной с _____________________________________________________ (дата и номер согласования с органом здравоохранения) |
|
|
7. В результате испытаний установлено, что среднегеометрические величины показателей очистки судовых сточных вод после установки составляют: - взвешенные вещества __________________мг/л; |
|
|
- ВПК- 5 _______________________________мг/л; |
|
|
- коли-индекс __________________________ |
|
|
- остаточный хлор_______________________мг/л. |
|
|
8. На основании результатов испытаний удостоверяется, что установка обеспечивает очистку и обеззараживание сточных вод в соответствии с действующими нормами. Резолюции ИМО МЕРС 2(IV) и Санитарными правилами ________________________________________________________________________________________________________________________________________ (наименование, дата и номер, номер пункта правил) и может быть рекомендована к получению разрешения Минздрава СССР для применения на судах СССР.
Главный государственный санитарный врач _____________________________________________________________ |
|
|
МП |
Приложение № 3
Заключениео гигиенической эффективности работы установки по очистке и обеззараживанию судовых сточных вод серийного изготовления
|
№ ____________ |
"__" _____________ 19____г. |
|
1. Тип установки ___________________________________________________________________________________________________________ |
|
|
2. Предприятие-изготовитель ________________________________________________________________________________________________ |
|
|
3. Заводской номер _________________________________________________________________________________________________________ |
|
|
4. Установка испытана на борту судна _________________________________________________________________________________________ |
|
|
5. Дата проведения испытаний _______________________________________________________________________________________________ |
|
|
6. На основании результатов обследования удостоверяется, что установка обеспечивает/не обеспечивает* очистку и обеззараживание сточных вод в соответствии о нормами Резолюции ИМО МЕРС 2 (IV) и Санитарными правилами __________________________________________________________________________________________________________________________ (наименование, дата и номер п.п.) и допущена/не допущена* к эксплуатации на судне. |
|
|
7. Срок действия настоящего Заключения, устанавливается до __________________ |
|
|
Главный государственный санитарный врач _____________________________________________________________ |
|
|
МП |
______________________________
* - ненужное зачеркнуть
|
Заместитель Главного |
|
|
государственного санитарного |
|
|
врача СССР |
А.И. Заиченко |
