Примечание 4 — Международно признанный калибровочный материал (например, международный стандарт ВОЗ) может быть использован как калибратор только в том случае, если материал был разработан на основе четко определенной величины, связанной с предполагаемым клиническим применением, и если приписанное значение материала имеет неопределенность, приемлемую для калибровки рутинных измерительных систем. Некоторые международные стандарты ВОЗ были первоначально предназначены служить калибраторами для процедур измерения in vivo, основанных на биологической активности (особенно для терапевтических целей). Использование таких материалов для калибровки иммунопроцедур измерений in vitro может вызвать серьезные проблемы (см. 4.3).
Примечание 5 — Методика выполнения измерений, результаты которых метрологически не прослеживаются до единиц СИ, может предъявлять требования к оборудованию, для которого необходимо такое прослеживание, например при определении объема, времени, массы, давления.
4.3 Требования к установлению метрологической прослеживаемости
При установлении метрологической прослеживаемости должны быть учтены следующие возможные ошибки:
Неудовлетворительное определение аналита в пробах человеческого происхождения.
Технические проблемы при реализации единицы количества вещества — моля — как ультра- чистого материала данного химического соединения (см. также 4.2.6, примечание 2).
Неоднородность (гетерогенность) аналита в калибраторе (изоформы, производные), затрудняющая его физико-химическое описание, например в случае ферментов, антител, гликопротеинов.
Методики выполнения измерений, имеющие различную специфичность и избирательность в отношении аналита в данном калибраторе.
Примечание 1 — Эта проблема касается ряда методик выполнения измерений в данной иерархии калибровки, включая рутинную методику, а также совокупности двух и более рутинных методике использованием одного и того же калибратора продукта производителя, что может нарушить коммутабельность калибратора.
Примечание 2 — Эта проблема типична для иммунопроцедур, где антитела, используемые в различных методиках, могут иметь разную реактивность по отношению к эпитопу (эпитопам) антигена аналита или антигены, используемые как реагенты, могут иметь разную реактивность по отношению к антителу аналита.
Измеряемые пробы человеческого происхождения, имеющие аналиты с индивидуальной различной микрогетерогенностью по отношению к калибратору, например: измерение концентрации (общего) белка в сыворотке по биуретовой реакции, калиброванной по раствору альбумина, иммунохи- мическое измерение концентрации ферритина в сыворотках с различной микрогетерогенностью аналита, где индивидуальные изоформы распознаются в разной степени различными моноклональными антителами.
Пробы человеческого происхождения, имеющие матрицы, отличающиеся от матрицы калибратора.
д) Калибраторы с несоответствующим «суррогатным аналитом».
h) Физическая или химическая модификация при измерении пробы, включая аналит, например денатурация, см. (ISO Guide 35, пункт 9.3.1).
4.3.2 Когда ряд нативных проб человеческого происхождения используют как вторичные калибраторы [см. 4.2.2, перечисление е)] или альтернативно какрабочие калибраторы производителя [(см. 4.2.2, перечисление д)] для подтверждения коммутабельности на таком уровне через соответствие состава аналита и матрицы, пробы этого ряда должны охватывать измерительный интервал соответственно его диапазону на практике при измерении в рутинных пробах.
Примечание 1 — Если аналит в пробе увеличен или уменьшен, должна быть подтверждена коммута- бельность модифицированной пробы.
Для каждой пробы значение и неопределенность должны быть приписаны методикой выполнения измерений более высокого уровня. Ряд проб человеческого происхождения должны быть использованы для калибровки (аттестации) выбранной производителем методики выполнения измерений [см. 4.2.2, перечисление f)] или установленной производителем методики выполнения измерений [см. 4.2.2, перечисление h)], которую затем используют для приписывания значения (значений) рабочему калибратору (калибраторам) производителя [см. 4.2.2, перечисление д)] или калибратору (калибраторам), изготовленному производителем [см. 4.2.2, перечисление і)].
Если ряд проб человеческого происхождения используют в качестве вторичного калибратора [см. 4.2.2, перечисление е)] для калибровки (аттестации) избранной производителем методики выполнения измерений [см. 4.2.2, перечисление f)] и рабочего калибратора производителя [см. 4.2.2 д)], то для обеспечения метрологической прослеживаемости эти пробы должны быть также измерены соответственно выбранной методикой выполнения измерений более высокого уровня (например, методикой выполнения измерений, использованной для приписывания значений ряду проб человеческого проис- хожден ия). Значения, полученные при этих измерениях, должны быть указаны в технической документации на данную продукцию.
Примечание 2 — Результаты этих измерений должны облегчить оценку аналитической специфичности методики выполнения измерений, выбранной производителем, и обеспечить оценку коммутабельности рабочего калибратора.
Примечание 3 — Рабочий калибратор производителя [см. 4.2.2, перечисление д)] может быть предназначен для того, чтобы представить партию изготовленного производителем калибратора [или контрольного материала правильности]. В этом случае требуется прямое измерение измеряемой величины в соответствии с выбранной методикой более высокого уровня только единственного образца рабочего калибратора из партии.
Если ряд человеческих проб используют в качестве рабочего калибратора [4.2.2, перечисление д)] для калибровки установленной производителем методики выполнения измерений [4.2.2, перечисление h)] и изготовленного производителем калибратора [4.2.2, перечисление І)] (или контрольного материала правильности), то для обеспечения метрологической прослеживаемости эти пробы также должны быть измерены выбранной методикой выполнения измерений более высокого уровня (например, методикой выполнения измерений, использованной для приписывания значений ряду проб человеческого проис- хожден ия). Значения, полученные при этих измерениях, должны быть указаны в технической документации на данную продукцию.
Примечание 4 — Когда партии изготовленного производителем калибратора (или контрольного материала правильности) выпускают последовательно, согласно стабильной формуле и производственному процессу, а гомогенность и стабильность демонстрируют от партии к партии, прямое измерение значения измеряемой величины в калибраторе продукта (или контрольного материала правильности) выбранной методикой выполнения измерений более высокого уровня должно быть проведено только в отношении одной представительной партии. Для последующих партий изготовленного производителем калибратора (или контрольного материала правильности) значение измеряемой величины, определенное методикой выполнения измерений более высокого уровня, может быть оценено на основе предшествующего опыта. Метрологическая прослеживаемость до калибраторов и методик более высокого уровня, указанная для представительной партии изготовленного производителем калибратора (или контрольного материала правильности), применима и для любой последующей партии.
Для подтверждения коммутабельности соответствующих калибраторов (см. 7.2) и метрологической прослеживаемости приписанных им значений (см. 7.3—7.7) не должна быть применена одна и та же серия нативных человеческих проб.
4.4 Предназначение стандартных образцов
Калибраторы (см. 3.7), имеющие приписанное значение с известной неопределенностью измерения и применяемые для калибровки измерительной системы, обеспечивают метрологическую прослеживаемость результата, полученного данной системой.
Контрольные материалы правильности (см. 3.32), имеющие приписанное значение, метрологически прослеживаемое до методики выполнения измерений или калибровочного материала более высокого метрологического уровня, применяют для оценки смещения измерения. Значение контрольного материала должно иметь неопределенность измерения, не превышающую неопределенность изготовленного производителем калибратора.
Стандартный образец в определенной измерительной системе может быть использован либо только как калибратор, либо только как контрольный материал.
5 Протоколы переноса калибровки
Доступность и структура
Протокол переноса калибровки предназначен для приписывания (с применением стандартных образцов и референтных методик выполнения измерений высокого метрологического уровня) значения, связанного с данной величиной, данному стандартному образцу. Описание протокола переноса калибровки должно включать в себя соответственно:
основания для выбора стандартных образцов и их стабильность и коммутабельность;
основания для выбора методики выполнения измерений, включая оборудование;
соответствующие статистические методы;
оценку влияния матрицы и любых модификаций аналита.
Примечание 1 — Одной из проблем, отмечаемых как производителями, таки потребителями медицинских изделий диагностики in vitro, является отсутствие стандартных образцов, как аттестованных так и неаттесто- ванных, проявляющих в данной измерительной системе свойства аналита и матрицы, подобные тем, какие им присущи в рутинных человеческих пробах (кровь, плазма, сыворотка, моча и т. д.) (см. 4.3). Кроме того, для многих измеряемых величин нет референтных методик выполнения измерений.
Примечание 2 — Когда у используемого стандартного образца на данном уровне иерархии калибровки отсутствует коммутабельность, допустимо использование ряда проб человеческого происхождения, охватывающих весь измерительный диапазон (см. 4.3.2).
Примечание 3 — Окончательный выбор метрологических уровней в данном случае зависит от приемлемости неопределенности измерения конечного результата, наличия методик, калибраторов, технологий и экономических возможностей. Эти факторы обусловливают тенденцию к необходимости международного признания и метрологической прослеживаемости до единиц СИ.
Примечание 4 — Типичный пример протокола переноса калибровки с иерархиями, избранными из полного ряда методик выполнения измерений и калибраторов, перечисленных и в общем виде описанных в 4.2.2 и на рисунке 1, приведен в 5.2—5.6 и на связанных с ними рисунках 2—6.
Иерархия калибровки при наличии первичной референтной методики выполнения измерений и первичного калибратора (калибраторов), обеспечивающих метрологическую прослеживаемость до единиц СИ
В принципе, к таким измеримым величинам, как электролиты, метаболиты, глюкоза, холестерин, стероидные гормоны и некоторые тироидные гормоны, а также лекарства, применима иерархия калибровки по рисунку 2:
Первичная референтная методика выполнения измерений [см. 4.2.2, перечисление Ь)].
Пример 1—Для кортизола в плазме крови: гравиметрия, комбинированная с оценкой степени чистоты химическими методами.
Первичный калибратор [см. 4.2.2, перечисление с)].
Пример 2 — Холестерин как CRM 911b из Национального института стандартов и технологий (NIST, Gaithersburg, MD, USA); массовая доля 0,998 ± 0,001, где «чистота и оцененная неопределенность основана на научном суждении и оценке многочисленными аналитическими тестами, примененными к этому аттестованному стандартному образцу в процессе сертификации. Приведенная неопределенность составляет примерно два стандартных отклонения относительно сертифицированного значения». (Значение 0,001 является расширенной неопределенностью с фактором покрытия к - 2 при уровне доверительной вероятности примерно 0,95).
Вторичная референтная методика выполнения измерений [см. 4.2.2, перечисление d)].
Пример 3—Для концентрации кортизола в плазме: изотопное разбавление — газовая хроматография — масс-спектрометрия (ИР-ГХ/МС).
Материал
Калибровка Приписывание значения
Методика
Внедрение
а
а При утверждении международными научными/медицинскими организациями, например Международной федерацией клинической химии и лабораторной медицины (МФКХЛМ) и Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ).
ь Калибратором может быть материал с матрицей, напоминающей матрицу проб человеческого происхождения, которые должны быть измерены с помощью процедуры измерений конечного потребителя.
Рисунок 2 — Выбранная иерархия калибровки и метрологическая прослеживаемость до единиц СИ
(см. 5.2 и рисунок 1)
Рабочий калибратор (калибраторы) производителя [см. 4.2.2, перечисление д)], определенный производителем и имеющий значение, приписанное путем:
либо гравиметрии, т. е. взвешиванием аналита в форме первичного калибратора и взвешиванием матрицы;
либо измерения, т. е. применением первичной или вторичной референтной методики выполнения измерений.
Установленная производителем методика выполнения измерений [см.4.2.2, перечисление h)].
Калибратор, изготовленный производителем [см.4.2.2, перечисление і)].
.3 Иерархия калибровки при наличии международно признанной референтной методики выполнения измерений (неявляющейся первичной) и международно признанного калибратора (калибраторов) без метрологической прослеживаемости до единиц СИ
Для видов измеримых величин с компонентами, подобными гемоглобину НЬА1с (в препарате), иерархия калибровки, в принципе, должна быть следующей (см. рисунок 3):
