ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
СОЮЗА ССР
ПЕПТОН СУХОЙ ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ
ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ
ТЕХНИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ
ГОСТ 13805—76
И
Цена 5 коп.
здание официальноеГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ
Москв
а
У
Группа Н18
ДК 547.984.3: 006.354Г
ГОСТ
13805-76
Взамен
ГОСТ 13805—68
ОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССРПЕПТОН СУХОЙ ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ
ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ
Технические условия
Dry fermentation pepton for bacteriological obgects.
Technical conditions
Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 29 апреля 19)76 г. № 1002 срок действия установлен
с 01.01. 1977 г. до 01.01. 1982 г.
Несоблюдение стандарта преследуется по закону
Настоящий стандарт распространяется на ферментативный пептон для бактериологических целей, получаемый из рубцов и летошки крупного рогатого скота, овец и коз, а также из желудков свиней с использованием слизистой оболочки желудков и поджелудочной железы.
ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ
Ферментативный пептон для бактериологических целей должен изготавливаться в соответствии с требованиями настоящего стандарта по технологическим правилам, утвержденным в установленном порядке.
Ферментативный пептон для бактериологических целей по физико-химическим и биологическим показателям должен соответствовать требованиям и нормам, указанным в табл. 1.
Таблица 1
Наименование показателя |
Характеристика и норма |
Внешний ВИД |
Аморфный одно- |
Цвет |
родный порошок От белого до |
Запах |
желтого Характерный,, без |
|
гнилостного |
Издание официальное Перепечатка воспрещена
Переиздание. Апрель 1980 г.
© Издательство стандартов, 1981Продолжение табл. 1
Наименование показателя |
Характеристика и норма |
Концентрация водородных ионов (pH) |
61,5—7J0 |
Содержание нерастворимых примесей, %, не более |
1,0 |
Содержание влаги, %„ не более |
7,10 |
Содержание сульфированной золы, %, не более |
5J0 |
Содержание истинного пептона, %, не менее |
7l0j0 |
Содержание общего азота, %, не менее |
'1410 |
Содержание азота аминогрупп аминокислот и низших |
|
пептидов, %, не менее |
BjO |
Содержание свободного белка, оптическая плотность, |
|
не более |
Ці25 |
Содержание хлоридов в пересчете на хлор-ион, %, не |
|
более |
її, 0 |
Содержание солей тяжелых металлов |
Не допускается |
Наличие свободного индола |
То же |
Способность поддерживать рост микробов, оптичес- |
|
кая плотность, не менее |
Рост типичный |
Staphylococcus aereus «Лассманов» |
0,40 |
Escherichia coli штамм 675 |
'0;Э0 |
Streptococcus faecalis штамм 6783 |
0,30 |
2. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ
Ферментативный пептон для бактериологических целей принимают сериями. Под серией следует понимать количество пептона, изготовленное из одноименного вида сырья за один технологический цикл, получившее свой номер и оформленное одним документом о качестве.
Для контроля качества ферментативного пептона от каждой серии препарата отбирают выборку в размере:
от серии до 100 единиц фасовки — 3%;
от серии свыше 100 единиц фасовки — 1%.
Выборку отбирают из единиц фасовки, взятых из разных мест серии.
При неудовлетворительных результатах испытаний хотя бы по одному показателю по нему проводят повторные испытания на удвоенном количестве проб, отобранных от той же серии пептона.
Результаты испытаний распространяются на всю серию.
. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ
Метод отбора проб
Содержимое отобранных единиц фасовки тщательно перемешивают и отбирают общую пробу массой не более 500 г.
Из общей пробы ферментативного пептона выделяют четыре пробы для анализа массой не менее 100 г каждая. Отобранные пробы помещают в чистые сухие банки с притертыми пробками. Пробки заливают парафином или смолой.
На банки с пробами ферментативного пептона наклеивают этикетки с указанием:
наименования предприятия-изготовителя;
наименования препарата;
даты изготовления;
номера серии;
даты взятия пробы;
обозначения настоящего стандарта.
Две пробы используют для анализа, а две — оставляют в архиве государственного контролера в течение 4 лет.
Внешний вид, цвет и запах пептона определяют органолептически.
О п р е д е л ен и е ' концентрации водородных ионов (pH)
Аппаратура и реактивы
Для проведения испытания применяют:
рН-метр;
весы лабораторные;
колбу стеклянную по ГОСТ 1770—74;
цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770—74;
фильтры бумажные;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709—72.
Проведение испытания
Навеску пептона массой 1 г, взвешенную с погрешностью не более 0,02 г, помещают в колбу и растворяют в 99 мл прокипяченной и охлажденной дистиллированной воды. В растворе допускается незначительный осадок, который отфильтровывают через бумажный фильтр. В прозрачном фильтрате 1%-ного раствора пептона определяют концентрацию водородных ионов (РН) в соответствии с правилами, прилагаемыми к рН-метру. ■
О п р е д е л е н и е содержания нерастворимых примесей
Аппаратура, материалы и реактивы
Для проведения испытания применяют:
весы аналитические;
шкаф сушильный на 105°С;
стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148—70;
эксикатор по ГОСТ 6371—73;
цилиндр стеклянный мерный вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770—74;
пробки ватно-марлевые;
фильтры бумажные;
натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328—77, 0,1 н. раствор;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709—72.
Проведение испытания
Навеску пептона массой 5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в колбу, добавляют 95 мл дистиллированной воды и тщательно перемешивают, добиваясь максимального растворения пептона. Приготовленный 5%-ный раствор пептона фильтруют через бумажный фильтр, предварительно высушенный в бюксе до постоянной массы и взвешенный с погрешностью не более 0,0002 г. По окончании фильтрования раствора пептона фильтр промывают 50 мл дистиллированной воды, помещают в бюксу и высушивают до постоянной массы при 105°С. Первое взвешивание производят после высушивания фильтра в течение 3 ч, последующие взвешивания — после 30 мин высушивания. Высушивание считают законченным, если уменьшение массы при двух последующих взвешиваниях не превышает 0,0002 г.
Профильтрованный раствор 5%-ного пептона разбавляют в 5 раз дистиллированной водой. Полученный 1%-ный раствор пептона доводят 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия до pH 7,7 и кипятят в течение 5 мин. Раствор должен остаться прозрачным, без образования осадка.
После кипячения 1%-ный раствор пептона разливают в пробирки по 7—8 мл, закрывают ватными пробками и выдерживают в автоклаве в течение 30 мин при 0,15 МПа. Раствор должен остаться прозрачным, без образования осадка.
Обработка результатов
Содержание нерастворимых примесей (X) в процентах вычисляют по формуле
у_ (т2—/пр -<11010
где ш— масса пептона, взятая для приготовления 100 г 5%-ного раствора пептона, г;
mi — масса бюксы с фильтром до фильтрования, г;
т2— масса бюксы и фильтра с осадком после высушивания, г.
За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,1%.
О пределение содержания влаги
Аппаратура
Для проведения испытания применяют:
весы аналитические;
шкаф сушильный лабораторный на 105°С;
стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148—70;
эксикатор по ГОСТ 6371—73.
Проведение испытания
Навеску пептона массой 1,5—2,0 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в бюксу, предварительно высушенную до постоянной массы. Бюксу с навеской помещают в сушильный шкаф и сушат до постоянной массы при 105°С.
Первое взвешивание производят через 1 ч, последующие — через 30 мин высушивания. Высушивание считают законченным, если уменьшение массы при двух последующих взвешиваниях не превышает 0,0002 г.
Обработка результатов
Содержание влаги (XJ в процентах вычисляют по формуле
% _ (m—mi) • 'ІіОіО
1m ’
где m — масса навески пептона до высушивания, г;
гп — масса навески пептона после высушивания, г.
За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%.
Определение содержания сульфированной золы
Аппаратура и реактивы
Для проведения испытания применяют:
весы аналитические;
элемент нагрева (плитку, горелку);
печь муфельную;
тигли фарфоровые по ГОСТ 9147—73;
кислоту серную по ГОСТ 4204—77, концентрированную.
Проведение испытания
Навеску пептона массой 1,0—1,5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в тигель, предварительно прокаленный до постоянной массы. В тигель с навеской пептона добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты и осторожно нагревают смесь на плитке до удаления избытка серной кислоты, после чего тигель переносят в муфельную печь и продолжают озоление при температуре 500—600°С до постоянной массы золы.
Обработка результатов
Содержание сульфированной золы (Х2) в процентах вычисляется по формуле
у _ /П] • дюю
где m — масса пептона до прокаливания, г; ml— масса золы после прокаливания, г.
За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%.
О п р е д е л е н и е содержания истинного пептона
Аппаратура и реактивы.
Для проведения испытания применяют:
фотоэлектроколориметр или спектрофотометр;
пипетки вместимостью 1 и 5 мл;
пробирки стеклянные по ГОСТ 10515—75;
воронки стеклянные; ,
фильтры бумажные;
натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328—77, 10%-ный раствор;
медь сернокислую по ГОСТ 4165—78, 2%-ный раствор;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709—72.
Подготовка к испытанию
Построение градуировочного графика
По оси абсцисс откладывают концентрацию истинного пептона в растворе, по оси ординат — величину оптической плотности (Е) этого раствора согласно данным, приведенным в табл. 2. Приведенные в табл. 2 величины оптической плотности (Е) получены измерением на фотоэлектроколориметре при длине волны 540 нм растворов специально приготовленной серии пептона, содержащей минимум свободного белка и аминокислот и максимум пептидов.
Таблица 2 |
|
Концентрация истинного пептона |
Оптическая плотность (Е) раствора |
в растворе, % |
0,)5і0і
05 0.117
0,560
0,280
0,190
Проведение испытания
Истинный пептон определяют в 0,5%-ном растворе испытуемого пептона. Для этого 5%-ный раствор пептона, приготовленный в соответствии с п. 3.4.2, разбавляют водой в 10 раз (0,5 мл 5%-ного раствора пептона и 4,5 мл дистиллированной воды).
В пробирку, содержащую 5 мл 0,5%-ного раствора испытуемого пептона, добавляют 0,5 мл 10%-ного раствора гидрата окиси натрия и 0,5 мл 2%-ного раствора сернокислой меди. Одновременно ставят контроль, для чего в пробирку наливают 5 мл воды, 0,5 мл 10%-ного раствора гидрата окиси натрия и 0,5 мл 2%-ного раствора сернокислой меди.
Смесь в пробирках хорошо перемешивают и через 2 мин фильтруют через бумажные фильтры. Интенсивность окраски измеряют на фотоэдектроколориметре при длине волн 540—560 нм или на спектрофотометре при длине волны 540 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм. Концентрацию истинного пептона в пробе определяют по градуировочному графику.