При дотриманні правил стерильності, безпосередньо на воскозаводі,
розкривають товарну упаковку пачки і з різних місць відбирають для
дослідження 5 листів вощини.
2. З обох поверхонь листів вощини роблять змиви шляхом
ретельного протирання поверхонь листа ватно-марлевим тампоном,
змоченим стерильним фізіологічним розчином. Зібрані змиви містять
(заносять) у стерильних флаконах і доставляють у лабораторію
ветеринарної медицини для дослідження.
3. Змиви в лабораторії розливають у стерильні центрифужні
пробірки і центрифугують при 2000 обертів у хвилину протягом
15 хвилин. Осад ресуспендують стерильним фізіологічним розчином,
розділяють на дві частини. Одну частину, прогріту при
96-98 град. C, використовують при бактеріологічних дослідженнях
для вилучення збудника американського гнильця Paenibacillus larvae
larvae (Bac. larvae). А прогріту при 70 град. C - для вилучення
культур збудників європейського гнильцю, парагнильцю і при
мікологічних дослідженнях.
Підготовлені змиви висівають на живильні середовища:
а) прогрітий матеріал - для вилучення збудника американського
гнильцю - висівають на спеціальні живильні середовища: середовище
Томашеца (м'ясо-пептонний сироватковий агар, який готують шляхом
додавання до розплавленого й охолодженого до 40-50 град. C
м'ясо-пептонного агару (pH 6,8-7,0) - 10%-ної стерильної
неконсервованої сироватки крові коней; для виготовлення
м'ясо-пептонного агару використовують тільки рослинний агар-агар,
агар Уілліса-Гоббза з pН 6,9-7,0;
б) непрогрітий змив - для вилучення збудників європейського
гнильцю і парагнильцю - висівають на середовища Черепова чи Бейлі,
звичайний м'ясо-пептонний агар і бульйон (pH 7,2-7,4) і середовище
Томашеца (м'ясо-пептонний агар з 10%-ної нормальної конячої
сироватки).
Для вилучення чистої культури збудників гнильцевих хвороб,
особливо Bac. larve, необхідно висівати на поверхню живильного
середовища достатню кількість суспензії гнилісної маси загиблих
личинок. Висіви вирощують у термостаті при температурі
35-37 град. C.
Видимий ріст збудників гнильцевих хвороб виявляється через
24-72 години, інколи до 5 діб.
При проведенні мікологічних досліджень змиву для вилучення
чистої культури гриба використовують живильні середовища Чапека,
агар Сабуро, картопляний і Сусло-агар. Висіви на вказаних
середовищах витримують при температурі 22-26 град. C. Первинний
ріст з'являється на поверхні агару на третю-п'яту добу, наглядають
за висівами 10 діб. Чисту культуру виділяють шляхом додаткового
пересіву культури з периферії колоній, характерних для даного виду
гриба.
Перед висівами живильний агар розігрівають на водяній бані,
охолоджують до 45-50 град. C і додають антибіотики (пеніцилін -
50 ОД і стрептоміцин - 100 ОД на куб. см середовища) для
пригнічення росту банальної мікрофлори.
4. У необхідних випадках звертаються до дослідження проб
воску, узятих від вищевказаних листів вощини, у кількості по 10 г
від досліджуваної пачки вощини.
5. Узяті проби воску з вощини поміщають у стерильні паперові
пакети, маркують відповідно до номера пачки і доставляють у
лабораторію ветеринарної медицини, де кожну пробу воску окремо
поміщають у стерильну колбу з притертою пробкою, заливають 50 мл
одного з органічних розчинників воску: петролейного або сірчаного
ефіру, ксилолу або хлороформу. (Ці маніпуляції проводять у
витяжній шафі). Після чого колби витримують із закритою пробкою на
водяній бані при температурі 35-40 град. C протягом 6 годин.
Розчинені проби воску піддають центрифугуванню при 2000 обертів на
хвилину протягом 20 хвилин. Осад висіюють на твердих і рідких
живильних середовищах також як змиви з поверхні листів вощини
(п. 3 цього додатка).
6. ідентифікацію вилучених культур збудників гнильцевих
хвороб бджіл здійснюють відповідно до Методичних вказівок з
диференційної діагностики змішаних інфекційних хвороб розплоду
бджіл, затверджених Головним державним інспектором ветеринарної
медицини України 27.12.2001 і 15-14/369.
Начальник управління державної
інспекції ветеринарної медицини М.В.Пацюк
Додаток 3
до п. 6.2
Ветеринарно-санітарних
вимог щодо заготівлі і
переробки воскосировини
ТЕХНОЛОГІЧНА КАРТА,
спосіб і параметри термічної обробки воску
--------------------------------------------------------------------
|N |Дата| N |Ветеринарний| Спосіб |Темпе-| Час |Висновок |
|з/п| |партії| висновок |знезараження|ратура|(годин)|(лабора- |
| | | |щодо якості | (автоклав, | | |торний ) |
| | | | сировини | відстій) | | | |
|---+----+------+------------+------------+------+-------+---------|
|---+----+------+------------+------------+------+-------+---------|
|---+----+------+------------+------------+------+-------+---------|
|---+----+------+------------+------------+------+-------+---------|
--------------------------------------------------------------------
Начальник управління державної
інспекції ветеринарної медицини М.В.Пацюк
Додаток 4
до п. 6.4
Ветеринарно-санітарних
вимог щодо заготівлі і
переробки воскосировини
ЖУРНАЛ
лабораторного контролю якості знезараження воску
------------------------------------------------------
|N | | N | | N | |
|з/п|Дата|партії|Результати перевірки |експер-|Підпис|
| | | | | тизи | |
|---+----+------+---------------------+-------+------|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
|---+----+------+---------------------+-------+------|
|---+----+------+---------------------+-------+------|
|---+----+------+---------------------+-------+------|
|---+----+------+---------------------+-------+------|
------------------------------------------------------
Начальник управління державної
інспекції ветеринарної медицини М.В.Пацюк
Додаток 5
до п. 6.4
Ветеринарно-санітарних
вимог щодо заготівлі і
переробки воскосировини
ЖУРНАЛ
перевірки санітарної якості вощини
------------------------------------------------------
|N | | N | | N | |
|з/п|Дата|партії|Результати перевірки |експер-|Підпис|
| | | | | тизи | |
|---+----+------+---------------------+-------+------|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
|---+----+------+---------------------+-------+------|
|---+----+------+---------------------+-------+------|
|---+----+------+---------------------+-------+------|
|---+----+------+---------------------+-------+------|
------------------------------------------------------
Начальник управління державної
інспекції ветеринарної медицини М.В.Пацюк
