Результаты испытаний записывают в протокол по п. 1.7.4.Оценка грибостойкости материала по степени развития плесневых грибов

Метод

Степень развития плесневых грибов

Оценка материала


ГОСТ 9.049

ИСО 846


1

0

1, 2

3, 4, 5


Материал не является питательной средой (нейтрален или фунгистатичен)

Материал содержит питательные ве­щества, которые обеспечивают незначи­тельное развитие грибов

Материал содержит достаточное ко­личество питательных веществ благо­приятствующих развитию грибов

2

0

1, 2, 3

4, 5

0

1

2, 3

Материал не является питательной средой для грибов и грибоустойчив при наличии минеральных загрязнений

Материал с держит питательные ве­щества или загрязнен в такой степени, что это способствует лишь незначитель­ному развитию грибов

Материал не обладает сопротивлением к поражению плесневыми грибами и со­держит питательные вещества, способ­ствующие развитию грибов при наличии минеральных загрязнений

3

0 0

(образец . ингибиров

1

2—5

0

0 + зона ания, мм)

1 2—5

Сильный фунгистатический эффект

Сильное влияние фунгицидного эффек­та из-за диффундирования вещества в питательную среду

Слабая фунгицидность

Фунгицидный эффект отсутствует



  1. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

  1. Грибостойкость материала обозначают индексом ПГ (плесне­вые грибы) с трехзначным числовым значением в правом нижнем углу, где последовательно фиксируют баллы, полученные при испытаниях методами І, 2, 3.

Например, характеристику грибостойкости пресс-материала К- 124—38 записывают К-124—38 ПГ123» гДе

  1. — грибостойкость материала по методу 1;

  2. — грибостойкость материала по методу 2;

  3. — грибостойкость материала по методу 3.

Если испытания не проводят по одному из перечисленных методов, то в обозначении вместо балла ставят знак X, например ПГіхз-

Характеристику грибостойкости после предварительного старения обозначают знаком С, например ПГС233.

    1. Характеристику грибостойкости материала, приведенную в п.

    2. вносят во вводную часть НТД на материал.

  1. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ

Требования безопасности — по ГОСТ 9.048.

ПРИЛОЖЕНИЕ

Рекомендуемое

БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД ОЦЕНКИ РАЗВИТИЯ ПЛЕСНЕВЫХ
ГРИБОВ НА ПОЛИМЕРНЫХ МАТЕРИАЛАХ

Метод распространяется на полимерные материалы (пластмассы, компаунды, резины, клеи, герметики) и их компоненты (полимеры, пластификаторы, наполнители, стабилиза­торы, красители, пигменты и т.п.) и позволяет количественно определить степень развития плесневых грибов (далее — грибов) по методам Г, 2, 3 настоящего стандарта.

Сущность метода заключается в получении зависимости количественного показа­теля развития грибов (концентрации внутриклеточной аденозии-5’-трифосфорной кислоты динатриевой соли (АТФ) на поверхности материала) от времени их культивирования на полимерном материале с последующим определением грибостой­кости по кинетическим параметрам развития грибов.

  1. Отбор образцов

    1. Отбор образцов — по п. 1.2.1 настоящего стандарта.

    2. Количество образцов на один отбор рассчитывают по ГОСТ 9.707, приложение 3.

Если относительная ошибка и вероятность попадания среднего арифметического значения показателя развития грибов в доверительный интервал не заданы, количество проб на один отбор должно быть не менее семи.

  1. Аппаратура, материалы, реактивы

Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 1.4.1 настоящего стандарта.

Люминомер ЛБ-ЗП, 8702, 8703, 8705, 8707, БХЛ-06. Допускается использовать другие приборы аналогичного назначения, обеспечивающие измерение световых потоков от 10s1 до 108 квант/с, в области спектра 400—600 нм.

Весы для статического взвешивания по ГОСТ 23676.. Термостат, обеспечивающий температуру нагрева до 200 *С.

Холодильник бытовой электрический по ГОСТ 16317.

Дозаторы для отбора проб 0,01; 0,02; 0,1 см3.

Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.

Колбы цилиндрические мензурные вместимостью до 25 см3 по ГОСТ 1770.

Пипетки вместимостью 1, 10 см3 по ГОСТ 29169.

Аденозин-5’ -трифосфорной кислоты динатриевая соль, 3-водная (АТФ).

Биолюминесцентный АТФ реагент иммолюм,

  1. Подготовка к испытаниям

    1. Образцы подготавливают к испытаниям по пп. 1.5.1—1.5.6 настоящего стандарта.

    2. Готовят раствор АТФ 1 ммоль/дм3: 13,8 мт АТФ помещают в мерную колбу вместимостью 25 см3, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают до полного' растворения. Раствор АТФ 1 ммоль/дм3 разливают по 1 см3 и хранят при температуре минус 20 °С. В замороженном виде раствор АТФ допускается хранить не более 3 мес.

    3. Готовят стандартный раствор АТФ 10 мк? -ль/дм3: порцию раствора АТФ 1 ммоль/дм3 (по п. 3.2) размораживают, отбирают с * омощью дозатора 0,1 см3 раствора и помещают его в пробирку, содержащую 10 см3 дистиллированной воды. Стандартный раствор АТФ готовят непосредственно перед применением-

    4. Готовят к употреблению биолюминесцентный АТФ-реагент иммолюм. В емкость, содержащую АТФ-реагента иммолюм на 10 анализов, добавляют 10 см3 дистиллированной воды, суспензию тщательно перемешивают и оставляют стоять при температуре (25+10) ’С 2 ч. После этого реагент готов к использованию и может храниться в виде суспензии 7—Ю сут в холодильнике при температуре 4 °С.

  2. Проведение испытаний

    1. Заражение и выдерживание образцов — по пп. 1.6.1—1.6.7.

    2. Отбор образцов для количественного определения показателя развития грибов на материале проводят с периодичностью один раз в сутки. Количество отборов должно быть не менее семи.

    3. Определение показателя развития грибов прекращают, если концентрация АТФ в последующем отборе не увеличивается по сравнению с предыдущим. Максимальная продолжительность выдержки в условиях-по п. 1.6.1—1.6.7 настоящего стандарта — не более 56 сут.-

    4. Готовят экстракт АТФ из биомассы, образовавшейся на образце. Для этого образец помещают в колбу или чашку Петри, добавляют 0,0005—0,002 дм3 диметилсульфоксида (количество фиксируют), чтобы полностью покрыть его поверх­ность, интенсивно перемешивают 2—3 мин и оставляют стоять при температуре (25±10) °С не менее 3 ч.

Измеряют интенсивность люминесценции. Для этого в кювету люминометра пипеткой вносят 0,9 см3 суспензии биолюминесцентного АТФ — реагента иммолюм (п. 3.4), предварительно тщательно ее перемешав. Кювету помещают в кюветное 12отделение люминометра И измеряют фоновое свечение /фон» затем в ту же кювету вносят дозатором 0,01—0,1 см3 экстракта АТФ (и. 4.4) и измеряют интенсивность свечения образца 7обр. Затем в ту же кювету вносят дозатЬром 0,01—0,02 см3 стандартного раствора ДТФ (п. 3.3) и измеряют интенсивность свечения 7СТ-

  1. Обработка результатов

    1. Концентрацию АТФ (Сі), мкмоль/см2, в образце вычисляют по формуле

/обр- /фон Иг Из <0

Ci~ f ‘ pi ' СстSi

ст *обр 'I ’

где Сст — концентрация стандартного раствора АТФ, равная 10 мкмоль/дм3;

И. — объем экстракта АТФ, добавленного при измерении интенсивности з

люминесценции, см ;

Уг' — объем стандартного раствора АТФ, добавленного при измерении з интенсивности люминесценции, см ;

V*3 — объем диметилсульфоксида, используемый для экстракции, см3;

St площадь образца; см2;

і порядковый номер образца в отборе, і - 1, 2, 3 ... /.

  1. Определяют экспериментальную среднюю концентрацию АТФ п) в каждом из отборов.

  2. Данные испытаний заносят в протокол (таблица).

  3. Лаг — фазу (Li) устанавливают по промежутку времени до появления Сі, отличной от 0.

Определяют среднюю лаг-фазу (L) и заносят в протокол.

Если разность среднего с минимальным или максимальным значениями экспериментально полученных лат-фаз превышает 50 %, определяют грибостойкость на новой серии образцов.

  1. Стойкость полимерных материалов к воздействию грибов определяют по параметрам L, Ki, Стах кинетического уравнения, описывающего изменение Сп,

_ Стах (2)

" " 1 + Кг { exp (-Ах (тп- Е) ]) ’

где Сп — средняя концентрация АТФ, мкмоль/см2;

Стах — максимальная средняя концентрация АТФ, мкмоль/см2;

Т — средняя экспериментально полученная лаг-фаза;

in. продолжительность выдержки, после которой произведен отбор, ч;

А1 — коэффициент, характеризующий удельную скорость развития грибов на материале ч’1;

Кг — коэффициент, характеризующий способность споры развиваться на материале при данных условиях;

п — порядковый номер отбора (• 1, 2, ... , q).

Методом наименьших квадратов вычисляют коэффициенты Xi и Кг по формулам:



9

Кх =


V / « (Стах- С„ А —• А (Стах ~ Сп

q 2, (Ти- Ь)л1п = - 2, (Тя“ £)"2/ г

и . 1 ''Я / и и ж 1 и ж 1 >


(3)


92 (*»" L)" "


п-1


- Я _ 1 2 (*я“ L)n


_Я » 1


£ (т - L)S - £ - £)я

іще q число отборов.

  1. Определенные по пп. 5.5 коэффициенты Кх и Кг подставляют в формулу (2) и находят расчетные значения Сп(расч)-

  2. Рассчитывают среднее квадратическое отклонение (а) экспериментально полученных значений Сп от расчетных по формуле

(Си — СП(расч))2

Е

<5>

сли среди экспериментальных значений имеются (?я, которые не попадают в интервал (lCn — С^л(расч) I s 2о ), то их исключают из данных эксперимента и коэффициенты ЛГ1 и Кг вновь определяют по п. 5.5 для оставшихся точек. Затем рассчитывают значение а и снова исключают экспериментальные точки, не входящие в интервал 2<7 . Расчет проводят до тех пор, пока все оставшиеся экспериментальные точки будут попадать в интервал 2сг при условии, что их количество должно быть не менее пяти. Если экспериментальные данные не удовлетворяют этому требованию, испытания повторяют.
  1. Оставшиеся для расчета экспериментальные-значения Си, Сти и полученные по п. 5.5 коэффициенты Кх и Кг подставляют в форму (2) и рассчитывают продолжительность лаг-фазы (£(расч))-

Ч ем ниже значение £(расч) и выше значения и Кх, тем менее стоек полимерный материал к воздействию микроскопических грибов.

Таблица



ПРОТОКОЛ
испытаний грибостойкости полимерного материала

  1. Наименование, марка материала

  2. Завод-изготовитель

  3. НТД, по которому выпускается

Номер отбора

Продолжи­тельность выдержки до отбора, ч

Концентрация АТФ (Сі), мкмоль/см2

Средняя концентра­ция АТФ jja образ- . це (С»), - мкмоль/см2

Средняя,лаг-фаза, (Ь),ч

Концентрация АТФ максимальная сред­няя (Стах). мкмоль/см2

1

2

3

4

...

і

1

2

3

q














ГОСТ 9.049—91 С. 13








ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

  1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Министерством авиационной промышленности

РАЗРАБОТЧИКИ

В.Н. Кириллов, канд. техн, цаук (руководитель темы); В.Ф. Беренсон, канд. техн, наук; Ю.Ф. Крашаков, канд. техн, наук; В.Б. Скрибачилин, канд. техн, наук; С.А. Семенов, канд. техн, наук; Б.А. Поповкин, д-р хим. наук; Н.Н. Угарова, д-р хим. наук; Л.Ю. Бровко, канд. хим. наук; А.В. Полякова; И.Г Иванова; Е.М. Пониткова