---

ГОСТ 9958-81* Колбасные изделия и продукты из мяса. Методы бактериологического анализгСтр. 1 из 26.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

СОЮЗА ССР

ИЗДЕЛИЯ КОЛБАСНЫЕ
И ПРОДУКТЫ ИЗ МЯСА

МЕТОДЫ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА

ГОСТ 9958—81

И

Цена 10 коп.

здание официальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ
Москв

а

У

Группа Н19

ДК 637.523 : 543,$ г 006.354

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

И

ГОСТ

ЛАСО Of
Jr * Zr I

ЗДЕЛИЯ КОЛБАСНЫЕ
И ПРОДУКТЫ ИЗ МЯСА

Методы бактериологического анализа

Sausage products and meat products
Methods of bacteriological analysis

ORC ТУ 9209.

Срок действия с 01.01.83 до 01,01.94

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

Настоящий стандарт распространяется на колбасные изделия (фаршированные, вареные, полукопченые, варено-копченые, сыро­копченые, ливерные и кровяные колбасы, мясные хлебы, сосиски, сардельки, паштеты, зельцы, студни), продукты из мяса (из сви* нины, говядины, баранины, из мяса других видов убойного скота и птицы) и устанавливает методы бактериологического анализа: определения общего количества микробов;

определения бактерий группы кишечной палочки;

определения бактерий из рода сальмонелл;

определения бактерий группы протея;

определения коагулазоположительных стафилококков;

определения сульфитвосстанавливающих клостридий.

1. ОТБОР ПРОБ

   1. Отбор точечных проб для бактериологического анализа проводят по ГОСТ 9792—73.

   2. Пробы хранят при температуре 6—8°С. Анализ проводят не позднее, чем через 4 ч с момента отбора проб.

2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ, РЕАКТИВЫ

2.1. Для проведения бактериологического анализа применяют следующие аппаратуру, материалы и реактивы:

автоклав вертикальный по гост 9586—75;

аппарат Коха;

П

Издание официальное

ерепечатка воспрещена

© Издательство стандартов, 1988

С. 2 ГОСТ 9958—81

весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104—80;

гомогенизатор бактериологический, смеситель или аппарат для измельчения тканей;

микроскоп марок МБИ и МБР по ГОСТ 8284—78 или других аналогичных марок;

мясорубку бытовую по ГОСТ 4025—83;

потенциометр;

термостат электрический с автоматическим терморегулятором; термостат или водяную баню с терморегулятором;

холодильник электрический бытовой по ГОСТ 16317—87;

шкаф сушильный лаборатории;

бумагу парафинированную по ГОСТ 9569—79;

бумагу фильтровальную лабораторную по ГОСТ 12026—76;

вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556—81; воронки В-36—80 ХС, ВФ-1—75 ХС по ГОСТ 25336—82; лупы с увеличением 3^х и 5^х;

марлю медицинскую по ГОСТ 9412—77;

марлю бытовую по ГОСТ 11109—74;

ножницы медицинские по ГОСТ 21239—77;

петлю бактериологическую;

палочки стеклянные;

пинцеты медицинские по ГОСТ 21241—77;

пипетки Мора вместимостью 25 и 50 см³;

термометры стеклянные технические по ГОСТ 2823—73;

пипетки пастеровские;

пипетки 7—1 — 1; 7—1—2; 7—1—5; 7—1 —10; 8—2 0,1 по ГОСТ 20292—74;

пробирки П2—10—90 ХС; ПЗ—5 ХС по ГОСТ 25336—82;

скальпель медицинскии по ГОСТ 21240—77;

стаканы В-1—250 ТС; Н-2—100 ТХС по ГОСТ 25336—82;

колбы К-2—250—34 ТХС; П-2—250—34 ТХС по ГОСТ 25336—82;

спиртовка СЛ-1 по ГОСТ 25336—82;

стекла предметные для микропрепаратов по ГОСТ 9284—75;

стекла покровные для микропрепаратов по ГОСТ 6672—75;

ступки фарфоровые с пестиком по ГОСТ 9147—80;

флаконы Сокслета;

цилиндры 2—100; 4—100; 4—25 по ГОСТ 1770—74;

колбы мерные 2—100—2; 2—250—2; 2—1000—2 по ГОСТ 1770—74;

часы песочные па 1, 2, 5 мин;

чашка чБН-1— 40 по ГОСТ 25336—82;

штативы для пробирок;

агар микробиологический по ГОСТ 17206—84;

агар Эндо, сухой;

ГОСТ 9958—81 С. 3

белок яичный;

бриллиантовый зеленый;

воду бромную;

бромкрезолпурпур;

бульон мясо-пептонный по ГОСТ 20730—75;

воду дистилллированную по ГОСТ 6709—Т2;

воду мясную по ГОСТ 20729—75;

генциан-виол ет;

гидролизат рыбный сухой:

глюкозу кристаллическую по ГОСТ 975—88, х< чд

глицерин по ГОСТ 6259—75, х. чд

дрожжи хлебопекарные прессованные по ГОС! 171—81;

диализат дрожжевой;

железо сернокислое по ГОСТ 4148—78;

железо хлористое;

желчь крупного рогатого скота;

йод по ГОСТ 4159—79;

калий йодистый по ГОСТ 4232—74;

калий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 4198—75, ч. д. ад

калий фосфорнокислый двузамещенный по ГОСТ 2493—75, ч. д. а.;

кальций углекислый по ГОСТ 4530—76;

кислоту розоловую;

кислоту соляную по ЮСТ 14261—77, ос.ч., плотностью 1,19 г/см³;

кристалл-виолет;

лактозу, х. чд

маннит по ГОСТ 8321—74, х. чд

магний сернокислый по ГОСТ 4523—77;

магний хлористый по ГОСТ 4209—77, х. чд

масло вазелиновое медицинское по ГОСТ 3164—78;

масло иммерсионное для микроскопии по ГОСТ 13739—78;

метиленовый голубой;

мел химический осажденный по ГОСТ 8253—79;

мочевину по ГОСТ 6691—77, х. чд

набор адсорбированных поливалентных сывороток и моноре- цепторных агглютинирующих О и Н сальмонеллезных сывороток;

натрий двууглекислый по ГОСТ 4201—79;

натрия гидроокись по ГОСТ 4328*—77;

натрий кислый селенистокислый (без теллура);

натрий сернистокислый безводный по ГОСТ 195—77;

натрий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 245—76, Ч. д, ад

натрий фосфорнокислый двузамещенный безводный по ГОСТ 11773—76, ч. д. ад

С. 4 ГОСТ 9958—81

натрий хлористый по ГОСТ 4233—77, х. ч.;

панкреатин;

парадиметиламидобензальдегид;

пептон сухой ферментативный для бактериологических целей по ГОСТ 13805—76;

песок кварцевый для тонкой керамики по ГОСТ 7031—75;

плазму цитратную сухую (кроличью);

сахарозу по ГОСТ 5833—75, х. ч.;

соль закиси железа и аммония двойную сернокислую (соль Мора) по ГОСТ 4208—72;

спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300—87;

спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962—67;

среду Вильсон-Блера (сухую);

среду КОДА, сухую питательную;

среду Левина сухую;

среду Плоскирева сухую;

среду кито-пентоно-дрожжевую, сухую (среду КПД);

среды сухие с углеводами и индикатором «ВР» (среды Гисса); натрии серноватистокислыи по СТ СЭВ 223—75, х, ч.;

фуксин (основной и кислый) для микробиологических целей; хинозол;

хлороформ по ГОСТ 20015—74;

Д-циклосерин.

(Измененная редакция, Изм. № 2).

ГОСТ 9958—81 С. 5

агара). Помещают агар в автоклав (не завинчивая крышку) или в аппарат Коха на I ч, чтобы белок свернулся и, оседая, увлек за собой взвешенные частицы. Горячий раствор фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Разливают во флаконы и пробирки и сте­рилизуют в автоклаве в течение 20 мин при давлении 10^s Па.

2 г агара-агара растворяют в 100 см³ водопроводной воды. Раствор стерилизуют при давлении 10⁵ Па в течение 20 мин.

В 1 дм³ кипящей водопроводной воды опускают на 20 мин 1 кг мяса, освобожденного от костей, жира и сухожилий, нарезанного мелкими кусочками. Затем мясо вынимают, измельчают на мясо­рубке, снова кладут в тот же отвар. Добавляют 40 г измельченной поджелудочной железы, очищенной от жира и дважды пропущен­ной через мясорубку (вместо поджелудочной железы можно брать 5 г панкреатина), доливают 20 см³ хлороформа. Бутыль плотно закрывают пробкой и энергично встряхивают (пробку надо при­держивать). Смесь оставляют для переваривания в термостате при 45°С до 20 сут. Мясо в виде мелкозернистой массы оседает на дно бутыли. Жидкость над мясом должна быть прозрачной. Эту жидкость сливают и стерилизуют при 10⁵ Па в течение 20 мин. Готовый раствор дает положительную реакцию на триптофан с бромной водой.

3—3,5 см³ чистого брома растворяют в 100 см³ дистиллирован­ной (стерильной) воды.

Основной раствор Хоттингера разводят в 5—10 раз (до соло­менного цвета). На 1 дм³ разведенного бульона берут 10 г пептона и 5 г хлористого натрия. Затем устанавливают pH 7,3—7,4, кипя­тят 20 мин и фильтруют.

Режим стерилизации 20 мин при давлении 10⁵ Па.

В 100 см³ расплавленного мясо-пептонного агара добавляют 1 г лактозы, растворенной в 5 см³ водопроводной воды, прокипя­ченной в течение 5 мин. МПА охлаждают до температуры 60—70°С и к нему добавляют смесь растворов основного фуксина и серни­стокислого натрия. Для приготовления смеси 0,5 г сернистокисло­го натрия растворяют в 5 см³ стерильной воды, кипятят в течение 5 мин и добавляют 1 см³ спиртового раствора 100 г/дм³ основного

С. 6 ГОСТ 9958—81

фуксина. После перемешивания среду разливают в чашки Петри. Среда Эндо в чашках должна иметь бледно-розовый цвет.

Среду Эндо готовят в день ее использования.

(Измененная редакция, Изм. № 2).

Раствором можно пользоваться в течение месяца со дня при­готовления.

Для приготовления хинозола 0,1 г порошка растворяют в 100 см³ стерильной дистиллированной воды. При хранении свой- ства его не изменяются. Срок хранения не ограничен.

Краски хранить в темном месте при комнатной температуре.

В 600 см³ стерильной воды растворяют 1 г однозамещенного фосфорнокислого калия и 0,1 г сернокислого магния, затем до­бавляет 100 г прессованных хлебных дрожжей и взбалтывают до получения суспензии. В колбу с суспензией наливают 8—10 см³ хлороформа, закрывают ватной пробкой и накрывают колпачком из парафинированной бумаги (для предотвращения испарения). Колбу помещают в термостат при температуре 45—47°С на 10 сук Затем ставят на водяную баню и кипятят в течение 20 мин, фильт­руют и стерилизуют при давлении 5-Ю⁴ Па в течение 15 мин.

Дрожжевой автолизат хранят в холодильнике при температуре 4—6°С в течение двух недель.

Цвет готовой среды — фиолетовый.

ГОСТ 9958—81 С. 7

Для приготовления метиленового голубого 0,1 г порошка зали­вают 100 см³ дистиллированной воды. Через сутки раствор готов к употреблению. При хранении свойства его не изменяются, срок хранения не ограничен.

Краски хранить в темном месте при комнатной температуре.

Среду разливают по 7—9 см³ в стерильные пробирки размером 19X180 мм. Цвет среды в пробирках должен быть красно-фиоле­товый.

(Измененная редакция, Изм. № 2).

Среду разливают в пробирки по 10 см³.

В 1 дм³ дисіиллированной воды помещают 10 г пептона, 50 см³ желчи, кипятят 30 мин, фильтруют через вату, добавляют 2,5 г лактозы и доводят объем дистиллированной водой до первона­чального (1 дм³), добавляют 2 см³ водного раствора 10 г/дм® циан- виолета. Среду разливают в пробирки с поплавками по 10 см³ и стерилизуют при давлении 5-10⁴ Па в течение 15 мин. Среда имеет фиолетовый цвет.

Допускается замена поплавков клочками стерильной ваты.

(Измененная редакция, Изм. № 2).

В мерный цилиндр с 50 г тиосульфата натрия добавляют ди­стиллированную воду до метки 100 см³. Полученный раствор сте­рилизуют однократно в аппарате Коха 20 мин.