6.3.1 Предварительную проверку измерительных ампул на отсутствие в них паразитных сигналов выполняют на ЭПР-спектрометре при максимальном усилении спектрометра с выбранными оптимальными режимами измерений при изменении g-фактора от 1,9970 до 2,0055.
6.3.2 Отобранные ампулы промывают в дистиллированной воде, ополаскивают спиртом и высушивают при комнатной температуре в эксикаторе с влагопоглотителем, где хранят до использования их в работе.
6.3.3 Ампулы нумеруют и закрепляют за каждой пробой ЗЭ на весь цикл измерений.
7.1 Измерение спектров ЭПР проб ЗЭ
7.1.1 Ампулу с подготовленной пробой ЗЭ помещают в резонатор спектрометра ЭПР, выдерживая постоянную глубину погружений.
7.1.2 Спектр ЭПР исследуемой пробы ЗЭ измеряют в соответствии с нормативной документацией по эксплуатации спектрометра ЭПР.
7.1.3 Спектр ЭПР записывают таким образом, чтобы ширина низко- и высокопольных участков спектра, удаленных от суперпозиции спектра органики и РПЦ, в 3 - 4 раза превышала ширину спектра эмали.
7.1.4 Измерение спектра пробы ЗЭ осуществляют в режиме накопления данных в памяти ЭВМ в результате многократных измерений.
7.1.5 Спектр ЭПР пробы ЗЭ с соответствующими техническими данными (номером пробы, массы образца, даты измерения и т.д.) записывают в память ЭВМ или другого регистрационного устройства.
7.2 В процессе длительных измерений контроль за стабильностью работы спектрометра периодически осуществляют в соответствии с нормативной документацией по его эксплуатации.
8.1 Математическую обработку спектров ЭПР осуществляют с помощью пакета обрабатывающих программ, входящих в основную программу управления спектрометром и состоящих из следующих основных операций:
8.1.1 Коррекцию базовой линии проводят путем вычитания из измеренного спектра полинома, подогнанного методом наименьших квадратов под базовую линию.
8.1.2 В суперпозиции сигналов ЭПР находят вклад сигнала РПЦ, вычитая из откорректированного спектра фоновый сигнал, обусловленный нативным сигналом (рисунок 1), в соответствии с приложением Г.
1 - исходный спектр, 2 - спектр нативного сигнала, 3 - спектр сигнала РПЦ, полученный в результате вычитания нативного сигнала из исходного спектра
Рисунок 1 - Спектр ЭПР образца ЗЭ, облученного дозой 2 Гр от источника гамма-излучения 60Со
8.1.3 При определении интенсивности чистого радиационного сигнала, пропорциональной концентрации РПЦ в пробе ЗЭ, в обрабатывающих программах используют один из двух подходов:
- измеряют амплитуды радиационного сигнала в нормальной и параллельной составляющей анизотропного пика поглощения и затем их суммируют;
- вычисляют второй интеграл от кривой радиационного сигнала 3, полученного в результате вычитания нативного сигнала 2 из исходного спектра 1 (рисунок 1).
8.2 Для спектрометров с выводом спектров ЭПР на графопостроитель или самописец обработку спектрограмм осуществляют вручную, измеряя амплитуду нормальной составляющей радиационного сигнала в соответствии с приложением Д.
9.1 Определение поглощенной дозы методом дооблучения для учета индивидуальной радиационной чувствительности пробы ЗЭ
9.1.1 Пробу ЗЭ после измерения спектра ЭПР извлекают из ампулы и помещают в кассету со стенками из тканеэквивалентного покрытия толщиной 1 г/см2, обеспечивающей условия электронного равновесия в процессе дооблучения пробы на установке облучательной с аттестованным источником гамма-излучения радионуклидов 137Cs или 60Со.
9.1.2 Необходимую дозу облучения обеспечивают соответствующим подбором времени облучения и расстояния от кассеты с пробой до источника гамма-излучения. В каждом сеансе осуществляют дополнительный контроль дозы облучения по индивидуальным термолюминесцентным дозиметрам, помещаемыми в кассету вместе с исследуемыми пробами, или с помощью аттестованного дозиметра.
9.1.3 Шаг дооблучения определяют, исходя либо из значения дозы D, оцениваемого по результатам измерений по п. 8.1 или 8.2, либо из значения D, предварительно найденного в результате экспресс-анализа в соответствии с п. 9.2. Шаг выбирают в пределах 1 - 3 D.
9.1.4 Пробу ЗЭ после каждого облучения выдерживают в эксикаторе в течение суток, после чего измеряют ее спектр ЭПР в соответствии с п. 7.1.
9.1.5 Число точек дооблучения должно быть не менее 4. Число измерений спектров ЭПР в каждой точке на кривой дооблучения должно быть не менее 2 (рисунок 2). Общее число сопряженных ЭПР-измерений каждой пробы с учетом измерений пробы перед дооблучением должно быть не менее 10.
9.1.6 Интенсивность радиационного сигнала Ij в исследуемой пробе ЗЭ определяют после каждого сеанса дооблучения j по методике обработки измеренных спектров ЭПР в соответствии с п. 8.1.3 или 8.2.
9.1.7 По результатам измерений Ij для каждой пробы устанавливают соответствие этих значений значениям Dj, равным суммарной дозе дооблучения на каждом сеансе, при этом значениям интенсивностей, получаемых без дооблучения, соответствуют значения D, равные нулю.
Рисунок 2 - Восстановление первоначальной поглощенной дозы D0 в ЗЭ методом последовательного дооблучения исследуемого образца заданными дозами Dj (Ij - интенсивность сигнала РПЦ в условных единицах)
9.1.8 Для полученного набора пар (Ij, Dj) составляют уравнение линейной регрессии
I = I0+ fD, (1)
параметры которого (I0, f) вычисляют по формулам E.1 и Е.2 приложения Е.
9.1.9 Искомую начальную дозу D0, мГр, накопленную в исследуемой пробе ЗЭ, рассчитывают по формуле
D0 = I0 / f. (2)
9.1.10 Результаты измерений доз облучения оформляют в лабораторном журнале (или в виде протокола) в соответствии с приложением Ж.
9.2 Ускоренный способ определения поглощенной дозы с использованием РЭ ПДОЗЭ с усредненным значением радиационной чувствительности
Накопленную в ЗЭ поглощенную дозу D, мГр, вычисляют по интенсивности радиационного сигнала Ipr, нормированной на массу пробы Рpr и на интенсивность сигнала РЭ ПДОЗЭ Ist, по формуле
D = k1× k2× Pst× Ipr / Рpr × Ist, (3)
где Ipr и Ist определяют в соответствии с п. 8.1.3 или 8.2 в условных единицах;
k1 - калибровочный коэффициент пересчета дозы по отношению к РЭ ПДОЗЭ для установленных параметров режима работы спектрометра ЭПР;
k2 - зависящий от массы образца поправочный коэффициент, определяемый геометрическими размерами образца и изменением добротности резонатора. Для рабочего диапазона масс исследуемых проб ЗЭ 50 - 150 мг k2 практически не отличается от единицы.
9.3 Анализ результатов определения в ЗЭ поглощенных доз облучения
9.3.1 Переход от поглощенной в ЗЭ дозы (п. 9.1, 9.2) к обобщенным дозиметрическим характеристикам воздействия излучения на человека осуществляют в соответствии с нормативными документами по радиационной безопасности [2] и санитарным правилам [3] с учетом как радиационной предыстории, отраженной в сопроводительной анкете донора (приложение Б), так и реального изотопно-спектрального состава загрязнения окружающей среды.
9.3.2 При определении поглощенных доз от внешнего гамма-излучения для энергий менее 0,2 Мэв с использованием методики дооблучения согласно 9.1 учитывают энергетическую зависимость чувствительности ЗЭ к гамма-излучению in situ, представленную в приложении И.
10.1 Суммарная погрешность определения поглощенных в ЗЭ доз при доверительной вероятности 0,95 в соответствии с нормативными требованиями к индивидуальному дозиметрическому контролю внешнего облучения [4] должна быть, %, не более:
100 - для диапазона доз 0,05 - 0,1 Гр;
50 « « « 0,1 - 0,2 Гр;
40 « « « 0,2 - 0,5 Гр;
30 « « « свыше 0,5 Гр.
Примечание - При оценке доз острого облучения в сроки, не превышающие 2 мес., погрешность не должна превышать 20 %
10.2 При определении поглощенной дозы методом дооблучения в соответствии с п. 9.1 (по ГОСТ 8.010 - реализация индивидуальной методики выполнения измерений) способ оценки суммарной погрешности измерения начальной дозы облучения приведен в приложении К.
10.3 При определении поглощенной дозы ускоренным способом в соответствии с п. 9.2 (по ГОСТ 8.010 - реализация типовой методики выполнения измерений) суммарная погрешность в основном складывается из погрешности определения интенсивности сигнала РПЦ и погрешности, обусловленной неопределенностью индивидуальной чувствительности ЗЭ при использовании в анализе РЭ ПД ОЗЭ с усредненным значением f (приложение К) Последняя погрешность, полученная на основе анализа результатов измерения радиационной чувствительности для статистически значимого массива образцов ЗЭ, не превышает 0,25.
11.1 При работе на спектрометре ЭПР обслуживание электроустановок с высоким напряжением - в соответствии с ГОСТ 12.1.019.
11.2 Работа с СВЧ генератором и СВЧ трактом спектрометра ЭПР в соответствии с ГОСТ 12.1.006.
11.3 Работа с ацетоном - в соответствии с ГОСТ 2603.
11.4 Работа со спиртом этиловым - в соответствии с ГОСТ 18300.
11.5 Работа с лабораторной посудой в соответствии с ГОСТ 9147 и ГОСТ 19908.
11.6 Работа с зубоврачебным бором в процессе распилки зубов и выделения эмали - в соответствии с ГОСТ 22090.1, ГОСТ 22090.2.
11.7 При облучении проб эмали зубов на лабораторных источниках гамма-излучения следует соблюдать правила техники безопасности при работе с источниками ионизирующего излучения, предусмотренные действующими Основными санитарными правилами1).
1) После процесса дооблучения пробы ЗЭ радиационной опасности не представляют.
А.1 Удаленный у пациента по медицинским показаниям зуб кладут на 2 - 3 ч в 4 % -ный раствор формалина. Обеззараженный удаленный зуб помещают в отдельную стеклянную или полиэтиленовую тару (флаконы вместимостью 25 - 100 см3).
А.2 Подготовленный образец сопровождают анкетным листом, заполненным врачом-стоматологом в соответствии с приложением Б.
А.3 При отборе зубов исключают образцы зубов с сильно стершейся или поврежденной эмалью, а также с установленными на них металлическими коронками. В случае удаления у пациента нескольких зубов их упаковывают вместе в одном флаконе.
А.4 Для анализа преимущественно используют зубы, расположенные в задней части челюсти (моляры и премоляры), не подвергающиеся воздействию прямого солнечного света.
А.5 При транспортировании очередных партий зубов с места отбора до лаборатории радиационного контроля исключают какую-либо вероятность их рентгеновского просвечивания в процедуре багажного досмотра в аэропорту.
А.6 Зубы, поступающие в лабораторию радиационного контроля, во избежание их высыхания хранят в холодильнике в тарных флаконах, заполняемых дистиллированной водой.
А.7 Отобранные образцы зубов сохраняют в условиях, исключающих воздействие прямого солнечного освещения и искусственных источников света, содержащих ультрафиолетовый компонент в спектре излучения.
1 Фамилия, имя, отчество
2 Год рождения
3 Место жительства
4 Место жительства в период воздействия излучения
5 Характер работы (профессия) в период воздействия излучения
6 Имеющиеся сведения о профессиональном облучении по месту работы
7 Сведения о локальных облучениях зубов и головы (делались ли и сколько раз рентгеновские снимки) при медицинских обследованиях (по истории болезни и/или со слов пациента)
8 На схеме расположения зубов кружком указать зуб(ы), направляемые для измерений. Указать крестом соседние отсутствующие зубы, звездочкой - зубы с коронкой (протез)
9 Номер регистрационной карты, истории болезни
10 Номер, серия, дата выдачи (кем выдан) паспорта или удостоверения личности
11 Название (номер) поликлиники или больницы
12 Фамилия, имя, отчество врача-стоматолога
« » 199 г. подпись врача
м. п.
Отделение эмали от дентина осуществляют несколькими способами.
B.1 Механический способ. С помощью бормашины со сменными алмазными головками различной формы под струей воды или в ванне под водой проводят полное удаление дентина.
Степень очистки эмали от дентина контролируют визуально по их заметно контрастирующему цвету на срезе зуба: в отличие от белой эмали с голубоватым или сероватым оттенком для дентина характерны матовость и цвет, напоминающий цвет шероховатого белого мрамора.
В.2 Химический способ. Части распиленного зуба, покрытые эмалью, погружают в 30 %-ный раствор NaOH и подвергают в нем обработке ультразвуком в течение 2 - 3 ч. После этой обработки размягченный дентин удаляют алмазным бором из всех складок ЗЭ.
Выделенную эмаль вторично обрабатывают ультразвуком в 30 %-ном растворе NaOH в течение 10 - 12 ч после измельчения пробы ЗЭ в агатовой или фарфоровой ступке до размеров зерна приблизительно 0,5 мм. Полученный порошок 8 - 10 раз в течение 5 мин обрабатывают ультразвуком в дистиллированной воде. Для удаления поверхностных дефектов ЗЭ травят 10 - 20 мин в 10 %-ной уксусной кислоте. Далее ЗЭ тщательно промывают несколько раз в дистиллированной воде и сушат в вакууме в течение 2 - 3 ч.
Контроль степени очистки ЗЭ от дентина проводят по интенсивности фонового сигнала в спектре ЭПР, обусловленного радикалами органической матрицы эмали и остатками дентина.
