5.41. Среда Смис-Лоренца


5 г глюкозы, 10 г пептона или триптона, или триптозы (Дифко), 20 г агара растворяют при подогревании в 950 см воды; отдельно 5 г растворимого крахмала растворяют в 50 см воды и раствор вносят в среду, устанавливают рН (7,1±0,1) и стерилизуют при температуре (117±1) °С в течение 20 мин.


Применяют для культивирования аэробных и факультативно-анаэробных кислотообразующих термофильных микроорганизмов.


5.42. Крахмало-пептонная среда, обогащенная триптофаном


10 г пептона растворяют в небольшом количестве воды, добавляют 5 г растворимого крахмала, предварительно растворенного в 50 см воды, доводят объем водой до 1 дм , устанавливают рН (6,2±0,1). Фильтруют через бумажный фильтр, добавляют 500 мкг триптофана, 5 г глюкозы, 20 г агара, нагревают до полного растворения агара и добавляют 10 см раствора бромкрезолпурпура концентрации 0,4 г/дм , разливают в стерильную посуду и стерилизуют при температуре (116±1) °С в течение 20 мин.


Применяют для культивирования кислотообразующих аэробных и факультативно-анаэробных термофильных микроорганизмов.


5.43. Сульфат-лактатная (плотная, вязкая) среда


5 г пептона растворяют в 1 дм воды, добавляют 4 г дрожжевого экстракта или 20 см раствора дрожжевого экстракта, 1,5 г сульфата натрия, 1,5 г сульфата магния, 3,5 г лактата натрия, устанавливают рН 7,2-7,4 и добавляют для приготовления плотной среды 20 г агара, вязкой - 1,5 г агара; подогревают до полного растворения, фасуют и стерилизуют при температуре (121±1) °С в течение 20 мин. Перед употреблением в расплавленную или регенерированную среду вносят раствор соли Мора (двойная сернокислая соль закиси железа и аммония) из расчета 4 мг/см . Для этого перед использованием раствор соли Мора концентрации 100 г/дм стерилизуют фильтрованием и вносят асептически в каждую пробирку по 4-5 капель. Лактат натрия может быть заменен молочной кислотой, нейтрализованной гидроокисью натрия.


Применяют для культивирования термофильного анаэроба D. nigrificans.


5.44. Солодовое сусло


Солодовое неохмеленное сусло готовят следующим образом.


К 1 дм водопроводной воды, подогретой до (50±1) °С, прибавляют 200 г молотого ячменного солода. Смесь тщательно перемешивают в течение 30 мин, подогревают на водяной бане со скоростью 1 °С в минуту до (55±1) °С, выдерживают паузу 15 мин, затем вновь с той же скоростью поднимают температуру до 63-65 °С и удерживают ее на этом уровне в течение 1 ч. Температуру поднимают со скоростью 1 °С в минуту до (72±1) °С и выдерживают сусло при этой температуре до полного осахаривания. Степень осахаривания сусла проверяют раствором Люголя. Для этого каплю сусла переносят в фарфоровую чашку и осторожно прибавляют к нему каплю раствора Люголя. Окончательно осахаренное сусло не должно менять окраску в присутствии индикатора. Полученное сусло фильтруют через полотно или фильтровальную бумагу, доливают до 1 дм и стерилизуют 30 мин в автоклаве при 107-110 °С. Затем сусло декантируют.


Прозрачное сусло разбавляют водой до массовой доли сухих веществ 7-8%, разливают в стерильную посуду, стерилизуют 20 мин при (116±1) °С. Солодовое сусло можно заменить виноградным суслом, доводя массовую долю сухих веществ этого раствора до 7-8%.


Применяют для культивирования дрожжей и плесневых грибов.


5.45. Солодовое агаризованное сусло


К 1 дм солодового неохмеленного сусла с массовой долей сухих веществ 7-8% прибавляют 20 агара. Среду расплавляют на водяной бане или текучим паром и фильтруют через гигроскопическую вату или фильтровальную бумагу. Фильтрат разливают по стерильным колбам или пробиркам и стерилизуют при температуре (116±1) °С в течение 15 мин или 3 сут по 30 мин текучим паром при температуре (100±1) °С. Для выявления дрожжей и плесневых грибов из продуктов, обильно обсемененных микроорганизмами, сусло перед использованием подкисляют 2-3 см стерильного раствора лимонной кислоты с массовой концентрацией 200 г/дм до рН 3,5.


Применяют для культивирования дрожжей и плесневых грибов.


5.46. Солодовое агаризованное сусло с углекислым кальцием


К 1 дм солодового неохмеленного сусла с массовой долей сухих веществ 7-8% добавляют 15-20 г агара (в зависимости от его желирующей способности), растворяют его на водяной бане при нагревании, и вносят 15-20 г стерильного углекислого кальция. Устанавливают рН среды 6,6-6,8. При постоянном помешивании разливают в стерильную посуду и стерилизуют при температуре (116±1) °С в течение 20 мин.


Применяют для культивирования дрожжей, плесеней и молочнокислых бактерий.


5.47. Улучшенная клостридиальная среда (R. С. М.)


В 1 дм дистиллированной воды помещают 3 г дрожжевого экстракта или 15 см раствора дрожжевого экстракта, 10 г мясного экстракта, 10 г пептона, 1 г растворимого крахмала, 5 г глюкозы, 0,5 г цистеина гидрохлорида, 5 г хлористого натрия, 3 г уксуснокислого натрия или 5 г водного уксуснокислого натрия (CH COONa·3Н О), 0,5 г агара для вязкой среды или 15 г агара для плотной среды, нагревают при непрерывном помешивании до кипения и кипятят до полного растворения всех компонентов; раствор охлаждают до температуры 50-60 °С, доводят его реакцию до рН (7,0±0,1). Стерилизуют при температуре (121±1) °С в течение 20 мин. Вязкую среду непосредственно перед использованием регенерируют, плотную - после розлива по чашкам Петри подсушивают. Допускается использовать 1 дм мясной воды вместо мясного экстракта и воды.


Применяют для культивирования мезофильных анаэробных микроорганизмов.


5.48. Среда питательная для контроля стерильности, сухая.


В 33,0 г сухого порошка среды входят:


ферментативный гидролизат казеина неглубокой степени расщепления 15,0 г;


витаминный препарат экстракта кормовых дрожжей - 5,0 г;


натрий хлористый - 6,4 г;


глюкоза - 5,0 г;


тиогликолят натрия - 0,3 г;


цистеина гидрохлорид - 0,75 г;


агар - 0,6 г;


натрий углекислый - 0,5-0,95 г.


Приготовление:


33,0 г сухого порошка растворяют в 1000 см воды, тщательно перемешивают, доводят до кипения, кипятят 2-3 мин при помешивании, фильтруют, разливают в пробирки по п.5.34. Стерилизуют при температуре (121±1) °С в течение 20 мин. Готовая среда должна иметь рН 7,0±0,2 и храниться при комнатной температуре не более 7 сут.


Среду применяют для культивирования мезофильных и термофильных анаэробных микроорганизмов.


(Введен дополнительно, Изм. N 1).




Текст документа сверен по:

официальное издание

Консервы. Методы микробиологического анализа:

Сб. ГОСТов. - М.: ИПК Издательство стандартов, 2002