---

Разборная доска-поднос из дюралюминия с вырезом в одной из боковых стенок.

Отобранную по ГОСТ 13979.0 среднюю пробу рапсового жмыха перед измельчением раскладывают тонким слоем на разборной доске и внимательно просматривают на присутствие камешков, стекла, земли.

Весы лабораторные по ГОСТ 24104 2-го класса точности с

Система NormaCS® www.normacs.ru 12.06.2007 19:27:08наибольшим пределом взвешивания 200 г или другие весы того же класса точности;

весы лабораторные по ГОСТ 24104 4-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 или 1000 г или другие весы того же класса точности;

центрифуга лабораторная;

набор ареометров;

стаканы химические Н-1—50 ТСХ по ГОСТ 25336;

колбы конические Кн-1—250—29/32 ТСХ по ГОСТ 25336; колбы мерные 2—50 {250, 500, 1000) — 2 по ГОСТ 1770; воронка делительная ВД-2—50—14/23 ХС по ГОСТ 25336;

бюретка 1—2(3)—2—5—0,02 по ГОСТ 29251;

пипетки (1—5)—1(2) —1(2)—5 по ГОСТ 29227;

пипетки 2—2—50 по ГОСТ 29169;

ступка фарфоровая с пестиком;

чашки Петри;

воронка В-36(56)—80 ХС по ГОСТ 25336;

фильтр фКП-40 пор 100 ХС по ГОСТ 25336;

цилиндры 1(3)—25(50) по ГОСТ 1770;

шарики стеклянные диаметром 5 мм;

вата стеклянная;

фильтры бумажные с красной полосой по ТУ 6—09—1676;

бумага фильтровальная по ГОСТ 12026;

вода дистиллированная по ГОСТ 6709;

натрий щавелевокислый, х.ч. по ГОСТ 5839, псрекристаллизо- И Н Ы Ml j

кислота серная, х.ч. или ч.д.а. по ГОСТ 4204;

калия гидроокись, ч. или ч.д.а., х.ч. по ГОСТ 24363;

натрия гидроокись, ч. или ч.д.а., х.ч. по ГОСТ 4328;

аммиак водный, ч. или ч.д.а., х.ч. по ГОСТ 3760;

калий марганцевокислый, ч. или ч.д.а., х.ч. по ГОСТ 20490;

натрий фтористый, ч. или ч.д.а. по ГОСТ 4463;

спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300; спирт амиловый, ч. или ч.д.а. по ТУ 6—09—3467;

pH-бумага универсальная индикаторная по ТУ 6—09—1181; асбест;

семена белой горчицы, имеющие всхожесть не менее 80 %, по ГОСТ 9159;

семена рапса по ГОСТ 10583.

Установка для определения изотиоцианатов: колбонагреватель;

колба круглодонная К-1—500—29/32 ТХС по ГОСТ 25336; переходная трубка;

холодильник ХПТ-1—300(400) —14/23 ХС по ГОСТ 25336;ГОСТ 1104S—95

насадка;

колбы конические КН-1“250—29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

рованной водой до плотности:

70 %-й — 867 кг/м³;

90 %-й - 817 кг/м³.

(результат взвешивания записывают до второго десятичного знака), растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и доводят объем раствора дистиллированной водой до 100 см³.

устанавливают массовую концентрацию раствора по щавелевокислому натрию, как описано ниже.

Для определения массовой концентрации марганцевокис­лого калия на весах 2-го класса точности (результат взвешивания записывают до четвептого десятичного знака), берут навеску пеос- Система NormaCS® www.normacs.ru 12.06.2007 19:27:09кристаллизованного щавелевокислого натрия массой 0,2 — 0,25 г в коническую колбу вместимостью 250 см*⁵. Навеску растворяют в 100 см* дистиллированной воды, нагретой до 60—80 °С, добавляют 10 см*⁵ раствора серной кислоты (НзО + H2SO4 1:1) и медленно титруют раствором марганцевокислого калия (с (КМпО₄) - 0,1 моль/дм*⁵ J до слабо-розового окрашивания, нс исчезающего в течение 1 мин. Поправку к массовой концентрации раствора КМпО₄(Ю рассчиты­вают по формуле

к — (1)

^Л" V • 0,0067 *

где т — масса щавелевокислого натрия, г;

V — объем раствора с (КМпО₄) 0,1 моль/дм³, пошедшего на титрование щавелевокислого натрия, см³;

‘ 0,0067 — масса щавелевокислого натрия, г, эквивалентная 1 см³ раствора с (КМпО₄) ^в 0,1 моль/дм³.

Для приготовления фермента используют семена белой горчицы. Перед приготовлением семена предварительно проверяют на всхо^ жесть. Для этого на дно чашки Петри помещают кусочек марли, на который, предварительно смочив его водой, кладут 10 шт. семян. Чашку Петри закрывают крышкой и оставляют при комнатной температуре. Через 72 ч подсчитывают количество проросших семян. Должно прорасти нс менее 80 % семян.

Для приготовления фермента на весах 4-го класса точности взвешивают (результат взвешивания записывают до второго десяти­чного знака) и переносят в колбу около 50 г измельченных семян белой горчицы, которые заливают 300 см³ охлажденной до плюс 4 °С дистиллированной водой, хорошо перемешивают и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч. Затем осадок отделяют центрифугированием в течение 20 мин при частоте вращения 60—70 с*¹ (3000—4000 об/мин). Надосадочную жидкость сливают в колбу и смешивают с 300 см*⁵ охлажденного до плюс 4 °С 90 %-го водного раствора этилового спирта. Смесь выдерживают в холодильнике при температуре плюс 4 °С 15 мин и центрифугируют в течение 30 мин при частоте вращения 60—70 с . После центрифугирования надоса­дочную жидкость сливают и удаляют, а выпавший белый осадок промывают 100 см*⁵ 70 %-го водного раствора этилового спирта (перемешиванием стеклянной палочкой) и вновь центрифугируют 20 мин при частоте вращения 60—70 с .

После центрифугирования надосадочную жидкость сливают и удаляют, а осадок переносят в колбу, заливают 50 см³ дистиллиро­ванной воды и настаивают 12 ч при температуре 18—20 *С; через 12 ч осадок отделяют либо фильтрацией через бумажный фильтр,

9

ГОСТ 11043—95

либо центрифугированием в течение 20 мин при частоте вращения 60—70 с"¹ и последующей декантацией водного раствора фермента. Раствор фермента хранят при температуре плюс 4 °С нс более двух недель.

При отсутствии белой горчицы вместо раствора фермента можно использовать семена рапса с известным содержанием изотиоцианатов в количестве 2,5 г, взвешенные на весах 2-го класса точности (результат взвешивания записывают до четвертого десятичного зна­ка).

Из средней пробы образца на весах 4-го класса точности взвешивают (результат взвешивания записывают до первого десяти­чного знака) 50—60 г жмыха, измельчают на лабораторной мельнице и просеивают через сито с отверстиями 0,25 мм до прохода 80% массы пробы через сито. В рапсовом жмыхе предварительно опре­деляют массовую долю влаги и летучих веществ и массовую долю сырого жира.

В круглодонную колбу вместимостью 500 см³ высыпают навеску измельченного рапсового жмыха массой около 5 г, взятую на весах 2-го класса точности (результат взвешивания записывают до четвер­того десятичного знака), К навеске рапсового жмыха добавляют 300 см³ дистиллированной воды, 1 г фтористого натрия, взятый на весах 2-го класса точности (с записью результата взвешивания до четвер­того десятичного знака), 20 см*⁵ этилового спирта и 5 см*⁵ раствора фермента или 2,5 г семян рапса с известным содержанием изотио­цианатов. Горло колбы плотно закрывают пробкой и проводят ферментативное расщепление тиоглюкозидов (которые могут сохра­ниться в неизменном виде) в течение 2—2,5 ч при температуре 18—22 С.

По окончании ферментирования колбу ставят на колбонагрсватель 7, укутывают асбестом и присоединяют к холодильнику 4 установки (рисунок I) с помощью переходной трубки 3.

При анализе рапсового жмыха в колбу 2 во избежание вспенивания и перебросов добавляют несколько стеклянных шариков и 0,5 cni амилового спирта.

К нижнему концу трубки холодильника 4 через насадку ^5 присоединяют последовательно две колбы вместимостью 250 см . приемную 6 и контрольную 7. В приемную колбу приливают 30 см , а в контрольную — 15 cm^j 10 %-го водного раствора аммиака.

На приемной колбе 6 делают отметку, соответствующую объему жидкости 200 см³. Концы присоединенных с помощью шлифов к

/ __ колбонагреиатсль; 2 — круглодонная колба; 3 — переходная трубка; 4 — хо­лодильник; 5 — насадка; 6 — приемная колба; 7 — контрольная колба

Рисунок I — Схема установки для определения изотиоцианатов колбам б и 7 трубок насадки 5 должны быть погружены в раствор аммиака.

Включают колбонагрсватсль и отгоняют около 170 см³ воды вместе с летучими изотиоцианатами в приемную колбу. Затем продолжают отгонку еще 2—3 мин.

Летучие изотиоцианаты в приемной колбе связываются с амми­аком с образованием нелетучих тиопроизводных.

По окончании отгонки отсоединяют вместе с насадкой приемную 6 и контрольную 7 колбы, а затем выключают колбонагрсватсль. Это необходимо для предотвращения обратного засасывания дистил­лята в холодильник 4 и реакционную колбу 2.

Холодильник 4 промывают 2—3 см³ дистиллированной воды, собирая промывные воды в приемную колбу 6,

Содержимое приемной и контрольной колб переносят в мерную колбу вместимостью 500 см³, приемную и контрольную колбы ополаскивают водой и промывные воды приливают в ту же мерную колбу. Доводят объем жидкости в мерной колбе дистиллированной

11ГОСТ 11048—95

водой до 500 см , тщательно перемешивают и используют для определения содержания изотиоцианатов.

Из мерной колбы отбирают 50 см³ дистиллята» вносят в коническую колбу вместимостью 250 см³ и добавляют 2,5 см³ концентрированной серной кислоты. Подготовленную пробу титруют водным раствором марганцовокислого калия (с (КМпО₄) - 0,1 моль/дм³) до появления слабо-розовой, не исчезающей в течение нескольких секунд, окраски,

28,29 * Vj > И_о * К (2)

^Х] = - (л/ТТгП '

где 28,29 = 0,002829 * 10⁴ (0,002829 — масса 3-бутанил-изотиоци- аната, г, эквивалентная 1 см³ раствора с (КМпО₄) ™ ^,1 моль/дм³;

|/j — объем раствора КМпО₄, пошедшего на титрование пробы, см³;

1^/₂ — объем дистиллята» взятого на титрование, см³;

Ц) — исходный объем дистиллята;

К — поправка концентрации раствора КМпО₄;

т — масса анализируемого образца, г;

Л/ — масличность анализируемого образца, %;

W — массовая доля влаги и летучих веществ в анализируемом образце, %.

Сначала рассчитывают массу изотиоцианатов Л, в граммах, содержащихся в навеске внесенных семян при фактической маслин- ности и влажности:

Р • Х_сл —

где Л — масса изотиоцианатов, содержащихся во внесенных семенах» г;

Р — масса семян, внесенных в опыт, г;

— массовая доля изотиоцианатов в семенах, использованных для анализа, %, рассчитанная при фактической масличности и влажности.