Страница 4: ГОСТ 9958—81. Изделия колбасные и продукты из мяса (67679)

(Измененная редакция, Изм. № 1).

Обнаружение полиморфных грамотрицательных палочек, об­разующих характерный рост на средах в Н-форме (подвижные) и О-форме (неподвижные), ферментирующих глюкозу и мочевину, неферментирующих лактозу и маннит, указывает на наличие бак­терий из рода протея.

(Измененная редакция, Изм. № 2).

ГОСТ 9958—-ЗІ С*

Из разведения анализируемой взвеси продукта (1:10) про­водят посевы на молочно-солевой агар, содержащий 65 г/дм^а хлористого натрия, для выявления пигмента или желточно-соле­вой агар, содержащий 65 г/дм³ хлористого натрия, для выявления лецитиназной активности.

Взвесь наносят на поверхность агара в количестве 0,2 см³ и равномерно растирают по всей поверхности агаровой среды.

Посевы термостатируют в течение 24 ч при температуре 37^СС и 24 ч выдерживают при комнатной температуре.

На поверхности питательной среды колонии стафилококка имеют вид плоских или слегка выпуклых блестящих колоний с ровным краем. При этом на молочно-солевом агаре лучше выяв­ляется пигмент (эмалево-белый или золотистый), а на желточно­солевом агаре колонии стафилококков могут образовывать «ра­дужный венчик», что является одним из признаков их патоген­ности.

Из подозрительных колоний готовят препараты, которые окра­шивают по Граму. При наличии стафилококков в препарате об­наруживаются грамположительные мелкие кокки, располагаю­щиеся неправильными гроздьями.

Для подтверждения признаков патогенности стафилококков ставят реакцию плазмокоагуляции. В прибор с 0,5 см³ цитрат­ной плазмы крови кролика, разведенной физиологическим раст­вором в соотношении 1 :4, вносят петлю чистой суточной культу- ры стафилококка и ставят в термостат при температуре 37°С. Реакцию плазмокоагуляции учитывают через 3—4 ч (не встряхи­вая пробирку) и оставляют в термостате на сутки для окончатель­ного учета через 24 ч.

Для постановки реакции плазмокоагуляции можно использо­вать также сухую цитратную плазму крови кролика.

Реакцию считают положительной, если плазма коагулируется в сгусток.

(Измененная редакция, Изм. № 1, 2).

Для определения количества стафилококков учитывают коло­нии стафилококков, давшие положительную реакцию плазмокоа­гуляции. При расчете на 1 г продукта количество подсчитанных колоний умножают на степень разведения и делят на количество посевного материала.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

С. 20 ГОСТ 9958—81

сон-Блера, на которых в результате восстановления сернистокис­лого натрия в сернокислый натрий происходит взаимодействие с хлористым железом и образуется почернение среды за счет сер­нистого железа.

1 см³ анализируемой взвеси (1: 10 по п. 4.1.2) стерильной пи­петкой вносят в пробирку с 9 см³ жидкой сульфит-циклосерино- вой среды, затем проводят последовательные пересевы на аналогичные объемы среды, в результате чего получают возра­стающие десятикратные разведения суспензии. Инкубацию про­водят при 46^ГС в течение 8—12 ч. При наличии роста сульфит- восстанавливаюїдих клостридий образуется почернение среды.

В пробирки, содержащие по 9 см³ расплавленной и охлажден­ной до температуры 45°С среды Вильсон-Блера, вносят стериль­ной пипеткой по 1 см³ десятикратных разведений (от Кк⁴ до 10 ) взвеси испытуемого продукта. Посевной материал и среду тщательно перемешивают. Посевы помещают в термостат с тем­пературой 46°С на 8—12 ч или 37°С на 20 ч. Появление в среде черных колоний или почернение всей среды указывает на присут­ствие сульфит-восстанавливающих клостридий.

Почернение среды Вильсон-Блера могут вызвать многие эн­теробактерии. Для подтверждения роста сульфитвосстанавливаю- щих клостридий используют пересев в пробирки со средой Китта- Тароцци, предварительно прогретой в течение 25 мин в кипящей водяной бане и быстро охлажденной до 45°С. Термостатирование посевов проводят при (37±0,5)°С, ежедневно в течение 5 сут проверяя в них помутнение среды, выделение газа, появление постороннего запаха, иногда разложение кусочков печени. Сразу после появления признаков роста готовят микроскопический пре­парат. Материал для этого берут пастеровской пипеткой со дна пробирки. При микроскопировании отмечают грамположительные палочки, образующие овальные споры.

У спорообразующих грамположительных микроорганизмов выявляют каталазную активность с помощью раствора перекиси водорода 30 г/дм³. Отсутствие пузырьков газа при добавлении к капле культуральной жидкости такого же количества перекиси водорода позволяет считать, что в посевах присутствуют микроор­ганизмы из рода клостридий.

В случае отсутствия спор в микроскопическом препарате по­ложительной пробы на каталазу, присутствия в посевах смешан­ной микрофлоры, 1—2 капли накопительной среды переносят в стерильную чашку Петри, заливают расплавленной и охлажден­ной до 45°С средой Вильсон-Блера. Застывшую поверхность плот-

ГОСТ 9958—81 С. 21

ной среды заливают холодным агаром. Посевы термостатируют 24—48 ч при (37+0,5) °С. Появление в нижнем слое агара черных или коричневых колоний свидетельствует о присутствии в посе­вах сульфитвосстанавливающих клостридии.

(Измененная редакция, Изм. <N2 2)*

За положительный титр клостридий (сульфит-восстановите- лей) принимают то максимальное разведение суспензий, в посеве которого произошло почернение среды. Например, если характер­ные изменения наблюдаются в пробирках с разведением І0¹, то считают, что в исследуемом продукте будет 10 (или 1-Ю¹) кле­ток в 1 г; если характерные изменения наблюдаются в пробирках с разведением 10², то считают, что в исследуемом продукте — 100 (или МО²) микробных клеток в 1 г.С. 22 ГОСТ 99S8—81

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Министерством мясной и молочной промышленности СССР

ИСПОЛНИТЕЛИ:

А. Ф. Савченко, канд. техн, наук; В. Г. cl lOy канд. вет. наук; Л. И. Изотова,

канд. техн, наук; Н. А. Жижокина; 3. Н. Кострулина, канд. вет. наук

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ ПОСТАНОВЛЕНИЕМ Госу­дарственного комитета СССР по стандартам от 31.12.81 № 5965

3. ВЗАМЕН ГОСТ 9958—74

4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

ГОСТ 9958—81 С. 23

5. Срок действия продлен до 01.01.94 Постановлением Госстан­дарта СССР от 25.12.87 № 5053

6. ПЕРЕИЗДАНИЕ (август 1988 г.) с Изменениями № 1, 2, утверж­денными в августе 1983 г., в декабре 1987 г. (ИУС 12—83, 4- 88)Редактор Т И Василенко
   Технический редактор Э В Митяй
   Корректор М М Герасименко

Сдано в наб 05 10 88 Подп в печ 19 12 88 1,5 уел и л 1,625 усл кр отт 1,52 уч изд л
Тираж 8000 Цена 10 коп

Ордена «Знак Почета» Издательство стандартов, 123840, Москва, ГСП,
Новопресненский пер , д 3

Вильнюсская типография Издательства стандартов, ул Даряус и Гирено, 39 Зак 2719.

Цена 10 коп.

ПРОИЗВОДНЫЕ ЕДИНИЦЫ СИ, ИМЕЮЩИЕ СПЕЦИАЛЬНЫЕ НАИМЕНОВАНИЯ