ГОСТ 9225-84* Молоко и молочные продукты. Методы микробиологического анализа Стр. 1 из 16.



ГОСТ 9225-84

межгосударственный стандарт

МОЛОКО И МОЛОЧНЫЕ ПРОДУКТЫ

МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА

Издание официальное

БЗ 4-98



ИПК ИЗДАТЕЛЬСТВО СТАНДАРТОВ
Москв

а


У

Группа Н19

ДК 637.12.04/.07:576.8:006.354

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

МОЛОКО И МОЛОЧНЫЕ ПРОДУКТЫ

М

ГОСТ
9225-84

етоды микробиологического анализа

Milk and milk products.

Methods of microbiological analysis

ОКСТУ 9209

Дата введения 01.01.86

Настоящий стандарт распространяется на молоко и молочные продукты (кроме детских) и уста­навливает методы микробиологического анализа.

(Измененная редакция, Изм. № 2).

  1. МЕТОДЫ ОТБОРА ПРОБ

    1. Правила приемки и общие правила отбора проб — по ГОСТ 26809 и ГОСТ 13928.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

  1. Пробы пастеризованного молока и молочных продуктов для микробиологических анализов отбирают до отбора проб для физико-химических и органолептических анализов.

  2. Пробы для микробиологических анализов отбирают в стерильную посуду с помощью сте­рильных приспособлений.

  3. Отбор проб и перемешивание продукта перед отбором производят отборником, черпаком, ложкой, металлической трубкой, щупом, шпателем или другим соответствующим приспособлением, которые каждый раз перед использованием должны быть простерилизованы фламбированием или в автоклаве.

При отборе проб сырого молока для определения редуктазы допускается обработка металличес­кой трубки или пробника пропариванием, кипячением или хлорированием с последующим ополаски­ванием питьевой водой.

(Измененная редакция, Изм. № 2).

  1. Отбор проб продуктов для микробиологического анализа

    1. Молоко заготовляемое

Объединенную пробу объемом 500 см3 составляют из точечных проб, отобранных из каждой фляги или цистерны после органолептической оценки молока и рассортировки его по кислотности предельным методом по ГОСТ 3624. Для проведения редуктазной пробы и пробы на наличие ингиби­рующих веществ из объединенной пробы молока выделяют пробу объемом 50—60 см3.

(Измененная редакция, Изм. № 2).

  1. Молоко и сливки пастеризованные, сметана в транс­портной таре

От продукции, попавшей в выборку после тщательного перемешивания стерильной мутовкой или черпаком, отбирают 50—60 см3 продукта в стерильную посуду и закрывают стерильной пробкой.

П

Издание официальное

ерепечатка воспрещена

© Издательство стандартов, 1984

© Издательство стандартов, 1999 Переиздание с Изменениями

ГОСТ 9225-84 С. 2

  1. Мороженое в транспортной таре

От продукции, попавшей в выборку, стерильной ложкой снимают верхний слой толщиной не менее 2,5 см, после чего стерильным щупом или ложкой отбирают пробу массой 40—50 г в стерильную посуду и закрывают стерильной пробкой.

  1. Творог и творожные изделия

От продукции, попавшей в выборку в потребительской таре, отбирают для анализа 15—20 г (включая и поверхностный слой). Отобранную пробу помещают в стерильную посуду, которую закры­вают стерильной пробкой.

В продукции, попавшей в выборку в транспортной таре, перед отбором пробы верхний слой продукта зачищают. Пробу отбирают стерильным щупом на расстоянии 3—5 см от края, направляя щуп наклонно к противоположной стороне и опуская на 3/4 его длины. Из столбика продукта на щупе отбирают стерильным шпателем 15—20 г творога или творожных изделий и помещают в стерильную посуду, которую закрывают стерильной пробкой.

  1. Масло

От продукции, попавшей в выборку в потребительской таре, отбирают для анализа стерильным шпателем 15—20 г (включая поверхностный слой). Отобранную пробу помещают в стерильную посуду, которую закрывают стерильной пробкой.

От продукции, попавшей в выборку в транспортной таре, пробу отбирают стерильным щупом на расстоянии 3—5 см от края, направляя щуп к противоположной стороне и опуская на 3/4 его длины.

Из столбика масла на щупе отбирают стерильным шпателем 15—20 г масла и помещают в сте­рильную посуду. Оставшийся после отбора пробы столбик масла на щупе возвращают на прежнее место, а поверхность масла аккуратно заделывают.

  1. Сыр

В продукции, попавшей в выборку, в намеченном месте отбора пробы поверхность сыра прижи­гают нагретым ножом или шпателем. Стерильный щуп вводят наклонно в середину головки на 3/4 его длины. Из столбика сыра на щупе отбирают стерильным шпателем 15—20 г сыра и помещают в стерильную посуду с притертой или ватной пробкой или стерильную чашку Петри с крышкой. Верх­нюю часть столбика сыра на щупе возвращают на прежнее место, поверхность сыра заливают подогре­тым до (110± 10) °С парафином или оплавляют нагретой металлической пластиной.

  1. Сыр плавленый

От продукции, попавшей в выборку, из разных мест сыра (включая поверхностный слой) профламбированным ланцетом отбирают на анализ 15—20 г продукта и помещают в стерильную посуду.

  1. Сгущенные молочные консервы в транспортной таре

От продукции, попавшей в выборку, стерильной трубкой или черпаком отбирают на анализ 40—50 г продукта в стерильную посуду.

  1. Сухие молочные продукты в транспортной таре

От продукции, попавшей в выборку, отбирают на анализ 40—50 г продукта в стерильную посуду с плотно закрывающейся крышкой или пробкой.

  1. Молоко сгущенное стерилизованное

В продукции, попавшей в выборку, анализы проводят отдельно в каждой банке.

  1. От молокаи сливок пастеризованных, сметаны, мороженого, сгущенных молочных кон­сервов, сухих молочных продуктов, попавших в выборку в потребительской таре, используют в каче­стве пробы для анализа по одной единице потребительской тары с продукцией.

(Введен дополнительно, Изм. № 1).

  1. Посуду с пробой или пробу в потребительской таре снабжают этикеткой, на которой указы­вают:

номер пробы;

наименование и сорт продукта (при наличии);

номер и объем партии;

день и час отбора пробы;

должность и подпись лица, отобравшего пробу;

обозначение нормативного документа, по которой вырабатывался продукт.

  1. Пробу, отправляемую в лабораторию вне данного предприятия, пломбируют или опечатыва­ют и снабжают этикеткой, на которой указывают:

С. 3 ГОСТ 9225-84

номер пробы;

наименование предприятия-изготовителя;

наименование и сорт продукта (при наличии);

номер и объем партии;

дату и час выработки продукта с момента окончания технологического процесса;

дату и час отбора проб;

должность и подпись лица, отобравшего пробу;

объем необходимых анализов;

обозначение нормативного документа, по которой вырабатывался продукт.

    1. Микробиологические анализы продукта проводят не более чем через 4 ч с момента отбора проб.

    2. Пробы должны храниться и транспортироваться до начала исследования в условиях, обеспе­чивающих температуру продуктов не выше 6 °С, не допуская подмораживания, а для мороженого — не выше минус 2 °С.

  1. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

Весы лабораторные 2-го класса точности по ГОСТ 24104 поверочная цена деления не более 0,001 г для взвешивания реактивов.

Весы лабораторные 4-го класса точности по ГОСТ 24104 поверочная цена деления не более 0,05 г для приготовления навесок исследуемых образцов.

Термометры стеклянные жидкостные (нертутные), диапазон измерения 0—100 °С, цена деления шкалы 1 °С по ГОСТ 28498.

Термостат, позволяющий поддерживать температуру 15—55 °С с отклонением от заданной темпе­ратуры + 1 °С.

Стерилизатор паровой медицинский по ГОСТ 19569 или автоклав горизонтальный.

Шкаф сушильный, позволяющий поддерживать температуру (160±5) °С.

Анализатор потенциометрический для контроля pH, диапазон измерения pH 3—8, погрешность измерения pH ±0,05 по ГОСТ 19881.

Редуктазник, позволяющий поддерживать температуру 25—55 °С.

Баня водяная.

Прибор для счета колоний бактерий.

Микроскоп световой биологический по нормативному документу или других аналогичных марок.

Плитка электрическая по ГОСТ 14919.

Спиртовка по ГОСТ 23932.

Петля бактериологическая.

Лупа складная карманная по ГОСТ 25706.

Пробки резиновые конусные по нормативному документу.

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

Пергамент по ГОСТ 1341.

Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.

Кастрюли разные по ГОСТ 17151.

Пробойник.

Чашки Петри по ГОСТ 25336.

Стекла предметные для микропрепаратов по ГОСТ 9284.

Бюретки исполнения 1, 2, 3-го классов точности, вместимостью 5, 10, 50 см3, цена деления 0,1 см3.

Пипетки исполнения 1, 4, 5, 6, 7; 1 и 2-го классов точности, вместимостью I, 2, 5 и 10 см3.

Стаканчики для взвешивания (бюксы) типов СВ и СН по ГОСТ 25336.

Колбы исполнения 2, вместимостью 50, 100, 200, 500, 1000 см3 2-го класса точности по ГОСТ 1770.

Цилиндры исполнения 1 и 2, вместимостью 50, 100 см3 по ГОСТ 1770.

Поплавки стеклянные.

Пробирки типов Ш, П2, диаметром 16 мм, высотой 150 мм и диаметром 21 мм, высотой 200 мм по ГОСТ 25336.

ГОСТ 9225-84 С. 4

Ступки лабораторные фарфоровые по ГОСТ 9147.

Ланцет.

Натрий лимоннокислый 5,5-водный по ГОСТ 22280.

Натрий хлористый по ГОСТ 4233.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328.

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, раствор массовой концентрации 10 г/дм3.

Натрий двууглекислый по ГОСТ 2156, раствор массовой концентрации 100 г/дм3.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962 и спирт этиловый ректификованный техни­ческий по ГОСТ 18300, 96%-ный раствор.

Масло иммерсионное для микроскопии по ГОСТ 13739.

Калий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 4198.

Кислота соляная по ГОСТ 3118.

Магний сернокислый по ГОСТ 4523.

Кристаллический фиолетовый по нормативному документу, раствор массовой концентрации 1,0 г/дм3.

Метиленовый голубой, индикатор по нормативному документу или аналогичный производства Индии.

Резазурино-натриевая соль по нормативному документу или резазурин в таблетках производства ГДР.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Вода питьевая по ГОСТ 2874.

Агар микробиологический по ГОСТ 17206.

Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей по ГОСТ 13805.

Желчь бычья и других сельскохозяйственных животных (нативная) по нормативному документу.

Среда сухая Кесслер по нормативному документу.

Среда агаровая модифицированная для определения общего количества бактерий в молоке и молочных продуктах по нормативному документу.

Лактоза по нормативному документу.

Порошок сычужный по нормативному документу.

Бумажки индикаторные по нормативному документу или зарубежного производства.

Индикатор универсальный.

(Измененная редакция, Изм. № 1, 2, 3, 4).

  1. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

    1. Подготовка посуды и материалов

      1. Всю новую посуду, предназначенную для бактериологических работ, кипятят в подкислен­ной воде (раствор соляной кислоты с объемной долей 1—2%) в течение 15 мин и затем ополаскивают дистиллированной водой.

Вымытую посуду стерилизуют в сушильном шкафу при (160±5) °С в течение 2 ч или в автоклаве при (121±2)°С в течение (30±1) мин с последующим подсушиванием.

Чашки Петри, пипетки стерилизуют завернутыми в бумагу или в металлических пеналах. В конец пипетки предварительно вкладывают кусочек ваты. Резиновые пробки стерилизуют в автоклаве завер­нутыми в бумагу. При отсутствии аппаратуры для стерилизации (для определения редуктазы, бродиль­ной и сычужно-бродильной проб) посуду, пипетки и пробы непосредственно перед испытанием ки­пятят в дистиллированной воде или конденсате не менее 30 мин. Стерильную посуду хранят в плотно закрывающихся шкафах или ящиках с крышками.

  1. Приготовление питательных сред и реактивов

    1. Приготовление раствора хлористого натрия

Состав:

хлористый натрий — 8,5 г;

питьевая вода — 1000 см3.

В 1000 см3 питьевой воды растворяют 8,5 г хлористого натрия, разливают раствор в чистые пробирки диаметром 21 мм по 10 см3, а в колбы — по 93 см3 и стерилизуют при (121±2) °С в течение (20±1)мин. После стерилизации в пробирках должно остаться 9 см3 раствора хлористого 2-2501

С. 5 ГОСТ 9225-84

натрия, а в колбах 90 см3 (количество, которое необходимо для приготовления разведений из посевного материала).

  1. П р и г о т о в л е н и е концентрированного раствора фосфат­ного буфера

Состав:

однозамещенный фосфорнокислый кал™ — 34 г;

дистиллированная вода — 1000 см3.

В 500 см3 дистиллированной воды растворяют 34 г однозамещенного фосфорнокислого калия. Устанавливают pH 7,2 раствором гидроокисй натрия и добавляют дистиллированной воды в мерную колбу до 1000 см3.

  1. П р и г о т о в л е н и е разбавленного раствора фосфатного буфера

1,25 см3 концентрированного раствора фосфатного буфера вносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем до метки дистиллир<5Ванн°й водой, разливают в пробирки по 10 см3 и колбы по 93 см3 и стерилизуют при (121±2) °С в течение (15±1) мин и используют для приготовления