ПРИЛОЖЕНИЕ 2
Обязательное
ТЕХНИКА ПОСТАНОВКИ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ПРОБЫ
Количество белых мышей, необходимых для постановки биологической пробы, при постановке защитного теста, проведении реакции нейтрализации и при типировании ботулинических токсинов с разведенными типоспецифическими сыворотками, равняется числу разведений исходной жидкости (с учетом использования при низком титре ботулинического токсина исходной жидкости без разведения), умноженному на количество типов моновалентных двух-, трех- или поливалентных сывороток, применяемых для постановки защитного теста или реакции нейтрализации и типирования ботулинических токсинов в исследуемом продукте, и умноженному на количество мышей в каждом варианте опыта - обычно на две особи.
По клеткам или банкам рассаживают белых мышей, помещая не более двадцати мышей одного пола в каждую клетку или банку. Во время постановки опытов перераспределения мышей по клеткам не допускается.
При проведении биологической пробы надевают резиновые перчатки, указательным и большим пальцами левой руки захватывают кожу мыши на затылке, а хвост и левую заднюю лапу удерживают между ладонью, четвертым и пятым пальцами. При этом мышь держат головой вниз так, чтобы кишечник сместился книзу от места укола. Место укола обрабатывают спиртом. Правой рукой вводят иглу шприца в горизонтальном направлении между кожей и мышцами с левой стороны в задней трети живота, затем иглу слегка поворачивают в вертикальном направлении и осторожным движением продвигают вперед. Момент проникновения иглы в брюшную полость ощущают по исчезающему под рукой сопротивлению. После проникновения иглы в брюшную полость большим пальцем правой руки медленно нажимают поршень шприца и, следя за градуировкой на цилиндре, вводят определенное количество жидкости в брюшную полость. Затем иглу вынимают, животное метят и помещают в клетку для наблюдения.
Допускается ставить биологическую пробу на белых мышах с помощником, который фиксирует животных.
Мышей метят путем окрашивания их шерсти по определенной схеме раствором карболового фуксина, бриллиантового зеленого, раствором пикриновой кислоты либо фломастерами.
Одним цветом, основным (желательно красным) метят мышей с 1 по 9 номер.
Двумя цветами - красным и дополнительным - желтым или зеленым - метят мышей с двузначными номерами: с 10 до 99 включительно, причем десятки обозначают дополнительным цветом, а единицы - основным.
В зависимости от места окраски, пятна краски (желательно фуксина) соответствуют следующим условным номерам:
на левой передней лапе - 1, на левом боку - 2, на левой задней лапе - 3, на голове - 4, на спине - 5, у основания хвоста - 6, на правой передней лапе - 7, на правом боку - 8, на правой задней лапе - 9.
При комбинированной окраске двумя цветами разных мест получают любое двузначное число.
ПРИЛОЖЕНИЕ 3
Справочное
ПОДГОТОВКА ШПРИЦЕВ И ИГЛ К ИСПЫТАНИЮ
При отсутствии стерильных шприцев непосредственно перед использованием шприцы кипятят. Для этого в дистиллированную или мягкую воду (без примеси соды) при комнатной температуре погружают раздельно поршень и цилиндр. Воду постепенно доводят до кипения и кипятят детали шприцев не менее 20 мин.
Иглы кипятят отдельно. В канал иглы вводят мандрен, погружают ее в 0,3-1%-ный водный раствор углекислого натрия, постепенно доводят до кипения и кипятят не менее 20 мин. Прокипяченные детали шприца и иглы охлаждают до комнатной температуры и собирают.
ПРИЛОЖЕНИЕ 4
Справочное
ОТБОР ПРОБ ОТ ОСТАТКОВ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ
БОТУЛИНИЧЕСКИХ ТОКСИНОВ И C.botulinum
Пробы остатков продуктов, послуживших причиной отравления, отбирают в соответствии с указаниями органов здравоохранения. Если масса остатков продукта меньше 80-100 г, то от продукта отбирают 1-3 навески, массой не менее 1 г (см ); если количество продукта, отобранного для исследования, составляет 1 г (см ) и меньше, то из него готовят одну навеску.
Текст документа сверен по:
официальное издание
Консервы. Методы микробиологического анализа:
Сб. ГОСТов. - М.: ИПК Издательство стандартов, 2002
