---

ГОСТ 28504-90

Группа М29

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

ШКУРКИ МЕХОВЫЕ И ОВЧИНА ШУБНАЯ НЕВЫДЕЛАННЫЕ

Методы определения структурной поврежденности

и бактериальной зараженности кожевой ткани

Undressed fur skins and woolskins.

Methods for determination of structure damage and bacterial infection of flesh side

ОКСТУ 9800

Срок действия с 01.01.92

до 01.01.97*

________________________________

* Ограничение срока действия снято

по протоколу N 7-95 Межгосударственного Совета

по стандартизации, метрологии и сертификации

(ИУС N 11, 1995 год).

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Государственным комитетом легкой промышленности при Госплане СССР

РАЗРАБОТЧИКИ

А.Н.Беседин, д-р техн. наук; М.А.Васильева, канд. техн. наук; Л.П.Плюснина, канд. техн. наук; И.Н.Коробейникова, канд. техн. наук; Э.И.Степанова; Т.В.Казакевич; Л.А.Рычкова

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продукции и стандартам от 30.03.90 N 731

3. Срок первой проверки - 1994 г. Периодичность проверки - 5 лет

4. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

5. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

Настоящий стандарт распространяется на невыделанные меховые шкурки и шубную овчину и устанавливает методы определения структурной поврежденности и бактериальной зараженности кожевой ткани меховых шкурок и шубной овчины всех способов консервирования с помощью исследований под микроскопом окрашенных гистологических срезов кожевой ткани и качественных реакций на водной вытяжке кожевой ткани.

Применение методов предусматривается на стадии научно-исследовательских и предварительных испытаний. Применение метода качественных реакций на водной вытяжке из кожевой ткани применяется при разногласиях в оценке качества сырья, поступившего на предприятия меховой промышленности.

1. МЕТОД ОТБОРА ОБРАЗЦОВ

1.1. Для определения структурной поврежденности и бактериальной зараженности кожевой ткани от производственной партии отбирают не менее 10 шкурок методом систематического отбора: первую шкурку отбирают произвольно, а последующие - через одинаковое число шкурок, равное частному от деления объема партии на объем выборки.

1.2. Из каждой отобранной шкурки в огузочной части или у основания задней лапки вырезают образцы размером 20х10 мм.

Для приготовления водной вытяжки кожевой ткани допускается отбор образцов в виде полосок, вырезанных по периметру шкурки.

1.3. При наличии на поверхности отобранных шкурок признаков поражения ее микроорганизмами образцы для анализов отбирают с пораженного и непораженного участков.

2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

Для проведения анализов должны применяться:

микротом замораживающий МЗ-2 по ТУ 64-1-2950;

микроскоп световой биологический Биолам Р по ТУ 3-3.154;

электрошкаф сушильный лабораторный по ТУ 16-681.032;

весы лабораторные по ГОСТ 24104;

термометр лабораторный;

стекла предметные для микропрепаратов по ГОСТ 9284;

стекла покровные для микропрепаратов по ГОСТ 6672;

бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026;

колбы вместимостью 100 см по ГОСТ 25336;

шпатель по ГОСТ 10778;

игла гистологическая препаровальная прямая;

пробки резиновые по ГОСТ 7852;

вата по ГОСТ 5556;

воронки стеклянные по ГОСТ 25336;

пробирки стеклянные по ГОСТ 25336;

пипетка вместимостью 2 см по ГОСТ 20292;

ступка и пестик фарфоровые по ГОСТ 9147;

мензурка вместимостью 500 см по ГОСТ 1770;

формалин технический по ГОСТ 1625, раствор с массовой долей 4%;

соль поваренная пищевая по ГОСТ 13830;

эозин по ТУ 6-09-4185, водный раствор с массовой долей 0,1%

спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300, раствор с объемной долей 96% и 70%;

метиленовый голубой по ТУ 6-14-937, водный и спиртовой раствор с массовой долей 1%;

бура по ГОСТ 8429;

кислота уксусная по ГОСТ 61;

ацетон по ГОСТ 2603;

ксилол по ГОСТ 9949;

толуол по ГОСТ 5789;

вода дистиллированная по ГОСТ 6709;

бальзам кедровый сибирский по ТУ 81-05-80;

крахмал растворимый по ГОСТ 10163, раствор с массовой долей 0,5%;

калий йодистый по ГОСТ 4232;

йод по ГОСТ 4159.

3. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

3.1. С образцов, отобранных по п.1.2, состригают волосяной покров.

3.2. Подготовка к проведению микроскопического анализа

3.2.1. Раствор формалина с массовой долей 4% готовят следующим образом: 4 г формалина с массовой долей 40% растворяют в 100 см водопроводной воды с добавлением 5 г поваренной соли на 100 см раствора формалина.

3.2.2. Раствор этилового спирта с объемной долей 70% готовят следующим образом: к 70 см этилового спирта с объемной долей 96% добавляют 26 см дистиллированной воды.

3.2.3. Водный раствор эозина с массовой долей 0,1% готовят следующим образом: 0,1 г эозина растворяют в 100 см дистиллированной воды при температуре (20±2) °С.

3.2.4. Спиртовой раствор метиленового голубого с массовой долей 1% (раствор N 1) готовят следующим образом: 1 г метиленового голубого растворяют в 100 см этилового спирта с объемной долей 70% при температуре (20±2) °С.

3.2.5. Раствор метиленового голубого с бурой с массовой долей метиленового голубого 1% (раствор N 2) готовят следующим образом: 2 г буры растворяют в 100 см дистиллированной воды, подогретой до (80±2) °С, после чего добавляют 1 г метиленового голубого. Раствор выдерживают в помещении не менее месяца после приготовления при температуре не ниже (20±2) °С.

3.2.6. Смесь красителей для окрашивания срезов готовят следующим образом: к 10 см раствора N 1 (п.3.2.4) добавляют 2-3 капли раствора N 2 (п.3.2.5) и 10 см дистиллированной воды.

3.2.7. Обезвоживающие срезы растворы, состоящие из ацетона, ксилола или толуола, готовят в следующих соотношениях:

раствор N 3 - к 95 частям ацетона добавляют 5 частей ксилола или толуола;

раствор N 4 - к 70 частям ацетона добавляют 30 частей ксилола или толуола;

раствор N 5 - к 30 частям ацетона добавляют 70 частей ксилола или толуола.

3.2.8. Раствор кедрового сибирского бальзама готовят следующим образом: для получения густого раствора консистенции сиропа куски сухой смолы заливают растворителем (ксилолом или толуолом) с таким расчетом, чтобы он покрывал смолу. После растворения смолы выбирают раствор желательной консистенции или дают немного испариться растворителю, или добавляют еще сухой смолы. Растворение ускоряется при проведении процесса в сушильном электрошкафу при температуре 50-60 ° C.

3.2.9. Обводнение кожевой ткани образцов, отобранных от консервированных шкурок, проводится в водопроводной воде с добавлением 3-5 г поваренной соли на 100 см воды при температуре воды (30±2) °С в течение 2 ч или при температуре воды (20±2) °С в течение 5-6 ч при периодическом перемешивании. Объем воды должен быть не менее 400 см на 10 образцов.

3.2.10. Фиксация кожевой ткани образцов проводится в растворе формалина с массовой долей 4%. Продолжительность фиксации не менее 2 ч при температуре раствора формалина (30±2) °С или 12-24 ч при температуре раствора (20±2) °С. Объем фиксирующего раствора должен быть не менее 150 см на 5 образцов.

3.2.11. После фиксации образцы кожевой ткани промывают в проточной воде не менее 1 ч.

3.2.12. Приготовление срезов с плоскостью сечения по ходу корней волос проводят на замораживающем микротоме. Толщина среза должна быть не более 40-60 мк. Срезы помещают в чашечки с дистиллированной водой.

3.2.13. Полученные срезы окрашивают в смеси красителей, приготовленной по п.3.2.6, при температуре (20±2) °С в течение 5-10 мин.

После окраски срезы промывают в течение 1-2 мин дистиллированной водой, дифференцируют быстрым погружением в подкисленной воде (2-4 капли уксусной кислоты на 20 см дистиллированной воды) и дважды промывают в дистиллированной воде в течение 1-2 мин.

3.2.14. Окрашивание срезов в водном растворе эозина с массовой долей 0,1% проводят в течение 2-3 мин с последующим промыванием в дистиллированной воде в течение 1-2 мин.

3.2.15. Обезвоживание срезов проводят в растворах, приготовленных по п.3.2.7, последовательно перенося срезы через растворы N 3, 4 и 5.

Перенос срезов в указанные растворы и в последующий раствор чистого ксилола или толуола проводят на шпателе так, чтобы срез был полностью расправлен.

Перед погружением в раствор N 3 со среза осторожно удаляют излишек воды фильтровальной бумагой. После погружения срез сразу же вынимают и переносят в раствор N 4, где его оставляют на 5-6 мин, затем срез переносят в раствор N 5 на 10-15 мин. При загрязнении растворы заменяют новыми.

3.2.16. Просветление срезов проводят в чистом ксилоле или толуоле в течение 8-10 мин.

3.2.17. Окрашенные и обезвоженные срезы осторожно переносят с помощью шпателя и препаровальной иглы на предметное стекло, на поверхность среза наносят каплю кедрового бальзама и помещают под покровное стекло.

3.3. Подготовка к проведению анализа с помощью качественных реакций на водной вытяжке кожевой ткани.

3.3.1. От каждого образца, отобранного по п.1.2, берут навеску массой 1 г, взвешенную с погрешностью не более 0,1 г.

3.3.2. Водную вытяжку кожевой ткани с массовой долей 10% готовят следующим образом: навеску кожевой ткани из образцов, приготовленных по п.3.3.1, массой 10 г взвешивают с погрешностью не более 0,1 г, ополаскивают дистиллированной водой для снятия загрязнений с поверхности, измельчают и помещают в колбу вместимостью 100 см .

В колбу пипеткой вливают 100 см кипяченой дистиллированной воды, охлажденной до температуры (20±2) °С, закрывают пробкой, хорошо взбалтывают и оставляют в покое на 1 ч. Затем содержимое колбы взбалтывают и фильтруют через вату в сухую колбу.

3.3.3. Водный раствор метиленового голубого с массовой долей 1% готовят следующим образом: 1 г метиленового голубого растворяют в 100 см дистиллированной воды при температуре (20±2) °С.

3.3.4. Раствор крахмала с массовой долей 0,5% готовят следующим образом: 0,5 г крахмала размешивают в 20 см дистиллированной воды при температуре (20±2) °С, затем при постоянном перемешивании добавляют полученный раствор к 80 см кипящей воды. Раствор кипятят 2-3 мин.

3.3.5. Раствор Люголя готовят следующим образом: в ступку вместимостью 50 см помещают 1 г кристаллического йода и 2 г йодистого калия, смесь растирают пестиком в небольшом количестве воды, переносят в мензурку вместимостью 500 см и доводят общий объем водой до 300 см .

4. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

4.1. Проведение микроскопического анализа.

4.1.1. Приготовленные по п.3.2.17 препараты помещают на предметный столик микроскопа.

Изучение препаратов проводят сначала при малом увеличении (объектив 10 , окуляр 7 ; 10 ), позволяющем получить представление об общем характере структуры, затем при большом увеличении микроскопа (объективы 20 ; 40 ; 90 ; окуляр 7 ; 10 ; 15 ).

4.1.2. За критерий оценки структурной поврежденности и бактериальной зараженности кожевой ткани меховых шкурок и шубной овчины приняты показатели: сохранность структурных компонентов кожевой ткани; способность к избирательному окрашиванию отдельных структур с выявлением клеточного строения; отсутствие или наличие бактерий в толще кожевой ткани.

Нарушение сохранности структурных компонентов кожевой ткани меховых шкурок и шубной овчины может быть вызвано воздействием на нее автолиза, бактерий, высоких температур, химических веществ, а в шкурках с интенсивно развитыми жировыми включениями - продуктов окисления жировых и тучных клеток, вызывающих образование жировой гари, а также пустот и щелей.