ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
СОЮЗА ССР

ЕДИНАЯ СИСТЕМА ЗАЩИТЫ ОТ КОРРОЗИИ И СТАРЕНИЯ

ФУНГИЦИДЫ

'f МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ

Q ГОСТ 9.803-88

у;

Издание официальное

БЗ 9-88/680


ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС


Москва


^-Не-еТАНДА РТАМ




УДК 632.952:620.197:006.354 Группа Т97

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

Е

ГОСТ
9.803-88

диная система защиты от коррозии и старения
ФУНГИЦИДЫ

Метод определения эффективности

Unified system of corrosion and ageing protection.
Fungicides. Efficiency determining method

ОКСТУ 0009

Дата введения 01.01.90

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

Настоящий стандарт распространяется нд вещества, обладающие фунги­цидной и (или) фунгистатической активностью (далее — фунгициды), пред­назначенные для защиты материалов и изделий от повреждения плесневыми грибами (далее — грибами) и устанавливает метод испытаний эффективнос­ти фунгицидов.

Стандарт не распространяется на газообразные фунгициды, а также во­донерастворимые фунгициды, разлагающиеся при температуре менее 90°С.

Сущность метода заключается в культивировании грибов на питатель­ной среде, содержащей фунгициды, и оценке их эффективности по кинети­ческим параметрам развития грибов.

  1. ОТБОР ОБРАЗЦОВ

    1. В качестве образцов для испытаний водорастворимых фунгицидов применяют их растворы в среде Чапека-Докса. Среду Чапека-Докса готовят по ГОСТ 9.048. Концентрации водорастворимых фунгицидов выбирают из ряда: 2Х10'7; 4Х10'7; 8Х 10~7-. 2Х10’6- 4Х10'6- 8Х10'6- 2Х10-5; 8Х ХЮ'5; 2Х10'4; 4Х10"4; 2Х10"3; 4Х10'3; 8Х10'3 моль/дм”

    2. В качестве образцов для испытаний водонерастворимых фунгици­дов применяют пленки этих веществ, осажденных на синтезированных гид­рогелевых подложках.

Концентрация водонерастворимых фунгицидов на поверхности подлож­ки должна составлять: 1Х10'7; 2Х10'7; 5Х10'7; 8Х10"7; 1Х1СГ6; 2Х10'6; 5Х10'6; 8Х10'6; IX10"5; 2Х10"5; 5Х10'5 моль/см2.

Концентрация водонерастворимых фунгицидов в растворе органичес­ких растворителей, применяемых для осаждения на поверхность подложки, соответственно выбирают из ряда: 1.57Х10'3; ЗД4Х10'3; 7,85Х10'3; 10,56Х10'3; 1.57Х10'2; 3,14Х10'2; 7,85Х10'2; 12,50Х10'2; 1,57X10'*; 3,14X10'*; 7,85X10'* моль/дм3.

Издание официальное Перепечатка воспрещена

* ©Издательство стандартов, 1989Метод изготовления гидрогелевой подложки с осажденной на ней плен­кой водонерастворимого фунгицида приведен в приложении 1.

    1. Количество исследуемых концентраций каждого фунгицида долж­но быть не менее 10.

    2. Контрольными образцами для водорастворимых фунгицидов явля­ется среда Чапека-Докса, не содержащая фунгицидов, а для водонераствори­мых — гидрогелевая подложка без пленки фунгицидов.

    3. Количество проб (А) для каждого из отборов каждой из концен­траций фунгицидов и для контрольных образцов рассчитывают по ГОСТ 9.707, приложение 3. Если относительная ошибка и вероятность попадания среднего арифметического значения в доверительный интервал не заданы, количество проб на один отбор должно быть не менее семи.

  1. ВИДЫ ГРИБОВ

    1. Виды грибов для испытаний фунгицидов, применяемых для за­щиты:

полимерных материалов — по ГОСТ 9.049;

лакокрасочных покрытий — по ГОСТ 9.050;

тканей - по ГОСТ 9.802;

других типов материалов и изделий — по ГОСТ 9,048.

  1. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

Аппаратура, материалы и реактивы по ГОСТ 9.048,

Подложки гидрогелевые (см. приложение 1).

Колба с тубусом исполнения 1 номинальной вместимостью 1000 см3 по ГОСТ 25336.

Фильтр обеззоленный — синяя лента диаметром 5,5 см.

Воронка Бюхнера № 1 по ГОСТ 9147.

Насос водоструйный по ГОСТ 25336,

Эксикатор исполнения 1 диаметром корпуса 250 мм по ГОСТ 25336.

Лупа четерехкратная по ГОСТ 25706.

Пипетка исполнения 2 1-го класса точности вместимостью 2 см3 по ГОСТ 20292.

Пипетка исполнения 7 1-го класса точности вместимостью 5 см3 по ГОСТ 20292.

Весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности с. наиболь­шим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.

Чашка исполнения 2 типа ЧБН по ГОСТ 25336..

Стаканчик типа СВ с взаимозаменяемым конусом 34/12 по ГОСТ 25336.

Силикагель технический прокаленный по ГОСТ 3956.

Колба коническая по ГОСТ 25336 вместимостью 100 см3 из стекла группы ТС.

  1. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЯМ

    1. Для проведения испытаний составляют программу, в которой ука­зывают:

объект испытаний (наименование, марка фунгицида и НТД), завод-из­готовитель;

растворимость в воде и других растворителях, режим испытаний;

перечень используемых при испытаниях НТД;

метрологическое обеспечение испытаний ;

обозначение настоящего стандарта.

    1. Посуду, применяемую при испытании, готовят по ГОСТ 9.048, при­ложение 1.

    2. Питательные среды для выращивания и хранения культур плесне­вых грибов готовят по ГОСТ 9.048, приложение 2.

    3. Пересев, выращивание, хранение культур плесневых грибов и оцен­ка их жизнеспособности - по ГОСТ 9.048, приложение 3.

    4. Суспензию спор каждого вида грибов в воде готовят по ГОСТ 9.048, приложение 4, при этом концентрация их должна быть 1,0—2,0 млн/см3.

    5. Готовят растворы водорастворимых фунгицидов в среде Чапека- Докса по п. 1.1.

    6. Готовят растворы водонерастворимых фунгицидов в соответствую­щих органических растворителях квалификации ч. и ч.д.а. по п. 1.2. Подго­товленные растворы разливают в чашки ЧБН по (5,ОО±О,О5) см3 и выпари­вают органический растворитель, помещая ЧБН в термостат, полки которо­го устанавливают горизонтально по уровню. Термостат устанавливают в вы­тяжном шкафу. Устанавливают температуру в термостате на (5 ±2) ° С ниже температуры кипения соответствующего растворителя и выпаривают до по­стоянной массы.

    7. В чашках ЧБН синтезируют гидрогелевые подложки (см. приложе­ние 1).

    8. Гидрогелевые подложки стерилизуют по ГОСТ 9.048 в чашках ЧБН, устанавливая их в боксы под ртутными или ртутно-кварцевыми лампами на расстоянии (50±10) см и выдерживают (240+6) мин.

    9. Для испытаний водонерастворимых фунгицидов подготавливают чашки ЧБН, дно которых полностью покрывают отрезками стеклянных трубок и стерилизуют по ГОСТ 9.048.

  1. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЙ

    1. П р о в е д е н и е испытаний водорастворимых фунгицидов

      1. В конические колбы вместимостью 100 см3 разливают по 40 см3 растворов, приготовленных по п. 4.6, и контрольную пробу (см. п. 1.4). Количество параллельных проб в соответствии си. 1.5.

      2. Из приготовленных суспензий спор грибов (п. 4.5) берут по 2 см3 каждого из видов и смешивают между собой.

      3. В конические колбы, подготовленные по п. 5.1.1, наливают по 1 см3 суспензии спор грибов, подготовленной по п. 5.1.2.

      4. Конические колбы, подготовленные по пп. 5.1.1—5.1.3, закрыва­ют ватными пробками в стерильных условиях и помещают в термостат при температуре (29 ±2) ° С.

      5. Промежутог времени, в течение которого не наблюдается разви­тие грибов (далее — лаг-фаза Ас,)> ПРИ всех концентрациях водорастворимого фунгицида и в контрольных пробах устанавливают по появлению хотя бы на одной пробе биомассы грибов, видимой невооруженным глазом. Перио­дичность осмотров для выявления лаг-фазы 24 ч.

Если разность минимального и максимального значений лаг-фазы в про­бах в любом из отборов превышает 75 % ее минимального значения, испы­тания повторяют на новой серии образцов.

    1. Для количественного определения биомассы при всех концентра­циях отборы проводят один раз в 3 сут, а для контрольных проб — один раз в сутки. Общее количество отборов должно быть не менее семи. Продолжи­тельность испытаний — не более 42 сут.

    2. Содержимое колбы сливают на предварительно высушенный до постоянной массы при температуре (105 ±2)°С и взвешенный обеззоленный фильтр, установленный в приспособлении для вакуумного фильтрования, состоящем из воронки Бюхнера, колбы с тубусом и водоструйного насоса. Биомассу отмывают дистиллированной водой в количестве 100 см3.

    3. После вакуумного фильтрования фильтр с биомассой помещают в предварительно, высушенный при температуре (105 ±2) ° С и взвешенный до постоянной массы стаканчик СВ и сушат в термостате с открытой крыш­кой при температуре (105±2)°С с периодичностью взвешивания 2 ч. Ста­канчик с фильтром после каждого из периодов сушки помещают в эксика­тор с силикагелем на 1 ч до полного остывания, а затем взвешивают. Сушку прекращают, когда масса стаканчика с фильтром при последующем взве­шивании отличается от его массы в предыдущем не более чем на ±0,4 мг.

    4. Если в контрольном опыте по истечении 5 сут не наблюдается раз­вития грибов, споры, использованные для заражения, считают нежизнеспо­собными.

    5. Вычисляют биомассу каждой пробы каждого отбора каждой из концентраций фунгицида.

    6. Определяют среднее арифметическое значение биомассы в каждом из отборов.

    7. Испытания при каждой из концентраций фунгицидов прекраща­ют, если количество биомассы в последующем отборе не увеличивается по сравнению с предыдущим.

    8. Данные испытаний заносят в протокол, форма которого приве­дена в приложении 2.

  1. Проведение испытаний водонерастворимых фунгицидов

    1. Испытания проводят на гидрогелевых подложках с осажденным на них водонерастворимым фунгицидом различных поверхностных концен­траций (пп. 4.7—4.9).

    2. В чашки ЧБН, подготовленное по п. 4.10, наливают питательную среду Чапека-Докса, в них укладывают гидрогелевые подложки (п. 5.2.1) так, чтобы поверхность подложки, свободная от фунгицида, контактирова­ла с питательной средой, а на поверхность, содержащую фунгицид, равно­мерно наносят 1 см3 суспензии спор грибов, полученной по п. 5.1.2.

    3. Чашки ЧБН накрывают крышками, помещают в камеру или эк­сикатор, на дно которого налита вода. Эксикатор закрывают крышкой. Ис­пытания проводят при температуре (29 ±2) ° С и относительной влажности более 90 %. В камере (эксикаторе) не допускают конденсации влаги, при­нудительной вентиляции и воздействия прямого естественного или искусст­венного освещения.

Не реже одного раза в 7 сут эксикаторы или камеры открывают для притока воздуха.

    1. Лаг-фазу при всех концентрациях водонерастворимого фунгици­да и в контрольных пробах определяют по времени, в течение которого хо­тя бы на одной из проб появляется биомасса грибов, видимая при четырех­кратном увеличении. Периодичность осмотров — 24 ч.

    2. Для количественного определения биомассы периодичность отбо­ров и их количество - по п. 5.1.6. При каждом отборе подложку вынимают из чашки ЧБН, биомассу полностью снимают с поверхности подложки шпа­телем или лопаткой на предварительно высушенный до постоянной массы при температуре (105±2)°С беззольный фильтр с синей полосой, установ­ленный в приспособлении для вакуумного фильтрования. Проводят ваку­умное фильтрование. Биомассу отмывают дистиллированной водой в коли­честве 100 см3.

    3. В дальнейшем испытания проводят в соответствии с пп. 5.1.8— 5.1.13.

  1. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ

    1. Эффективность фунгицидов определяют по зависимости кинетичес­ких параметров уравнения, описывающего рост биомассы, от концентрации этих веществ.

    2. Кинетические параметры (коэффициенты а,- и й,) уравнения, связы­вающего текущее среднее арифметическое значение удельной биомассы (й^) и среднее максимальное (wCimax) значение удельной биомассы при различных концентрациях фунгицида вычисляют по формуле

— _ „ wC,-max . .

тСт 1 + а,- ехр [-і,- (т,„ - LCj) ]



ІДО тс,тах - средняя максимальная удельная биомасса, достигнутая при развитии грибов в присутствии фунгицида каждой из концен­траций и в контрольной пробе, мг/см2 илимг/дм3;

Lc. — минимальная, экспериментально полученная лаг-фаза для дан­ной концентрации фунгицида и в контрольной пробе, ч;

Tjn — продолжительность выдержки, после которой произведен от­бор, ч;

д,- — коэффициент, характеризующий способность споры образовы­вать биомассу при данной концентрации фунгицида и в конт­рольной пробе;

bi — коэффициент, характеризующий удельную скорость развития микроорганизмов на данной питательной среде (при Ай кон­центрации фунгицида), ч"1.

Преобразуют уравнение (1)

/ "’С.тах - mCin

1

(2)

П ( / = 1Па'' -Ьі ~ Lci>

и методом наименьших квадратов вычисляют коэффициенты д(- и Ь( по фор­мулам:

Чі

Чіїїт - Ьс.)п In п=1 ‘

Ьі =


тС{тах ~ mCin


mCin£


Чі

- LCi) S ln' « n= 1


mС/tn ах mCjn


mcin


Шс- / 1

Чі S (т-Лс)’ - [ Ї (r-Lc)n]2п=1 п=1