До початку сторінка 9 з 26
Критерії. У разі виділення з інкримінованих харчових продуктів ентеропатогенних ешеріхій (за результатами серологічної ідентифікації) та ентеротоксигенних ешеріхій (за визначенням ентеротоксигенності прямими чи опосередкованими методами) в кількості 102 КУО в 1г/см3 паралельно з виділенням аналогічного збудника з матеріалу від потерпілих, при наявності клінічних проявів, притаманних харчовим отруєнням та відповідних епідеміологічних даних, випадок слід розцінювати як харчову токсикоінфекцію, зумовлену слабовірулентними штамами ентеропатогенних або ентеротоксигенних ешеріхій.
В разі виділення з інкримінованих харчових продуктів Е.соІі з невизначеними серологічними або патогенетичними характеристиками в кількості 106 КУО в 1г/см3 або вищій за показник БГКП для даного продукту, при наявності клінічних проявів, притаманних харчовим отруєнням та відповідних епідеміологічних даних незалежно від виявлення аналогічних штамів Е.соІі в матеріалі від потерпілих, випадок слід розцінювати як харчову токсикоінфекцію, спричинену умовно-патогенними Е.соІі
На користь етіологічного значення ешерихій вагомим свідченням є позитивний результат аглютинації штамів, виділених у вогнищі з сироватками крові потерпілих (т. зв. аутовідаль).
12. БАКТЕРІЇ РОДІВ PROTEUS, MORGANELLA, PROVIDENCIA
12.1. Загальні положення
Бактерії родів Proteus, Morganella та Providencia представлені грамнегативними, безкапсульними, в основному, рухливими бактеріями, властивості яких відповідають загальній характеристиці родини Enterobacteriaceae. Вони добре ростуть на звичайних поживних середовищах, є факультативними анаеробами, не утворюють цитохромоксидази, ростуть у присутності КСN, дають позитивну реакцію MR і негативну реакцію VP, не ферментують лактозу, арабінозу, дульцит, не володіють декарбоксилазою лізину і дегідролазою аргініну, не утилізують малонат. Серед біохімічних властивостей бактерій вказаної групи особливо характерним являється дезамінування фенілаланіну, що відрізняє їх від ентеробактерій інших родів. Виражена гетерогенність бактерій цей групи проявляється у варіабельності їх по відношенню до ряду субстратів, зокрема до маніту, сахарози, адоніту, гліцерину, інозиту, мальтози, саліцину, сечовини, желатину, орнітину, утилізації цитрату у середовищі Сімонса. Ці властивості мають значення для внутрішньородової і внутрішньовидової диференціації. Біохімічна характеристика родів Proteus, Morganella, Providencia наведена в табл. 22.
Таблиця 22
Основні біохімічні відмінності родів Proteus, Morganella, Providencia
Тести
Proteus
Morganella
Providencia
Феномен справжнього роїння
+
-
-
Утворення індолу
-*
+
+*
Гідроліз желатини
+
-
-
Гідроліз сечовини
+
+**
+
Утворення сірководню
+***
-
-
Утворення кислоти з:
манози
-
-
+
ксилози
+
-
-
Умовні позначення: * – за виключенням P.vulgaris та М.heimbachae
** – за виключенням Providencia stuartii
*** – за виключенням P.myxofaciens
У етіології харчових токсикоінфекцій провідну роль грають бактерії роду Proteus. Захворювання можуть виникати при вживанні продуктів, рясно контамінованих цим збудником. Це можуть бути м'ясні вироби, особливо з рубаного м'яса, рибні блюда, овочеві салати та ін.
До роду Proteus відносяться бактерії, що крім перелічених властивостей, характерних для всієї групи Proteae, розріджують желатин, гідролізують сечовину, продукують сірководень, не ферментують маніт, інозит, сорбіт, арабінозу, рафінозу, звичайно не утворюють ацетилметилкарбінола і дають позитивну реакцію MR. У відношенні ферментації сахарози, саліцина й утилізації цитрату поводяться по-різному. На підставі розходжень по деяких ферментативних властивостях можлива диференціація роду Proteus на види: P.vulgaris, P.mirabilis, P.myxofaciens та P.penneri.
Характерним для бактерій роду Proteus є розлитий ріст (феномен роїння) на твердих агарових середовищах, як при (20-25) ºС так і при 37 ºС. Рідко зустрічаються і нерухомі варіанти (0-форми). Останніми дослідженнями встановлено, що до 25% ізолятів P.stuartii і до 40% штамів P.rettgeri можуть давати феномен роїння. Більшість штамів здатні до роїння після інкубації при 30 ºС або при зниженні щільності агару (1,3%). Для роїння провіденцій характерно утворення поліморфних структур (у вигляді дерев, протуберанців), але не класичних концентричних кіл.
У практичних лабораторіях для визначення належності виділених бактерій до роду Proteus та внутрішньородової диференціації достатньо використовувати обмежене число тестів (таблиця 23).
Таблиця 23
Мінімальний набір біохімічних тестів для віднесення виділеного штаму до роду Proteus
Тест або субстрат
Proteus
mirabilis
myxofaciens
penneri
vulgaris
Утворення індолу
-
-
-
+
Реакція VP
+
-
-
Цитрат Сімонса
+
-
(частіше-)
Утворення сірководню
+
-
(частіше-)
+
Орнітиндекарбоксилаза
+
-
-
-
Ферментація з утворенням кислоти:
мальтози
-
+
+
+
сахарози
(частіше-)
+
+
+
ксилози
+
-
+
+
Бактерії родів Morganella та Providencia також можуть бути причиною харчових токсикоінфекцій. Їх біохімічні характеристики, що використовуються для внутрішньовидової диференціації представлені в таблицях 24 і 25.
Таблиця 24
Біохімічні характеристики підвидів Morganella morganii
Біологічна група
Підтип
Лізин декарбокси-лаза
Орнітин декарбокси-лаза
Чутливість до тетрацикліну
A
morganii
-
+
B
morganii
+
+
+
C
morganii
-
-
-
D
morganii
+
-
+
E
sibonii
+
+
-
F
sibonii
+
-
-
G
sibonii
-
+
+
Таблиця 25
Біохімічні властивості бактерій роду Providencia
Тест або субстрат
P.alcalifa-ciens
P.heimba-chae
P.rettgeri
P.rusti-gianii
P.stua-rtii
Утворення індолу
+
-
+
+
+
Цитрат Сіменса
+
-
+
(частіше-)
+
Ферментація:
глюкози(газ)
(частіше+)
-
-
-
арабітола (кислота)
-
+
+
-
-
галактози (кислота)
-
+
+
+
+
інозита (кислота)
-
+
-
+
маніта (кислота)
-
-
+
-
-
рамнози (кислота)
-
+
-
-
трегалози (кислота)
-
-
-
-
+
Антигенна структура бактерій родів Proteus, Morganella, Providencia подібна до антигенної структури інших бактерій родини Enterobacteriaceae. Вона формується із соматичних О- і джгутикових Н-антигенів, у деяких випадках у протеїв визначаються поверхневі соматичні К-антигени. О-антигени термостабільні, представляють собою ліпополісахардно-білкові комплекси; Н-антигени термолабільні і мають білкову природу. У 1950 році створена загальна антигенно-діагностична схема для P.vulgaris, P.mirabilis. В ній представлені 49 серологічних О-груп і 19 Н-антигенів. Було також встановлено, що О- і Н-антигени можуть мати мозаїчну будову. У 1967 році створена антигено-діагностична схема для M.morganii, в яку увійшли 32 О-групи та 25 Н-антигенів, відмічена мозаїчність О1 групи, у зв’язку з чим вона поділена на 3 підгрупи. У окремих штамів виявлені термолабільні К-антигени. Існує також антигено-діагностична схема для P.rettgeri.
Серологічний варіант бактерій цих родів встановлюють по поєднанню О- та Н-антигенів з урахуванням їх факторного складу.
12.2. Бактеріологічні дослідження
Другий день Переглядають титраційні посіви на скошеному МПА. При наявності повзучого ніжного вуалеподібного росту, визначають титр по найменшій кількості засіяного матеріалу, у якому виявлений ріст бактерій роду Proteus.
Після інкубації протягом 18-24 годин у термостаті при (37±1) ºС чашки з посівами переглядають і відзначають колонії, що підлягають подальшому дослідженню. На середовищі Плоскірева бактерії родів Proteus, Morganella та Providencia ростуть у вигляді прозорих колоній, злегка лужать середовище, що зафарбовується біля них у жовтуватий колір. При більш тривалому збереженні чашок з посівами колонії каламутніють, а їх центр здобуває буре фарбування. На вісмут-сульфіт-агарі через 48 годин штами бактерій роду Proteus виростають у вигляді ізольованих колоній зеленого кольору, колір середовища під колоніями не змінюється..Бактерії роду Providencia утворюють колонії різноманітних кольорів: від безколірних до оливково-зелених. Бактерії роду Morganella утворюють поліморфні колонії.
Якщо ріст 18–24-годинної культури однорідний, то для подальшого вивчення використовують не менше трьох колоній, при рості різних колоній для їх вивчення треба брати більше колоній, різних по зовнішньому вигляді.
Для визначення родової приналежності досліджуваного штаму ізольовані колонії відсівають у пробірки із скошеним поживним агаром і комбінованим середовищем Олькеніцького (Кліглера).
Третій і четвертий дні Враховують результати ферментативної активності культур на середовищі Олькеніцького (Кліглера). Грамнегативні культури, що ферментують глюкозу, гідролізують сечовину, утворюють сірководень і не ферментують лактозу, оцінюють як такі, що належать до роду Proteus.
Бактерії, що ферментують глюкозу, не ферментують лактозу, гідролізують сечовину оцінюють як ті що відносяться до роду Morganella. Бактерії, що ферментують глюкозу, не ферментують лактозу, не гідролізують сечовину, не утворюють сірководень можуть бути віднесені до роду Providencia.
Із скошеного МПА роблять пересів на середовища мінімального диференційного ряду для підтвердження відношення виділеної культури до групи Proteае та на додаткові середовища для визначення роду (таблиця 22). Через 18-20 год. інкубації при (37±1) ºС, враховують результати. Якщо виділена культура утворює фенілаланіндезаміназу, то вона відноситься до групи Proteае. По додаткових тестах визначають рід мікроорганізму. Штами, що не утворюють фенілаланіндезаміназу, підлягають подальшому вивченню для визначення їх належності до інших родів родини Еnterobacteriaceae. Для прискорення досліджень, отримання відтворюваних результатів доцільно для біохімічної ідентифікації використовувати діагностичні системи та набори, що зареєстровані в Україні, типу ЕНТЕРОтест (PLIVA-Lachema),АРІ (bioMereux).
Побачили розбіжність з офіційним текстом?