ГОСТ 30028.1—93
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
СРЕДСТВА ЗАЩИТНЫЕ
ДЛЯ ДРЕВЕСИНЫ
ПОВИДОВОЙ МЕТОД ИСПЫТАНИЯ
” ЗАЩИЩАЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ АНТИСЕПТИКОВ f t ч ОТ ВОЗДЕЙСТВИЯ ДЕРЕВООКРАШИВАЮЩИХ И
ПЛЕСНЕВЫХ ГРИБОВ
А Ц
1- ’ I
у Издание официальное
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ
ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
МинскПредисловие
1 РАЗРАБОТАН Российской Федерацией. ТК 82 “Защита древесины и древесных материалов”
ВНЕСЕН Техническим секретариатом Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации
2 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации 21 октября 1993 г.
За принятие стандарта проголосовали:
Наименование государства |
1 Іаименование национального органа по стандартизации |
Республика Беларусь Республика Казахстан Российская Федерация Укра ина |
Белстандарт Казглавстандарт Госстандарт России Госстандарт Украины |
3 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
© Издательство стандартов, 1994
Настоящий стандарт нс может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Технического секретариата Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации
ПСОДЕРЖАНИЕ
Область применения 1
Нормативные ссылки 1
Сущность метода 2
Пробы и образцы 2
Виды грибов 2
Аппаратура и материалы 3
Подготовка к испытанию 4
Проведение испытаний 5
Обработка результатов 5
Протокол испытаний 6
Приложение Л Приготовление ячменного пеохмеленного сусла 7МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
СРЕДСТВА защитные; для ДРЕВЕСИНЫ
Нониловой метод испытания защищающей способности антисептиков от воздей-
ствия дерсвоокрашивающих и плесневых грибов
Wood-protecting preparations. Semblance method testing way for toxicity to wood-
colouring and moulding fungi
Дата введения 1995—01—01
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Настоящий стандарт распространяется на защитные средства для древесины (далее — защитные средства) и устанавливает метод повидовых испытаний токсичности отдельных химических веществ или их комбинаций по отношению к плесневым и дерсвоокрашивающим грибам.
Метод предназначен для исследовательских целей.
НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 892—89 Калька бумажная. Технические условия
ГОСТ 1770—74 Посуда мерная лабораторная стеклянная.
Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия
ГОСТ 5556—81 Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия
ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 9412—77 Марля медицинская. Технические условия
ГОСТ 12026—76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
ГОСТ 17206—84 Агар микробиологический. Технические условия
ГОСТ 23932—90 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие технические условия
ГОСТ 24104—88 Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия
ТУ 6—09—10—238—84 Сусло-агар сухой.
Издание официальное 1СУЩНОСТЬ МЕТОДА
Сущность метода повидовых испытаний антисептиков состоит в пятнадцатидневной выдержке чистых культур стандартных штаммов грибов на питательной сусло-агаровой среде, содержащей антисептик в заданных концентрациях, и установлении стадий развития и отмирания гриба.
ПРОБЫ И ОБРАЗЦЫ
Пробы защитных средств отбирают по технической документации.
Защитные средства испытывают не менее чем при пяти концентрациях. Концентрации подбирают таким образом, чтобы максимальная из них, предположительно обеспечивающая отмирание гриба, была реальной для практического применения. Для испытаний рекомендуются следующие концентрации: 0,016; 0,064; 0,256; 1,024; 4,096 %.
Питательную сусло-агаровую среду, используемую в качестве субстрата для выращивания культур грибов, готовят из ячменного неохмеленного сусла и микробиологического агара или из сухого сусла-агара.
Контролем служит питательная среда без добавления защитного средства.
ВИДЫ ГРИБОВ
Для испытания эффективности защитного средства используют чистые культуры стандартных штаммов (штаммы “Сенеж”) 20 видов плесневых и деревоокрашивающих грибов:
Stemphulium piriformc;
Cladosporium herbarum;
Alternaria humikola;
Sporidesmium echinellium;
Phialophora fastiqiata;
Aposhaeria pinea;
Discula pinicola;
Burgoa anomola;
Leptographium pullulars;
Sortaria specia;
Verticillium marquandi;
Fusarium javanicum;
Aspergillus viger;Paccilomyccs vcriottii;
Trichodcrma harzianum;
Chactomium spiriliforum;
Aspergillus flaivus;
Pcnicillium cyclopium;
Trichosporium heteromorphum;
— Pullularia pullulans.
АППАРАТУРА И МАТЕРИАЛЫ
Для проведения испытаний применяют:
автоклав медицинский, обеспечивающий давление пара от 0,15 до 0,20 МПа;
термостат, обеспечивающий температуру не менее 100 °С;
весы лабораторные по ГОСТ 24104 с погрешностью взвешивания не более 0,02 г;
весы аналитические по ГОСТ 24104 с погрешностью взвешивания не более 0,0002 г;
лампу бактерицидную ртутно-кварцевую;
спиртовки стеклянные лабораторные по ГОСТ 23932;
бюксы медицинские;
иглу бактериологическую (платиновую или хромоникелевую) длиной не менее 100 мм;
баню водяную лабораторную;
бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026;
кальку бумажную по ГОСТ 892;
вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556;
марлю медицинскую по ГОСТ 9412;
колбы конические узкогорлые по ГОСТ 23932 вместимостью 250 и 500 см3;
колбы конические широкогорлые по ГОСТ 23932 вместимостью 750; 1000 и 4000 см3;
колбы мерные по ГОСТ 1770 вместимостью 50 и 250 см3;
пипетки вместимостью 50 см3;
стаканчики для взвешивания (бюксы) 30 х 40 и 40 х 60 мм по ГОСТ 23932;
воронки стеклянные по ГОСТ 23932;
стаканы химические с носиком по ГОСТ 23932 вместимостью 400 и 1000 см3;
пробирки бактериологические 20 х 2000 мм по ГОСТ 23932;
чашки Петри диаметром не менее 100 мм;
сусло ячменное неохмеленное;агар микробиологический по ГОСТ 17206;
сусло-агар сухой по ТУ 6—09—10—238—84;
спирт денатурат;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709;
растворы защитных средств заданных концентраций.
ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
Для приготовления питательной среды отмеряют по 150 см3 ячменного неохмеленного сусла, приготовленного в соответствии с приложением А, разливают его в колбы, добавляют по 4 г измельченного агара, плотно закрывают ватно-марлевыми проб-
к
в автоклаве в течение
готовят пять колб с
ами, завязывают калькой и стерилизуют 40 мин при давлении 0,1 МПа.Н
среды непосредственно
а каждый вариант испытания питательной средой.После стерилизации питательной перед се разливом в чашки Петри в каждую колбу добавляют по 50 ем3 раствора антисептика расчетной концентрации, обеспечивающей заданную концентрацию в общем объеме питательной среды, равном 200 см3.
Культуры грибов для испытаний выращивают в бактериологических пробирках вместимостью 50 см3 на питательной сусло-агаровой среде, содержащей на 1000 см3 среды агар-агара 20—25 г и солодового экстракта 250 г. Питательную среду наливают в бактериологические пробирки на одну третью часть их объема, стерилизуют в автоклаве при давлении (0,15 ± 0,01) МПа в течение 25 мин, дают остыть с образованием скошенной поверхности среды и за тридцать дней до испытания инфицируют в стерильных условиях определенным видом чистой культуры гриба с помощью бактериологической иглы.
Водорастворимые защитные средства растворяют в дистиллированной воде, органикорастворимыс — в летучем органическом растворителе.
Растворы защитных средств готовят объемно-весовым способом. Навеску сухого защитного средства т для приготовления раствора заданной концентрации с в процентах определяют по формуле
V
(1)
■ р ■ ср - плотность растворителя, г/см .
Навеску сухого защитного средства взвешивают в бюксе с погрешностью не более 0,0002 г, переносят в мерную колбу вместимостью 250 ем3, доливают до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.
ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЙ
Испытания защитного средства заданной концентрации проводят нс менее чем три раза на каждом виде гриба. На один вариант испытания (одной концентрации) готовят 60 чашек Петри.
Разлив питательной среды по чашкам Петри проводят в бюксе одной стерильної) пипеткой. Разлив начинают с контрольной среды без антисептика, последовательно переходя от меньшей концентрации к большей. В каждую чашку Петри наливают 15 см3 питательной среды.
Инфицирование питательной среды в чашках Петри производят спорами или кусочками мицелия тридцатидневных культур грибов. Инфицирующий материал берут из зоны наиболее раннего плодоношения гриба.
Инфицирование питательной среды проводят в пяти местах по схеме “конверта” через приоткрытую крышку путем уколов иглой.
Чашки с инфицированной средой выдерживают в комнатных условиях при температуре воздуха (20 ± 2)° С и влажности воздуха (70 ± 2) %. Продолжительность испытания составляет 15 сут.
Состояние развития гриба оценивают визуально. Первый осмотр чашек проводят на следующий день, последующие — через каждые сутки.
OliPAfiOTKA РЕЗУЛЬТАТОВ
В качестве критериев оценки используют время появления колоний грибов, их диаметр и характеристику. Отмечают концентрации, вызывающие: снижение темпа прорастания грибов — Pi; снижение вероятности прорастания — Рз; морфологические аномалии воздушного мицелия — Ру, существенную задержку роста грибов — Ру, подавление плодоношения — Р5; стимуляцию темпа прорастания грибов — Рь; стимуляцию вероятности прорастания грибов — Рт, отмирание гриба (отсутствие роста) — Рл. 5Защитные средства классифицируют по основному показателю — концентрации раствора, при которой происходит отмирание гриба, в соответствии с таблицей 1.
Таблица I
Концентрация раствора, вызывающая отмирание гриба. % |
Класс защитного средства |
Менее 0,256 0,256 — менее 1,0 1,0 — менее 4,0 Болес 4,0 |
Высокоэффективный Эффективный Слабоэффсктивный _ _Че5‘И’?к?1!.вный |
10 ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЙ
Протокол испытаний должен содержать следующие данные: — наименование и марку защитного средства;
концентрацию защитного средства (а) в процентах;
количество питательной среды с заданной концентрацией защитного средства (Л/,) в кубических сантиметрах;
массу навески защитного средства, взятой для приготовления питательной среды М/ (т>, в граммах;
состояние развития грибов на питательной. среде с концентрацией защитного средства с(;
класс защитного средства;
дату проведения испытания и подпись оператора.ПРИЛОЖЕНИЕ Л
( информационное)
Приготовление ячменного неохмеленпого сусла
Для приготовления ячменного сусла берут 250 г размолотого ячменного солода, приливают 1 л поды и нагревают на водяной бане в течение 30 мин до 45 °С. При этой температуре смесь выдерживают 30 мин, затем продолжают подогрев до 60 С п течение 20 мин и выдерживают смесь при этой температуре в течение 20 мин. После этого смесь быстро нагревают до 72 °С и охлаждают до 60 °С. При этой температуре смеет, выдерживают в течение 20 мин. Далее поду п бане нагреваю’ до кипения и сусло прогревают па кипящей бане 30 мин.
По окончании этой операции сусло проверяют на готовность по содержанию в нем крахмала. Для этого к капле готового сусла приливают каплю 5 %-ного раствора йода. Отсутствие черного осадка свидетельствует о готовности сусла, которое не должно содержать крахмал.
Готовое сусло фильтруют и стерилизуют в автоклаве п течение 90 мин при давлении 0,15 МПа. Приготовленное по данной методике сусло имеет сахаристость 12 баллингов.
Д
емой поды
рассчитывают по формуле
ля приготовления питательной среды используют сусло с сахаристостью 4 баллипга, для чего его разбавляют дистиллированной водой. Количество добавля- (А.1)—
где Лі
И
сахаристость приготовленного сусла;— количество приготовленного сусла, см’.У
Л19
ДК 630.841.1.001.4:006.354Ключевые слова: средства защитные для древесины, защищающая способность антисептиков, дерсвоокрашивающие и плесневые грибы
ОКСТУ 5309
Редактор Л.И. Нахимова
Технический редактор О.Н. Власова
Корректор А.С. Черноусова
Оператор ЕН. Мартемьянова
Сдано п набор 20.05.94. Подписано в печать 30.05.94. Усл.псч.л. 0,70,
Усл.кр.-отт. 0,70. Уч.-изд.л. 0,65. Тираж 371 экз. С 1376. Зак.'УД?
Ордена "Знак Почета" Издательство стандартов,
107076, Москва, Колодезный пер., 14.
Набрано в Издательстве стандартов на ПЭВМ.
Калужская типография стандартов, ул. Московская, 256.