Результаты испытаний записывают в протокол по п. 1.7.4.Оценка грибостойкости материала по степени развития плесневых грибов
Метод |
Степень развития плесневых грибов |
Оценка материала |
|
|
ГОСТ 9.049 |
ИСО 846 |
|
1 |
0 1, 2 3, 4, 5 |
|
Материал не является питательной средой (нейтрален или фунгистатичен) Материал содержит питательные вещества, которые обеспечивают незначительное развитие грибов Материал содержит достаточное количество питательных веществ благоприятствующих развитию грибов |
2 |
0 1, 2, 3 4, 5 |
0 1 2, 3 |
Материал не является питательной средой для грибов и грибоустойчив при наличии минеральных загрязнений Материал с держит питательные вещества или загрязнен в такой степени, что это способствует лишь незначительному развитию грибов Материал не обладает сопротивлением к поражению плесневыми грибами и содержит питательные вещества, способствующие развитию грибов при наличии минеральных загрязнений |
3 |
0 0 (образец . ингибиров 1 2—5 |
0 0 + зона ания, мм) 1 2—5 |
Сильный фунгистатический эффект Сильное влияние фунгицидного эффекта из-за диффундирования вещества в питательную среду Слабая фунгицидность Фунгицидный эффект отсутствует |
ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Грибостойкость материала обозначают индексом ПГ (плесневые грибы) с трехзначным числовым значением в правом нижнем углу, где последовательно фиксируют баллы, полученные при испытаниях методами І, 2, 3.
Например, характеристику грибостойкости пресс-материала К- 124—38 записывают К-124—38 ПГ123» гДе
— грибостойкость материала по методу 1;
— грибостойкость материала по методу 2;
— грибостойкость материала по методу 3.
Если испытания не проводят по одному из перечисленных методов, то в обозначении вместо балла ставят знак X, например ПГіхз-
Характеристику грибостойкости после предварительного старения обозначают знаком С, например ПГС233.
Характеристику грибостойкости материала, приведенную в п.
вносят во вводную часть НТД на материал.
ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ
Требования безопасности — по ГОСТ 9.048.
ПРИЛОЖЕНИЕ
Рекомендуемое
БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД ОЦЕНКИ РАЗВИТИЯ ПЛЕСНЕВЫХ
ГРИБОВ НА ПОЛИМЕРНЫХ МАТЕРИАЛАХ
Метод распространяется на полимерные материалы (пластмассы, компаунды, резины, клеи, герметики) и их компоненты (полимеры, пластификаторы, наполнители, стабилизаторы, красители, пигменты и т.п.) и позволяет количественно определить степень развития плесневых грибов (далее — грибов) по методам Г, 2, 3 настоящего стандарта.
Сущность метода заключается в получении зависимости количественного показателя развития грибов (концентрации внутриклеточной аденозии-5’-трифосфорной кислоты динатриевой соли (АТФ) на поверхности материала) от времени их культивирования на полимерном материале с последующим определением грибостойкости по кинетическим параметрам развития грибов.
Отбор образцов
Отбор образцов — по п. 1.2.1 настоящего стандарта.
Количество образцов на один отбор рассчитывают по ГОСТ 9.707, приложение 3.
Если относительная ошибка и вероятность попадания среднего арифметического значения показателя развития грибов в доверительный интервал не заданы, количество проб на один отбор должно быть не менее семи.
Аппаратура, материалы, реактивы
Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 1.4.1 настоящего стандарта.
Люминомер ЛБ-ЗП, 8702, 8703, 8705, 8707, БХЛ-06. Допускается использовать другие приборы аналогичного назначения, обеспечивающие измерение световых потоков от 10s1 до 108 квант/с, в области спектра 400—600 нм.
Весы для статического взвешивания по ГОСТ 23676.. Термостат, обеспечивающий температуру нагрева до 200 *С.
Холодильник бытовой электрический по ГОСТ 16317.
Дозаторы для отбора проб 0,01; 0,02; 0,1 см3.
Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.
Колбы цилиндрические мензурные вместимостью до 25 см3 по ГОСТ 1770.
Пипетки вместимостью 1, 10 см3 по ГОСТ 29169.
Аденозин-5’ -трифосфорной кислоты динатриевая соль, 3-водная (АТФ).
Биолюминесцентный АТФ реагент иммолюм,
Подготовка к испытаниям
Образцы подготавливают к испытаниям по пп. 1.5.1—1.5.6 настоящего стандарта.
Готовят раствор АТФ 1 ммоль/дм3: 13,8 мт АТФ помещают в мерную колбу вместимостью 25 см3, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают до полного' растворения. Раствор АТФ 1 ммоль/дм3 разливают по 1 см3 и хранят при температуре минус 20 °С. В замороженном виде раствор АТФ допускается хранить не более 3 мес.
Готовят стандартный раствор АТФ 10 мк? -ль/дм3: порцию раствора АТФ 1 ммоль/дм3 (по п. 3.2) размораживают, отбирают с * омощью дозатора 0,1 см3 раствора и помещают его в пробирку, содержащую 10 см3 дистиллированной воды. Стандартный раствор АТФ готовят непосредственно перед применением-
Готовят к употреблению биолюминесцентный АТФ-реагент иммолюм. В емкость, содержащую АТФ-реагента иммолюм на 10 анализов, добавляют 10 см3 дистиллированной воды, суспензию тщательно перемешивают и оставляют стоять при температуре (25+10) ’С 2 ч. После этого реагент готов к использованию и может храниться в виде суспензии 7—Ю сут в холодильнике при температуре 4 °С.
Проведение испытаний
Заражение и выдерживание образцов — по пп. 1.6.1—1.6.7.
Отбор образцов для количественного определения показателя развития грибов на материале проводят с периодичностью один раз в сутки. Количество отборов должно быть не менее семи.
Определение показателя развития грибов прекращают, если концентрация АТФ в последующем отборе не увеличивается по сравнению с предыдущим. Максимальная продолжительность выдержки в условиях-по п. 1.6.1—1.6.7 настоящего стандарта — не более 56 сут.-
Готовят экстракт АТФ из биомассы, образовавшейся на образце. Для этого образец помещают в колбу или чашку Петри, добавляют 0,0005—0,002 дм3 диметилсульфоксида (количество фиксируют), чтобы полностью покрыть его поверхность, интенсивно перемешивают 2—3 мин и оставляют стоять при температуре (25±10) °С не менее 3 ч.
Измеряют интенсивность люминесценции. Для этого в кювету люминометра пипеткой вносят 0,9 см3 суспензии биолюминесцентного АТФ — реагента иммолюм (п. 3.4), предварительно тщательно ее перемешав. Кювету помещают в кюветное 12отделение люминометра И измеряют фоновое свечение /фон» затем в ту же кювету вносят дозатором 0,01—0,1 см3 экстракта АТФ (и. 4.4) и измеряют интенсивность свечения образца 7обр. Затем в ту же кювету вносят дозатЬром 0,01—0,02 см3 стандартного раствора ДТФ (п. 3.3) и измеряют интенсивность свечения 7СТ-
Обработка результатов
Концентрацию АТФ (Сі), мкмоль/см2, в образце вычисляют по формуле
„ /обр- /фон Иг Из <0
Ci~ f ‘ pi ' Сст ‘ Si ’
• ст *обр 'I ’
где Сст — концентрация стандартного раствора АТФ, равная 10 мкмоль/дм3;
И. — объем экстракта АТФ, добавленного при измерении интенсивности з
■ люминесценции, см ;
Уг' — объем стандартного раствора АТФ, добавленного при измерении з интенсивности люминесценции, см ;
V*3 — объем диметилсульфоксида, используемый для экстракции, см3;
St — площадь образца; см2;
і — порядковый номер образца в отборе, і - 1, 2, 3 ... /.
Определяют экспериментальную среднюю концентрацию АТФ (Сп) в каждом из отборов.
Данные испытаний заносят в протокол (таблица).
Лаг — фазу (Li) устанавливают по промежутку времени до появления Сі, отличной от 0.
Определяют среднюю лаг-фазу (L) и заносят в протокол.
Если разность среднего с минимальным или максимальным значениями экспериментально полученных лат-фаз превышает 50 %, определяют грибостойкость на новой серии образцов.
Стойкость полимерных материалов к воздействию грибов определяют по параметрам L, Ki, Стах кинетического уравнения, описывающего изменение Сп,
— _ Стах (2)
" " 1 + Кг { exp (-Ах (тп- Е) ]) ’
где Сп — средняя концентрация АТФ, мкмоль/см2;
Стах — максимальная средняя концентрация АТФ, мкмоль/см2;
Т — средняя экспериментально полученная лаг-фаза;
in. — продолжительность выдержки, после которой произведен отбор, ч;
А1 — коэффициент, характеризующий удельную скорость развития грибов на материале ч’1;
Кг — коэффициент, характеризующий способность споры развиваться на материале при данных условиях;
п — порядковый номер отбора (• 1, 2, ... , q).
Методом наименьших квадратов вычисляют коэффициенты Xi и Кг по формулам:
9
Кх =
V / « (Стах- С„ А —• А (Стах ~ Сп
q 2, (Ти- Ь)л1п = - 2, (Тя“ £)"2/ ,Пг
и . 1 ''Я / и и ж 1 и ж 1 >
(3)
92 (*»" L)" "
п-1
- Я _ 1 2 (*я“ L)n
_Я » 1
іще q — число отборов.
Определенные по пп. 5.5 коэффициенты Кх и Кг подставляют в формулу (2) и находят расчетные значения Сп(расч)-
Рассчитывают среднее квадратическое отклонение (а) экспериментально полученных значений Сп от расчетных по формуле
(Си — СП(расч))2
Е
<5>
сли среди экспериментальных значений имеются (?я, которые не попадают в интервал 2а (lCn — С^л(расч) I s 2о ), то их исключают из данных эксперимента и коэффициенты ЛГ1 и Кг вновь определяют по п. 5.5 для оставшихся точек. Затем рассчитывают значение а и снова исключают экспериментальные точки, не входящие в интервал 2<7 . Расчет проводят до тех пор, пока все оставшиеся экспериментальные точки будут попадать в интервал 2сг при условии, что их количество должно быть не менее пяти. Если экспериментальные данные не удовлетворяют этому требованию, испытания повторяют.Оставшиеся для расчета экспериментальные-значения Си, Сти и полученные по п. 5.5 коэффициенты Кх и Кг подставляют в форму (2) и рассчитывают продолжительность лаг-фазы (£(расч))-
Ч ем ниже значение £(расч) и выше значения и Кх, тем менее стоек полимерный материал к воздействию микроскопических грибов.
Таблица
ПРОТОКОЛ
испытаний грибостойкости полимерного материала
Наименование, марка материала
Завод-изготовитель
НТД, по которому выпускается
Номер отбора |
Продолжительность выдержки до отбора, ч |
Концентрация АТФ (Сі), мкмоль/см2 |
Средняя концентрация АТФ jja образ- . це (С»), - мкмоль/см2 |
Средняя,лаг-фаза, (Ь),ч |
Концентрация АТФ максимальная средняя (Стах). мкмоль/см2 |
|||||
1 |
2 |
3 |
4 |
... |
і |
|||||
1 2 3 q |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ГОСТ 9.049—91 С. 13
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Министерством авиационной промышленности
РАЗРАБОТЧИКИ
В.Н. Кириллов, канд. техн, цаук (руководитель темы); В.Ф. Беренсон, канд. техн, наук; Ю.Ф. Крашаков, канд. техн, наук; В.Б. Скрибачилин, канд. техн, наук; С.А. Семенов, канд. техн, наук; Б.А. Поповкин, д-р хим. наук; Н.Н. Угарова, д-р хим. наук; Л.Ю. Бровко, канд. хим. наук; А.В. Полякова; И.Г Иванова; Е.М. Пониткова