ГОСТ 16712—95
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
СРЕДСТВА ЗАЩИТНЫЕ
ДЛЯ ДРЕВЕСИНЫ
МЕТОД ИСПЫТАНИЯ токсичности
И
БЗ 9—94/396
здание официальноеМЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ
ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
Минск
Предисловие
РАЗРАБОТАН Техническим комитетом по стандартизации ТК 82 “Защита древесины и древесных материалов”
ВНЕСЕН Госстандартом России
ПРИНЯТ Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол № 7—95 от 26 апреля 1995 г.)
За принятие проголосовали:
|
Наименование государства |
Наименование национального органа стандартизации |
|
Республика Беларусь Республика Казахстан Республика Молдова Российская Федерация Туркменистан Украина |
Белстандарт Госстандарт Республики Казахстан Молдовастандарт Госстандарт .России Туркменглавгосинспекция Госстандарт Украины |
Постановлением Комитета Российской Федерации по стандартизации, метрологии и сертификации от 23.08.95 № 447 межгосударственный стандарт ГОСТ 16712—95 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 июля 1996 года
4 ВЗАМЕН ГОСТ 16712—71
© ИПК Издательство стандартов, 1995
Настоящий стандарт не может быть полностью или частично, воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разрешения Госстандарта России иСодержание
Область применения 1
Нормативные ссылки 1
Определения ; . 2
Сущность метода 2
Пробы и образцы 2
Культура гриба 3
Аппаратура, материалы, посуда 4
Подготовка к испытанию 5
Проведение испытаний 9
Обработка результатов 10МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
СРЕДСТВА ЗАЩИТНЫЕ ДЛЯ ДРЕВЕСИНЫ
Метод испытания токсичности
Wood-protecting preparations.
Test method for toxicity
Дата введения 1996—07—01
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Настоящий стандарт распространяется на защитные средства для древесины и устанавливает метод испытания токсичности защитных средств по отношению к стандартному штамму дереворазрушающего гриба Coniophora puteana.
НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 9.048—89 ЕСЗКС. Изделия технические. Методы лабораторных испытаний на стойкость к воздействию плесневых грибов
ГОСТ 892—89 Калька бумажная. Технические условия
ГОСТ 2140—81 Видимые пороки древесины. Классификация, термины и определения, способы измерения
ГОСТ 2874—82 Вода питьевая. Гигиенические требования и контроль за качеством
ГОСТ 5556—81 Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия
ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 9412—93 Марля медицинская. Технические условия
ГОСТ 9949—76 Ксилол каменноугольный. Технические условия
ГОСТ 10354—82 Пленка полиэтиленовая. Технические условия
ГОСТ 12026—76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
ГОСТ 17206—84 Агар микробиологический. Технические условия
ГОСТ 23932—90 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие технические условия
ГОСТ 24104—88 Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия
ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
Издание официальноеОПРЕДЕЛЕНИЯ
Критерием токсичности является пороговое поглощение защитного средства П95. Пороговым является поглощение защитного средства, снижающее потерю массы древесины от воздействия Coniophora puteana на 95 % (в 20 раз) по сравнению с потерей массы древесины, не содержащей защитное средство.
СУЩНОСТЬ МЕТОДА
Сущность метода испытания токсичности состоит в выдерживании в течение двух месяцев на чистых культурах дереворазрушающего гриба Coniophora puteana образцов древесины, содержащих заданные количества защитных средств, учете потери массы древесины и определении пороговых поглощений защитных средств.
ПРОБЫ И ОБРАЗЦЫ
Пробы защитных средств отбирают по технической документации, утвержденной в установленном порядке.
Защитные средства испытывают не менее чем при пяти различных поглощениях.
Ряд поглощений защитного средства подбирают так, чтобы наиболее высокое поглощение превышало ожидаемое пороговое. Предпочтительно строить ряд поглощений как геометрическую прогрессию со знаменателем 1,5 или 2,0.
Относительно изученные защитные средства допускается испытывать при ряде поглощений, построенном как арифметическая прогрессия.
Защитные средства, о токсичности которых нет данных, предварительно испытывают при ряде поглощений 0,001; 0,01; 0,1; 1,0; 10 %. Определив интервал активных поглощений, защитные средства испытывают а установленном порядке.
Испытание по каждому заданному поглощению проводят не менее чем в трех повторностях по три образца в каждой.
Контролем служит непропитанная древесина. В каждой серии опыта непропитанные образцы испытывают не менее чем в трех повторностях по три образца в каждой.
Образцы древесины изготовляют квадратного сечения 20 * х 20 мм и длиной вдоль волокон 5 мм. Отклонения размеров образцов не должны превышать ±1 мм.
Образцы изготовляют из прямослойной воздушно-сужой древесины заболони сосны обыкновенной (Pinus sylvestris L.) плотностью от 450 до 500 кг/м . На 1 см по радиусу должно быть 6—8 годичных слоев. Образцы древесины должны быть без видимых пороков по ГОСТ 2140.
2
Для одной серии испытаний образцы изготовляют из одной рейки. При проведении больших серий испытаний допускается изготовлять образцы из реек, выпиленных из одного бревна. Рейки выпиливают из средней зоны 22—25 мм заболони (рисунок 1). Затем рейки строгают до сечения 20 * 20 мм и разрезают на образцы длиной 5 мм. Годовые слои в образцах должны проходить параллельно тангентальним кромкам. Отклонение параллельности не должно превышать ±5°. Образцы хранят при комнатной температуре в закрытых сосудах.
КУЛЬТУРА ГРИБА
Испытания проводят на культуре гриба Coniophora puteana (штамм “Сенеж’).
Штамм поддерживают в активном состоянии.
Культуру гриба хранят в помещении при температуре (22±2) °С и относительной влажности воздуха 70—75 %. Каждые 2—3 месяца культуру гриба выращивают заново.
Пересев, выращивание и хранение культуры гриба аналогично пересеву, выращиванию и хранению культур плесневых грибов по ГОСТ 9.048.
Чистую культуру гриба, используемую для получения инокулятов, выращивают в бактериологических пробирках вместимостью 50 см3 на питательной сусло-агаровой среде, содержащей на 1000 см3 20—25 г агар-агара и 250 г солодового экстракта. Питательную среду наливают в бактериологические пробирки на '/з часть их объема, помещают в бюксы и стерилизуют в автоклаве при давлении (0,15±0,01) МПа в течение 25 мин; затем дают застыть с образованием скошенной поверхности и в стерильных условиях инфицируют чистой культурой гриба Coniophora puteana с помощью бактериологической иглы.
Для получения культуры гриба, по отношению к которой определяется токсичность защитных средств, за полтора-два месяца до начала испытаний готовят посевной материал — инокуляты.
Культивирование Coniophora puteana проводят в плоскодонных колбах вместимостью 500 см"5. На культуру гриба, выращенную на сусло-агаровой среде, помещают слой стерильной земли толщиной 1,5—2,0 см. Когда мицелий прорастет и покроет поверхность земли, в колбу, соблюдая правила стерильности, всыпают около 10 г мелконарезанной (5*5x5 мм) простерилизованной древесины, увлажненной перед стерилизацией до 45 —50 %.
Ивокулггами мюгут служить тс кусочки древесины, которые после Ж—43 дней воздействия граба полностью обросли мицелием,
3равномерно слегка размягчились, но еще не приобрели по всей поверхности бурую окраску.
АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ, ПОСУДА
Автоклав медицинский, обеспечивающий давление пара 0,15—0,20 МПа.
Термостат, обеспечивающий температуру не менее 100 °С.
Весы лабораторные по ГОСТ 24104 с погрешностью взвешивания не более 0,005 г, 0,02 г и 0,0002 г.
Бюксы металлические медицинские.
Лампа бактерицидная ртутно-кварцевая.
Сита почвенные, набор.
Игла платиновая или хромоникелевая длиной не менее 100 мм.
Спиртовки стеклянные лабораторные по ГОСТ 23932.
Колбы конические узкогорлые по ГОСТ 23932 вместимостью 250 и 500 см3.
Колбы конические широкогорлые по ГОСТ 23932 вместимостью 750 см3.
Стаканы стеклянные химические с носиком по ГОСТ 23932 вместимостью 250, 500 и 1000 см3.
Стаканчики для взвешивания (бюксы) 30*40 и 40*60 мм по ГОСТ 23932.
Пробирки бактериологические 20*200 мм по ГОСТ 23932.
Трубки стеклянные длиной не менее 60 мм с внутренним диаметром не менее 25 мм.
Банки стеклянные реактивные вместимостью 500 см3 с внутренним диаметром не менее 75 мм с завинчивающимися карболитовыми или металлическими крышками.
Установка для пропитки по способу вакуум-атмосферное давление.
Эксикаторы без крана типа ЭВ по ГОСТ 25336.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.
Марля медицинская по ГОСТ .9412.
Ткань белая хлопчатобумажная или льняная.
Сусло ячменное неохмеленное.
Агар микробиологический по ГОСТ 17206.
Спирт денатурат.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Вода питьевая по ГОСТ 2874.
Ксилол по ГОСТ 9949.
Калька по ГОСТ 892.
Тушь чертежная.
Стеклограф.
Пленка полиэтиленовая по ГОСТ 10354.Ведро эмалированное.
Ножницы.
Шило.
Земля лесная.
Древесина сосновая, заболонь.
ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
Культура гриба
Питательной средой служит земля-древесина. Землю берут из верхнего структурного слоя перегноя смешанного леса на суглинистой почве в горизонте 0—3 или 0—5 см в мае — августе. Свежесобранная земля должна иметь pH 4,5—6,0. Вторым компонентом питательной среды является заболонь сосны (фидер).
Землю просушивают на воздухе, просеивают (без перетирания) через почвенные сита, отбрасывают фракции, проходящие через сито № 1 и задерживаемые на сите № 3. Землю хранят в условиях, исключающих возможность увлажнения.
Перед использованием земли определяют ее влажность и рассчитывают массу воды, необходимую для получения 50—55 %’ влажности после стерилизации. До стерилизации обычно достаточно увлажнить землю питьевой водой до 60 %.
Массу воды GB, г, необходимую для увлажнения земли, вычисляют по формуле
Св ~ 100 • 100 (1)
где Gc — масса высушенных 100 г земли с исходной влажностью Жн, г;
G — масса земли, подлежащая увлажнению, г;
И'к — конечная влажность земли, % (обычно 60 %);
1Ун — исходная влажность земли до увлажнения, %.
Землю для опыта помещают в эмалированное ведро, добавляют расчетное количество питьевой воды, хорошо перемешивают в течение не менее 30 мин, затем ведро закрывают полиэтиленовой пленкой и выдерживают не менее 2 ч для выравнивания влажности.
Культуры гриба, по отношению к которым определяют токсичность защитных средств, готовят в банках для реактивов вместимостью 500 см3 с карболитовыми или металлическими завинчивающимися*. крышками.
Крышки, не бывшие в употреблении, должны быть предварительно прогреты в автоклаве на пару при 100 °С в течение 40 мин не менее четырех раз.
Подготовленную землю насыпают в банки и уплотняют 5(легким постукиванием дна банки о стол). Уплотненная земля должна занимать не менее 1 /з объема банки.
Поверхность земли выравнивают и накрывают ее двумя полуфи- дсрами.
Полуфидером (рисунок 2) служит полукруглая торцовая пластинка толщиной (2,1 ±0,2) мм из заболони сосны. Диаметр фидера должен быть на 2—3 мм меньше внутреннего диаметра банки.
Перед тем, как уложить в банки, полуфидеры увлажняют, выдерживая в питьевой воде в течение 30 мин, затем в середине по диаметру делают выемку в виде треугольника со стороной не менее 6 мм, накалывают в центре полуокружности шилом и вставляют шпильку.
Шпильки изготовляют из заболони сосны в виде тонких палочек (типа спичек), заостренных с одного конца, для соединения с полуфидером. Свободный конец шпильки, служащий для закрепления полуфидера на поверхности земли, должен быть длиной не менее 25 мм. Верхний конец шпильки должен быть установлен заподлицо с поверхностью полуфидера.
Банки с установленными в них фидерами закрывают крышками, имеющими прокладку из четырех слоев хлопчатобумажной или льняной ткани (прокладки можно использовать многократно) и стерилизуют 2 раза с интервалом не менее 36 ч и не более 72 ч при давлении (0,15±0,01) МПа.
Питательную среду заражают не позднее чем через 24 ч после стерилизации с помощью инокулята. Инокулят, подготовленный по 6,5, соблюдая правила стерильности, вносят в банку. Банку закрывают крышкой, освобожденной от прокладок, и легким встряхиванием помещают инокулят в отверстие между полуфидерами (в центре банки).
Банки с инокулятами выдерживают при температуре (23±2) °С и относительной влажности воздуха (73±2) %. Через трос суток инокулят должен равномерно покрыться воздушным мицелием. Банки, в которых мицелий развился слабо или совсем не развился, могут быть инфицированы вторично. Вторая инокуляция может быть проведена не позднее чем через 3 суток после первой.
