- Для країн, що знаходяться в фазі контролю (боротьби з кором), лабораторному підтвердженню підлягають тільки перші випадки під час спалаху. В цих умовах рекомендується використовувати клінічну класифікацію, тобто реєструвати випадки, які повністю відповідають стандартному визначенню
- На стадії попередження спалахів і елімінації інфекції необхідне лабораторне обстеження і підтвердження кожного окремого випадку. Це дозволить знизити кількість випадків з клінічним діагнозом кору.
-------------- ------------
|IgM антитіла| |Виключений|
------> |не виявлені |-----> |з аналізу |
----------- | -------------- ------------
|Адекватні|---
| проби |--- -------------- ---------------
----------- | |IgM антитіла| | Лабораторно |
------> | виявлені |-----> |підтверджений|
| -------------- ---------------
------------ -----------------
|Підозрілий| |Епідеміологічно| -----------------
| випадок | | пов'язаний | |Епідеміологічно|
------------ | з лабораторно |--> | підтверджений |
| | підтвердженим | -----------------
------> | випадком |
------------- | -----------------
|Неадекватні|---
| проби |--- ------------------- ---------------
------------- | | Немає | | Клінічно |
------> |епідеміологічного|--->|підтверджений|
| зв'язку | ---------------
| з лабораторно |
| підтвердженим |
| випадком |
-------------------
Мал. 1. Алгоритм оцінки випадків з підозрою на захворювання на кір.
5.4.2.1.5. Інтерпретація результатів лабораторного обстеження осіб, які щойно щеплені проти кору
Захворювання на кір і вакцинація проти кору стимулюють утворення в організмі специфічних антитіл класу JgM. Викликає певні труднощі оцінка результатів лабораторного обстеження хворого з підозрою на кір, який був щеплений проти кору в термін менший ніж 6 тижнів до появи висипу через те, що:
- Вакцинація проти кору може привести появи температурної реакції у 5% вакцинованих і появи висипу у 20% щеплених
- Після першого введення вакцини у щеплених, як правило, присутні вірусспецифічні протикорові антитіла класу IgM.
- У вакцинованого може з'явитися приблизно через тиждень після вакцинації корова висипка, яка зберігається протягом 1-3 діб
- За допомогою серологічних методів неможливо диференціювати імунну відповідь на класичне захворювання на кір або вакцинацію. Відрізнити інфекційний процес від вакцинального можливо лише за допомогою виділення та вивчення вірусу
- У осіб, що були щойно щеплені, температура і висипка можуть бути пов'язані з іншими інфекціями (наприклад, краснухою).
Враховуючи вищезазначене, слід хвороби підозрілі на кір у щойно щеплених, що мають специфічні антитіла класу IgM, класифікувати таким чином:
Класифікація випадків хвороби у щойно щеплених осіб при позитивному результаті дослідження на антитіла класу IgM
|
Термінвакцинації |
Епідемічна ситуація |
Заключнакласифікація |
|
Щепленийв термін меншийніж 6 тижнів допояви висипу |
На даній території не маєзареєстрованих випадків кору.Хворий не відвідував території,де циркулює вірус кору |
Діагноз кору непідтверджено |
|
Щепленийв термін меншийніж 6 тижнів допояви висипу |
При активному епідеміологічномурозслідуванні виявлені іншілабораторно підтверджені випадкикору |
Діагноз корупідтверджено |
5.4.3. Реакція нейтралізації бляшок використовується для контролю напруженості поствакцинального імунітету проти вірусу кору здебільш у централізованих вірусологічних лабораторіях.
Реакція нейтралізації бляшок в 3,5-4,5 разів чутливіша у порівнянні з методом визначення титрів антитіл з пригніченням цитопатичної дії вірусу. При постановці реакції нейтралізації змішують рівні об'єми двократно розведених сироваток і вірусного матеріалу, що містіть 100 БУО (бляшкоутворюючих одиниць) вірусу.
Методика постановки реакції нейтралізації бляшок досить складна, так як передбачає необхідність попереднього вирощування однодобових моношарових культур (Vero, Hela, MS та ін.). Витримування суміші сироваток і вірусного матеріалу протягом 1 години при температурі +22 град. С забезпечує специфічну взаємодію антигенів вірусу з антитілами вакцинованого. Після цього сумішшю інфікують моношари культури клітин, які попередньо відмивають розчином Хенкса, і витримують 45-60 хв. для забезпечення адсорбції вірусів, які не були нейтралізовані на поверхні клітин.
Для визначення інфекційної активності вірусу моношарову культуру клітин заливають поживним середовищем - покриттям, до складу якого входить агар або інші гелеутворюючи компоненти (бентоніт, агароза, метілцелюлоза та ін.). Це покриття забезпечує локальне розмноження вірусу в точці його адсорбції на моношарі клітин.
Після інкубування монокультури з суміші розведених сироваток і вірусного матеріалу, які покрити агаром, на поверхні агару з'являються бляшки (просвітлені дільниці) окресленої форми, які являють собою нейтралізовані сироваткою ділянки загиблих клітин серед суцільного моношару культури клітин.
Контролями в реакції нейтралізації бляшок (РНБ) як завжди є контроль клітин, сироваток і вірусу. Титр антитіл в РНБ обчислюється за показником нейтралізації кількості бляшок на 50% та більше порівняно з контролем інфекційної активності вірусу кору.
6. Висновки
Втілення в практику охорони здоров'я методичних вказівок, що пропонуються, дозволить оптимізувати роботу по здійсненню серологічного моніторингу за станом колективного та популяційного імунітету проти дифтерії, правця, кашлюку та кору. Уніфікація методик та аналізу результатів досліджень сприятиме більш об'єктивній оцінці епідемічної ситуації щодо інфекцій, які контролюються засобами імунопрофілактики, і дозволить зробити науково обґрунтований прогноз розвитку епідемічного процесу. Використання викладених рекомендацій дасть можливість визначити групи ризику за тією чи іншою інфекцією, своєчасно провести імунокорекцію та підвищити ефективність профілактичних та протиепідемічних заходів. В цілому втілення в практику охорони здоров'я запропонованих рекомендацій сприятиме зниженню захворюваності на контрольовані інфекції і скорішому досягненню завдань РПІ.
7. Вимоги безпеки
Серологічні дослідження з метою вивчення стану імунітету проти дифтерії, правця, кашлюку та кору проводять відповідно до ДСП 9.9.5.-080-2002 "Правила влаштування і безпеки роботи в лабораторіях (відділах, відділеннях мікробіологічного профілю)".
Заступник начальника Л.М.МухарськаДепартаменту державного санітарно-епідеміологічного нагляду
