Посевы инкубируют при (37±1) °С не более 48 ч.
4.7. Подтверждение принадлежности выделенных сульфитредуцирующих микроорганизмов к роду Clostridium
4.7.1. Микроскопирование
Из культур, выросших, как указано в п.4.6, готовят два препарата и окрашивают по ГОСТ 10444.3*, первый - по Граму, второй - для выявления бактериальных спор.
_________________
* Действует ГОСТ 30425-97, здесь и далее по тексту.
Сульфитредуцирующие клостридии представляют собой грамположительные палочки, располагающиеся в одиночку, попарно, в виде цепочек или скоплений параллельных клеток. При спорообразовании споры сульфитредуцирующих клостридий овальные или сферические, субтерминальные или терминальные.
4.7.2. Определение отсутствия каталазы
Отсутствие каталазы в культурах, выросших, как указано в п.4.6, определяют по ГОСТ 10444.3.
Сульфитредуцирующие клостридии каталазу не образуют.
4.7.3. Подтверждение анаэробного роста
Подтверждение анаэробного роста проводят посевом по ГОСТ 10444.4 культур, выросших, как указано в п.4.6, в чашки Петри под стекло или в трубки Вейона. Для посева используют одну из агаризованных питательных сред, приготовленных по п.3.2.5 или 3.2.6, или 3.2.7, или 3.2.8, или 3.2.8.2. Посевы инкубируют в аэробных условиях при (37±1) °С в течение 18-72 ч.
Для сульфитредуцирующих клостридий характерен анаэробный рост.
Допускается взамен подтверждения анаэробного роста проводить определение отсутствия роста в аэробных условиях. При этом культуры высевают в чашки Петри на поверхность агаризованной среды.
Посевы инкубируют в аэробных условиях при (37±1) °С в течение 18-72 ч.
5. ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
5.1. Результаты испытания оценивают по каждой пробе отдельно.
5.2. Если при изучении культуральных, морфологических и биохимических свойств обнаружены сульфитредуцирующие грамположительные, каталазоотрицательные, способные расти в анаэробных условиях микроорганизмы, то дают заключение о том, что эти микроорганизмы относятся к сульфитредуцирующим клостридиям.
5.3. Если при подтверждении характерных колоний в 80% случаев, то есть не менее чем в 4 из 5 колоний подтвержден рост сульфитредуцирующих клостридий, то считают, что все характерные колонии, выросшие на чашке Петри (см. п.4.5), принадлежат к этой группе. В остальных случаях количество сульфитредуцирующих клостридий определяют исходя из процентного отношения подтвержденных колоний к общему количеству характерных колоний, взятых для подтверждения.
5.4. При определении НВЧ или при определении присутствия (отсутствия) сульфитредуцирующих клостридий в определенной навеске продукта посевы в вязкие среды считают положительными, если при последующем пересеве и подтверждении характерных колоний хотя бы в одной колонии будут обнаружены сульфитредуцирующие клостридии.
5.5. Пересчет количества сульфитредуцирующих клостридий на 1 г (см ) продукта проводят по ГОСТ 26670.
5.6. НВЧ сульфитредуцирующих клостридий в 1 г (см ) продукта определяют по количеству положительных пробирок, пользуясь таблицей, приведенной в ГОСТ 29184.
5.7. Результаты определения количества сульфитредуцирующих клостридий записывают по ГОСТ 26670.
5.8. Результаты выявления присутствия (отсутствия) сульфитредуцирующих клостридий с указанием навески продукта записывают следующим образом: сульфитредуцирующие клостридии обнаружены (или не обнаружены).
Текст документа сверен по:
официальное издание
М.: Издательство стандартов, 1992
