Страница 2: ГОСТ 9.049-91. ОСТ 9.049-91. ЕСЗКС. Материалы полимерные и их компоненты. Методы лабораторных испытаний на стойкость к воздействию плесневых грибов (42516)

3.5.2. При определении фунгицидных и фунгистатических свойств готовят среду Чапека-Докса с агаром по ГОСТ 9.048, разливают в чашки Петри в количестве 20- и дают застыть, материал очищают от внешних загрязнений по п.1.5.5 и размещают по одному в чашки Петри, при оценке грибостойкости материала по изменению характерных показателей - по пп.1.5.5-1.5.7.

3.6. Проведение испытаний

3.6.1. Готовят суспензию спор грибов в среде Чапека-Докса с сахарозой по ГОСТ 9.048, используя культуры грибов по п.1.3.

3.6.2. Дальнейший порядок проведения испытаний - по пп.1.6.2-1.6.10. Продолжительность испытаний при определении фунгицидных и фунгистатических свойств - не менее 14 сут.

3.7. Обработка результатов - по пп.1.7.1-1.7.4.

3.7.1. Определяют грибостойкость материала и его фунгицидные или фунгистатические свойства по таблице.

Оценка грибостойкости материала по степени развития плесневых грибов

3.7.2. Материал считают выдержавшим испытание, если на его поверхности обнаружены грибы, интенсивность развития которых оценивается не более балла 3 и характерные показатели не выходят за пределы, установленные НТД.

3.7.3. Результаты испытаний записывают в протокол по п.1.7.4.

4. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1. Грибостойкость материала обозначают индексом ПГ (плесневые грибы) с трехзначным числовым значением в правом нижнем углу, где последовательно фиксируют баллы, полученные при испытаниях методами 1, 2, 3.

Например, характеристику грибостойкости пресс-материала К-124-38 записывают К-124-38 ПГ, где

1 - грибостойкость материала по методу 1;

2 - грибостойкость материала по методу 2;

3 - грибостойкость материала по методу 3.

Если испытания не проводят по одному из перечисленных методов, то в обозначении вместо балла ставят знак X, например ПГ.

Характеристику грибостойкости после предварительного старения обозначают знаком С, например ПГС.

4.2. Характеристику грибостойкости материала, приведенную в п.4.1, вносят во вводную часть НТД на материал.

5. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ

Требования безопасности - по ГОСТ 9.048.

ПРИЛОЖЕНИЕ

Рекомендуемое

БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД ОЦЕНКИ РАЗВИТИЯ ПЛЕСНЕВЫХ ГРИБОВ НА ПОЛИМЕРНЫХ МАТЕРИАЛАХ

Метод распространяется на полимерные материалы (пластмассы, компаунды, резины, клеи, герметики) и их компоненты (полимеры, пластификаторы, наполнители, стабилизаторы, красители, пигменты и т.п.) и позволяет количественно определить степень развития плесневых грибов (далее - грибов) по методам 1, 2, 3 настоящего стандарта.

Сущность метода заключается в получении зависимости количественного показателя развития грибов (концентрации внутриклеточной аденозии-5’-трифосфорной кислоты динатриевой соли (АТФ) на поверхности материала) от времени их культивирования на полимерном материале с последующим определением грибостойкости по кинетическим параметрам развития грибов.

1. Отбор образцов

1.1. Отбор образцов - по п.1.2.1 настоящего стандарта.

1.2. Количество образцов на один отбор рассчитывают по ГОСТ 9.707, приложение 3.

Если относительная ошибка и вероятность попадания среднего арифметического значения показателя развития грибов в доверительный интервал не заданы, количество проб на один отбор должно быть не менее семи.

2. Аппаратура, материалы, реактивы

Аппаратура, материалы и реактивы - по п.1.4.1 настоящего стандарта.

Люминомер ЛБ-ЗП, 8702, 8703, 8705, 8707, БХЛ-06. Допускается использовать другие приборы аналогичного назначения, обеспечивающие измерение световых потоков от 10 до 10 квант/с, в области спектра 400-600 нм.

Весы для статического взвешивания по ГОСТ 29329.

Термостат, обеспечивающий температуру нагрева до 200 °С.

Холодильник бытовой электрический по ГОСТ 16317.

Дозаторы для отбора проб 0,01; 0,02; .

Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.

Колбы цилиндрические мензурные вместимостью до .

Пипетки вместимостью .

Аденозин-5’-трифосфорной кислоты динатриевая соль, 3-водная (АТФ).

Биолюминесцентный АТФ реагент иммолюм.

3. Подготовка к испытаниям

3.1. Образцы подготавливают к испытаниям по пп.1.5.1-1.5.6 настоящего стандарта.

3.2. Готовят раствор АТФ 1 ммоль/дм: 13,8 мг АТФ помещают в мерную колбу вместимостью , доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают до полного растворения. Раствор АТФ 1 ммоль/дм разливают по и хранят при температуре минус 20 °С. В замороженном виде раствор АТФ допускается хранить не более 3 мес.

3.3. Готовят стандартный раствор АТФ 10 мкмоль/дм: порцию раствора АТФ 1 ммоль/дм (по п.3.2) размораживают, отбирают с помощью дозатора раствора и помещают его в пробирку, содержащую дистиллированной воды. Стандартный раствор АТФ готовят непосредственно перед применением.

3.4. Готовят к употреблению биолюминесцентный АТФ-реагент иммолюм. В емкость, содержащую АТФ-реагента иммолюм на 10 анализов, добавляют дистиллированной воды, суспензию тщательно перемешивают и оставляют стоять при температуре (25±10) °С 2 ч. После этого реагент готов к использованию и может храниться в виде суспензии 7-10 сут в холодильнике при температуре 4 °С.

4. Проведение испытаний

4.1. Заражение и выдерживание образцов - по пп.1.6.1-1.6.7.

4.2. Отбор образцов для количественного определения показателя развития грибов на материале проводят с периодичностью один раз в сутки. Количество отборов должно быть не менее семи.

4.3. Определение показателя развития грибов прекращают, если концентрация АТФ в последующем отборе не увеличивается по сравнению с предыдущим. Максимальная продолжительность выдержки в условиях по п.1.6.1-1.6.7 настоящего стандарта - не более 56 сут.

4.4. Готовят экстракт АТФ из биомассы, образовавшейся на образце. Для этого образец помещают в колбу или чашку Петри, добавляют 0,0005-0,002 дм диметилсульфоксида (количество фиксируют), чтобы полностью покрыть его поверхность, интенсивно перемешивают 2-3 мин и оставляют стоять при температуре (25±10) °С не менее 3 ч.

4.5. Измеряют интенсивность люминесценции. Для этого в кювету люминометра пипеткой вносят суспензии биолюминесцентного АТФ - реагента иммолюм (п.3.4), предварительно тщательно ее перемешав. Кювету помещают в кюветное отделение люминометра и измеряют фоновое свечение , затем в ту же кювету вносят дозатором 0,01- экстракта АТФ (п.4.4) и измеряют интенсивность свечения образца . Затем в ту же кювету вносят дозатором 0,01- стандартного раствора АТФ (п.3.3) и измеряют интенсивность свечения .

5. Обработка результатов

5.1. Концентрацию АТФ (), мкмоль/см, в образце вычисляют по формуле

, (1)

где - концентрация стандартного раствора АТФ, равная 10 мкмоль/дм;

- объем экстракта АТФ, добавленного при измерении интенсивности люминесценции, см;

- объем стандартного раствора АТФ, добавленного при измерении интенсивности люминесценции, см;

- объем диметилсульфоксида, используемый для экстракции, см;

- площадь образца, см;

- порядковый номер образца в отборе, = 1, 2, 3....

5.2. Определяют экспериментальную среднюю концентрацию АТФ () в каждом из отборов.

5.3. Данные испытаний заносят в протокол (таблица).

5.4. Лаг-фазу () устанавливают по промежутку времени до появления , отличной от 0.

Определяют среднюю лаг-фазу () и заносят в протокол.

Если разность среднего с минимальным или максимальным значениями экспериментально полученных лаг-фаз превышает 50%, определяют грибостойкость на новой серии образцов.

5.5. Стойкость полимерных материалов к воздействию грибов определяют по параметрам , , кинетического уравнения, описывающего изменение ,

, (2)

где - средняя концентрация АТФ, мкмоль/см;

- максимальная средняя концентрация АТФ, мкмоль/см;

- средняя экспериментально полученная лаг-фаза;

- продолжительность выдержки, после которой произведен отбор, ч;

- коэффициент характеризующий удельную скорость развития грибов на материале, ч;

- коэффициент, характеризующий способность споры развиваться на материале при данных условиях;

- порядковый номер отбора (= 1, 2, ... , ).

Методом наименьших квадратов вычисляют коэффициенты и по формулам:

,* (3)

________________

* Соответствует оригиналу.

, (4)

где - число отборов.

5.6. Определенные по пп.5.5 коэффициенты и подставляют в формулу (2) и находят расчетные значения .

5.7. Рассчитывают среднее квадратическое отклонение () экспериментально полученных значений от расчетных по формуле

. (5)

Если среди экспериментальных значений имеются , которые не попадают в интервал , то их исключают из данных эксперимента и коэффициенты и вновь определяют по п.5.5 для оставшихся точек. Затем рассчитывают значение и снова исключают экспериментальные точки, не входящие в интервал . Расчет проводят до тех пор, пока все оставшиеся экспериментальные точки будут попадать в интервал при условии, что их количество должно быть не менее пяти. Если экспериментальные данные не удовлетворяют этому требованию, испытания повторяют.

5.8. Оставшиеся для расчета экспериментальные значения , и полученные по п.5.5 коэффициенты и подставляют в форму (2) и рассчитывают продолжительность лаг-фазы ().

5.9. Чем ниже значение и выше значения и , тем менее стоек полимерный материал к воздействию микроскопических грибов.

Таблица

ПРОТОКОЛ

испытаний грибостойкости полимерного материала

1. Наименование, марка материала

2. Завод-изготовитель

3. НТД, по которому выпускается