Страница 2: ДСТУ 4514:2006. Риба, інші водні живі ресурси та харчова продукція з них (33904)

6 МЕТОД ВІДБИРАННЯ І ГОТУВАННЯ ПРОБ

Відбирання та готування проб до аналізування треба здійснювати згідно з ГОСТ 7631, ГОСТ 7636, ГОСТ 8756.0.

З об’єднаної лабораторної проби для випробовування треба відібрати дві однакові наважки масою від 10 г до 20 г, які зважені з абсолютною похибкою не більше ніж 0,01 г.

7 АПАРАТУРА, МАТЕРІАЛИ, РЕАКТИВИ

Перелік апаратури, матеріалів і реактивів, які потрібно використовувати під час випробовування:

• газовий хроматограф з детектором за захопленням електронів будь-якого типу;
• магнітна мішалка ММ-5 згідно з чинними нормативними документами;
• апарат для струшування рідин згідно з чинними нормативними документами;
• ваги лабораторні загальної призначеності з метрологічними характеристиками згідно з ГОСТ 24104 з найбільшою границею зважування 200 г не нижче 2-го класу точності;
• ваги лабораторні загальної призначеності з метрологічними характеристиками згідно з ГОСТ 24104 з найбільшою границею зважування 500 г 4-го класу точності;
• машина електромеханічна кухонна типу КМ-1 згідно з чинними нормативними документами;
• штатив лабораторний ШЛ згідно з чинними нормативними документами;
• ротаційний випарник згідно з чинними нормативними документами;
• шафа витяжна згідно з чинними нормативними документами;
• шафа сушильна лабораторна, що забезпечує підтримування заданого температурного режиму від 50 оС до 200 оС за відхилів температури від номінального значення, що не перевищують ± 5 оС згідно з чинними нормативними документами;
• колби мірні 2-25-2, 2-50-2, 2-100-2, 2-500-2 згідно з ГОСТ 1770;
• колба Кн-1-250-34/35 ТС згідно з ГОСТ 25336;
• колба К-1-250-29/32 ТС згідно з ГОСТ 25336;
• циліндри мірні 1-10, 1-100 чи 3-100 згідно з ГОСТ 1770;
• лійки В-100-150 ХС, У-36-38 ХС, ВД-1-25 ХС, ВД-1-50 ХС згідно з ГОСТ 25336;
• лійка Бюхнера 3 згідно з ГОСТ 9147;
• ступка порцелянова 5 згідно з ГОСТ 9147;
• товкачик порцеляновий 3 згідно з ГОСТ 9147;
• склянки Н-1-50 ТС, Н-1-100 ТС чи Н-1-150 ТС згідно з ГОСТ 25336;
• лійки лабораторні згідно з ГОСТ 25336;
• піпетки мірні 4-2-1, 5-2-2, 7-2-5, 7-2-10 згідно з ГОСТ 29227 та ГОСТ 25336;
• молоток дерев’яний згідно з чинними нормативними документами;
• пробірки П-4-5-14/23 ХС, П-4-10-14/23 ХС згідно з ГОСТ 25336;
• шпатель 3 згідно з ГОСТ 9147;
• ложка 2 згідно з ГОСТ 9147;
• колба П-2-500-34 ТХС згідно з ГОСТ 25336;
• скальпель згідно з ГОСТ 21240;
• мікрошприц МШ-10М згідно з чинними нормативними документами;
• папір фільтрувальний лабораторний згідно з ГОСТ 12026;
• вода здистильована згідно з ГОСТ 6709;
• дефлегматор 250-19/26-29/32 згідно з ГОСТ 25336;
• вугілля активоване згідно з чинними нормативними документами;
• палички скляні згідно з ГОСТ 21400;
• холодильник ХПТ-1-400-14/23 ХС, ХПТ-1-100-14/23 згідно з ГОСТ 25336;
• силікагель марки АСКГ згідно з ГОСТ 3956 з розміром зерен від 2 мм до 5 мм, висушений у сушильній шафі за температури від 150 оС до 180 оС протягом 4 год;
• спирт етиловий ректифікований згідно з ГОСТ 18300;
• натрій сірчанокислий безводний, х. ч. згідно з ГОСТ 4166, висушений у сушильній шафі за температури 150 оС протягом 5 год;
• калій марганцевокислий, х. ч. згідно з ГОСТ 20490, концентрований розчин у сірчаній кислоті з масовою часткою 10 %;
• калію гідроксид, х. ч. гранульований згідно з ГОСТ 24363;
• гексан, х. ч. згідно з чинними нормативними документами;
• бензол, х. ч. згідно з ГОСТ 5955;
• хлороформ, х. ч. згідно з ГОСТ 20015;
• ацетон, х. ч. згідно з ГОСТ 2603;
• ефір петролейний згідно з чинними нормативними документами з температурою кипіння від 40 оС до 60 оС;
• ефір діетиловий згідно з чинними нормативними документами;
• нітрат срібла, х. ч. згідно з ГОСТ 1277;
• кислота сірчана, х. ч. згідно з ГОСТ 4204;
• натрій вуглекислий, х. ч. згідно з ГОСТ 83;
• вата згідно з ГОСТ 5556, знежирена: промита діетиловим ефіром протягом 5 хв і висушена у витяжній шафі до постійної ваги;
• державні стандартні зразки складу розчинів хлорорганічних пестицидів (ХОП) представлені сумішшю ХОП-5 (4,4'ДДТ, 4,4'ДДД, 4,4'ДДЕ, гептахлор, у-ГХЦГ) — тип ДСЗУ 042.66-97; a-ГХЦГ — тип ДСЗУ 042.5-96; р-ГХЦГ — тип ДСЗУ 042.6-96, затверджені Держспоживстандартом України і внесені до державного реєстру засобів вимірювальної техніки (розділ «Стандартні зразки»);
• чистий і сертифікований стандартний розчин арохлору з концентрацією 0,100 мг/см3;
• хроматон N-AW-DMCS, розмір часток від 0,16 мм до 0,20 мм, просочений 5 % SE-30;
• колонка газохроматографічна спіралеподібна довжиною від 1,5 м до 2 м і діаметром від 2 мм до 4 мм;
• груша гумова згідно з чинними нормативними документами;
• колонки хроматографічні скляні довжиною 450 мм і діаметром 20 мм;
• натрій вуглекислий кислий, х. ч., згідно з ГОСТ 4201, розчин з концентрацією 0,5 моль/дм3 (0,5 Н);
• азот газоподібний і рідкий особливої чистоти згідно з ГОСТ 9293;
• папір індикаторний універсальний згідно з чинними нормативними документами.

Дозволено використовувати інші види апаратури, реактивів і матеріалів з технічними і метрологічними характеристиками не нижче зазначених.

8 ГОТУВАННЯ ДО ВИПРОБОВУВАННЯ

1. Готування лабораторного посуду

Новий чи сильно забруднений лабораторний посуд після миття у розчині мийного засобу треба промити водопровідною водою й ополоснути здистильованою водою. Безпосередньо перед використовуванням висушений посуд треба додатково ополоснути перегнаним органічним розчинником.

1. Готування розчинників

Перед початком роботи потрібно перевірити чистоту розчинників, для чого концентрують 100 см3 розчинника до об’єму 1 см3 і 5 мкл концентрованого розчинника вводять у випарник хроматографа.

За наявності незначних за величиною піків (сигналів) менше ніж 10 % від висоти максимального піка стандартного розчину на хроматограмі розчинника, додаткового очищення такі розчинники не потребують, але потрібно їх враховувати під час опрацьовування результатів аналізування. За наявності піків висотою більше ніж 10 % від висоти максимального піка стандартного розчину треба провести додаткове очищення (перегонку розчинників).

Очищення гексану, бензолу, петролейного ефіру проводять перегонкою у присутності нітрату срібла з масовою концентрацією 81,1 г/дм3 чи активованого вугілля з масовою концентрацією 1 г/дм3, відбираючи відігнані фракції гексану за температури від 60 оС до 70 оС, бензолу — за температури від 78 оС до 81 оС, петролейного ефіру — за температури від 40 оС до 60 оС. Гексан потрібно звільнити від залишків ароматичних сполук, для чого послідовно промивають концентрованою сірчаною кислотою, концентрованим розчином перманганату калію у сірчаній кислоті, а потім водою, після чого зневоднюють прожареним натрієм сірчанокислим.

За потреби ацетон очищують руйнуванням усіх домішок перегонкою у присутності перманганату калію з концентрацією 10 г/дм3 і натрію вуглекислого з концентрацією 2 г/дм3 за температури 56 оС і зневоднюють прожареним натрієм сірчанокислим.

Хлороформ промивають 5 разів здистильованою водою у співвідношенні 2:1, а потім зневоднюють прожареним натрієм сірчанокислим, переганяють за температури 61 оС.

Ефір діетиловий обробляють перманганатом калію і гідроксидом калію з масовою концентрацією 5 г/дм3 і 10 г/дм3 відповідно протягом 24 год, а потім переганяють за температури 35,6 оС.

Очищені розчинники зберігають у темній склянці з притертою пробкою у прохолодному місці не більше 6 тижнів.

1. Перевіряння чистоти силікагелю АСКГ

Силікагель промивають 50 см3 петролейного ефіру, який після промивання видаляють. Наступну порцію розчинника пропускають через силікагель, віджимають грушею й випаровують до об’єму 5 см3. Із одержаного розчину відбирають шприцом 5 мкл упареного екстракту і вводять у випарник хроматографа. Появлення на хроматограмі додаткового піка свідчить про те, що силікагель забруднений.

Очищення силікагелю треба проводити бензолом чи сумішшю бензолу і петролейного ефіру у співвідношенні 1:1, для чого силікагель заливають бензолом чи сумішшю і витримують добу. Потім бензол або суміш відганяють під вакуумом на ротаційному випарнику, а силікагель висушують у витяжній шафі за температури 20 оС. Зберігають очищений силікагель без доступу повітря у скляній колбі з притертою пробкою.

Усі органічні розчинники, що залишаються після випаровування проб, і промивання колонок, можуть бути використані вдруге після перегонки у присутності активованого вугілля чи нітрату срібла з масовою концентрацією 1 г/дм3.

1. Готування стандартних розчинів
2. Для готування основного стандартного розчину ХОП треба використовувати державні стандартні зразки складу розчинів хлорорганічних пестицидів: ХОП-5, a-ГХЦГ, р-ГХЦГ.

Суміш ХОП-5 складається із:

• 4,4'ДДТ масовою концентрацією 0,100 мг/см3;
• 4,4'ДДЕ масовою концентрацією 0,05 мг/см3;
• 4,4'ДДД масовою концентрацією 0,100 мг/см3;
• g-ГХЦГ масовою концентрацією 0,020 мг/см3;
• гептахлору масовою концентрацією 0,020 мг/см3;
• a-ГХЦГ масовою концентрацією 0,100 мг/см3;
• Р-ГХЦГ масовою концентрацією 0,100 мг/см3.

У мірну колбу місткістю 25 см3 поміщають 2,5 см3 стандартного розчину ХОП-5, 2,5 см3 стандартного розчину a-ГХЦГ, 2,5 см3 стандартного розчину р-ГХЦГ і доводять об’єм розчину до позначки очищеним гексаном за постійного помішування.

Отриманий основний стандартний розчин містить:

4,4'ДДЕ — 0,005 мг/см3;гептахлору — 0,002мг/см3;

4,4'ДДД — 0,010 мг/см3;a-ГХЦГ— 0,010мг/см3;

4,4'ДДТ —0,010 мг/см3;р-ГХЦГ— 0,010мг/см3;

g-ГХЦГ— 0,002мг/см3.

1. Готування робочого стандартного розчину ХОП

У мірну колбу місткістю 100 см3 поміщають 2 см3 основного стандартного розчину ХОП і доводять об’єм розчину до позначки очищеним гексаном за постійного помішування.

Отриманий робочий розчин містить:

4,4'ДДЕ — 0,100 мкг/см3 ;гептахлор — 0,04 мкг/см3;

4,4'ДДД — 0,200 мкг/см3;a-ГХЦГ— 0,200мкг/см3;

4,4'ДДТ — 0,200 мкг/см3;р-ГХЦГ— 0,200мкг/см3;

g-ГХЦГ— 0,04 мкг/см3.

1. Готування розведень робочого розчину ХОП

Відповідно до чутливості газового хроматографа, очікуваного вмісту хлорорганічних пестицидів п,п'ДДТ, п,п'ДДЕ, п,п'ДДД, a-ГХЦГ, р-ГХЦГ, g-ГХЦГ, гептахлору і поліхлорованих біфенілів арохлору у досліджуваному зразку використовують розведення робочих розчинів ХОП і ПХБ.

1. Розчин № 1

У мірну колбу місткістю 50 см3 поміщають 35 см3 робочого розчину і додають 15 см3 очищеного гексану, ретельно перемішують і доводять об’єм розчину до позначки очищеним гексаном. Отриманий розчин № 1 містить 0,028 нг g-ГХЦГ у 1 мкл, а у 5 мкл — 0,14 нг.

1. Розчин № 2

У мірну колбу місткістю 50 см3 поміщають 20 см3 робочого розчину і додають 25 см3 очищеного гексану, ретельно перемішують і доводять об’єм розчину до позначки очищеним гексаном. Отриманий розчин № 2 містить 0,02 нг g-ГХЦГ у 1 мкл, а у 5 мкл — 0,1 нг.

1. Розчин № 3

У мірну колбу місткістю 50 см3 поміщають 15 см3 робочого розчину і додають 35 см3 очищеного гексану, ретельно перемішують і доводять об’єм розчину до позначки очищеним гексаном.

Отриманий розчин № 3 містить 0,12 нг g-ГХЦГ у 1 мкл, а у 5 мкл — 0,6 нг.

1. Готування основного стандартного розчину ПХБ

У мірну колбу місткістю 25 см3 поміщають 2,5 см3 розчину ГСО арохлору з концентрацією 0,100 мг/см3 і доводять об’єм розчину до позначки очищеним гексаном за постійного перемішування. Отриманий основний стандартний розчин ПХБ містить арохлору 10 мкг у 1 см3.

1. Готування робочого стандартного розчину ПХБ

Робочий стандартний розчин ПХБ готують розведенням основного стандартного розчину ПХБ очищеним гексаном у співвідношенні 1:10. Отриманий робочий стандартний розчин ПХБ містить 1 мкг арохлору в 1 см3.

1. Основні і робочі стандартні розчини у колбах з щільно притертими пробками потрібно зберігати у холодильнику за температури 4 оС без доступу світла терміном, який не перевищує терміну придатності екземпляра ДСЗУ відповідно до паспортів ДСЗУ та інструкцій щодо їхнього застосовування.

Після готування стандартних розчинів колби з розчином зважують на вагах лабораторних загальної призначеності 4 кл. з точністю до другого десяткового знака і отримані значення маси записують у робочому журналі.

Перед використовуванням колбу зі стандартним розчином треба витримати за температури 20 оС протягом 30 хв, після чого зважити до другого десяткового знака і, за потреби, масу колби зі стандартним розчином довести очищеним гексаном до маси, зазначеної у робочому журналі. Відібравши необхідну кількість робочого стандартного розчину, колбу з розчином потрібно знову зважити і її масу зафіксувати у робочому журналі.

1. Готування хроматографа до роботи

Готування приладу до роботи, його вмикання і виведення на робочий режим потрібно здійснювати згідно з технічними інструкціями до газового хроматографа.

9 ВИЗНАЧАННЯ ХОП І ПХБ У ЗРАЗКАХ ПРОБ ПРОДУКЦІЇ

1. Етапи визначання ХОП і ПХБ

Визначання вмісту ХОП і ПХБ складається з трьох послідовних етапів: екстракції, очищення екстрактів і газохроматографічного аналізування. За одночасної присутності у пробі ХОП і ПХБ для їх поділяння проводять лужне дегідрохлорування.

1. Екстракція

Залежно від жирності і вологості випробної продукції екстракцію проб виконують різними методами.

1. Екстракція проб із сировини жирної і середньої жирності (більше ніж 3 % жирності)

Наважку подрібненого досліджуваного зразка масою від 10 г до 20 г (10 г беруть з високожир- ного матеріалу), зважену з похибкою не більше ніж 0,01 г, розтирають у порцеляновій ступці, додаючи безводний натрій сірчанокислий до одержання розсипчастої маси.

Розсипчасту масу зразка з натрієм сірчанокислим переносять у конічну колбу об’ємом 250 см3, додають гексан чи інший розчинник (хлороформ або петролейний ефір) у такій кількості, щоб маса зразка була повністю покрита розчинником, закривають колбу притертою пробкою і екстрагують протягом 30 хв на апараті для струшування. Колбу з екстракційною сумішшю залишають на 12 год.